利用超灵敏真菌毒素快检法建立高效的食品加工过程质量监控体系

林玉惠 陈伟民 袁如英 黄叙吟 刘丽强

摘 要：本文通过采用自主研发的黄曲霉毒素B1胶体金快速测试卡，结合精密仪器、精密试纸等精确定量检测，强化集成创新，研发快速检测和非定向筛查技术及产品，有效开展产品生产过程中关键控制点的黄曲霉毒素B1（真菌毒素）的检测和监控的验证，为粮油食品生产安全的检测提供精确装备，建立高效质量监控体系，验证可取代传统检测方法确保食品生产过程的质量。

关键词：黄曲霉毒素B1胶体金快速测试;关键控制点;验证方法

黄曲霉毒素对人类和动物的健康有一定的毒害作用，真菌毒素的毒性最强，严重可致癌，甚至致死，危害巨大[1-2]。

粮油食品是基础食品原料，是生活中的主要食品。这类食品是淀粉、油脂含量较多的物质，易被黄曲霉、寄生曲霉等产生的衍生物黄曲霉毒素污染[3]，被污染的农作物可将真菌毒素传递到食品中，具有较大食品安全隐患，对居民身体健康造成严重威胁[4-5]。超灵敏真菌毒素快检法的应用有利于建立高效的产品质量安全监控体系，对提高产品的安全性具有较大的作用。

常用的真菌毒素检测方法主要有液相色谱-质谱法、荧光光度法、同位素稀释液相色谱-串联质谱法、高效液相色谱-柱前衍生法、高效液相色谱-柱后衍生法、高效液酶联免疫吸附筛查法、薄层色谱法、高效液相色谱法、免疫亲和层析净化液相色谱法、试剂盒法、速测卡法等[1]，其中速测卡法具有灵敏性、快速性、特异性强等优势，真菌毒素快速检测具有广阔的发展前景。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 材料

大米、燕麦、花生

1.1.2 主要试剂

70%甲醇水溶液;AFB1胶体金快速定量检测卡;胶体金快速定量检测稀释液;甲醇（CH3OH）：色谱纯;乙腈（CH3CN）：色谱纯;正己烷（C6H14）：色谱纯;三氟乙酸（CF3COOH）。

1.1.3 主要仪器设备

分析天平（0.001 g和0.000 1 g）;超声波振荡器;磁力搅拌器;离心机（转速6 000 r/min）;定时计时器;孵育器;荧光免疫分析仪;高速粉碎机;微波烘干机;液相色谱仪：配荧光检测器;氮吹仪;电热恒温箱;pH计。

1.2 实验方法

1.2.1 检测验证对象

参考标准《粮食卫生标准的分析方法》（GB/T 5009.36—

2003），确定本次验证粮食制品为大米、燕麦和花生在各自生产工艺过程中不同质量关键控制点取样进行检测验证，验证的真菌毒素为黄曲霉毒素B1。验证方法为常规普通检测方法用《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》（GB 5009.22—2016）中的高效液相色谱-柱前衍生法和快速检测方法用胶体金快速测试卡法，采用自主研发的黄曲霉毒素B1胶体金快速定量检测卡（定量范围为2.5～50 μg/kg）[2]。

1.2.2 样品的制备

汕头市天悦科技创新研究院有限公司根据大米、燕麦和花生等各种物料生产工艺过程中各关键控制点进行取样。

1.2.3 各物料的生产工艺流程及质量安全关键控制点设定

（1）大米制作成复水米饭工艺流程及质量安全控制点设定。工艺流程为：大米→清洗→蒸煮→烘干→成品（复水米饭）。质量安全关键控制点为：①原料大米;②蒸煮后米饭;③成品复水米饭。

（2）燕麦的生产工艺流程。燕麦→清洗→蒸煮→压片→烘干→成品（燕麦片）。质量安全关键控制点为：①原料燕麦;②蒸煮后压片燕麦;③成品燕麦片。

（3）花生制作花生油。花生→清洗→脱干→压榨→成品油（花生油）和花生渣。

质量安全关键控制点为：①原料花生;②花生油;③花生渣。

2 结果与分析

2.1 复水米饭生产过程质量检测

由表1可知，大米生产过程关键控制点检测结果的准确性。根据同一关键控制点2种不同检测方法的检测结果，每个关键控制点共进行3批次有效的检测，总共出现误判次数为0次，故判定准确率为100%。

2.2 燕麦片生产过程质量检测

由表2可得，燕麦生产过程关键控制点检测结果的准确性。根据同一关键控制点2种不同检测方法的检测结果，每个关键控制点共进行3批次有效的检测，共出现误判次数为0次，故判定准确率为100%。

2.3 花生油生产过程质量检测结果

由表3可得花生生产过程关键控制点检测结果的准确性。根据同一关键控制点2种不同检测方法的检测结果，每个关键控制点共进行3批次有效的检测，共出现误判次数为0次，故判定准确率为100%。

2.4 稳定性

根据上述检测结果，按照超过限量标准判定为阳性的原则，3种不同产品批次在各关键控制点的测定结果可见检测对比正确、稳定。

2.5 快捷性

以上的检测过程中，每次快检检测时间都在15 min以内，测定结果快速、稳定。

3 结论

本研究通过采用自主研发的黄曲霉毒素B1胶体金快速测试卡，同时结合精密仪器、精密试纸等的精确定量检测，强化集成创新，研发快速检测和非定向筛查技术及产品，有效开展产品生产过程中关键控制点的黄曲霉毒素B1（真菌毒素）的检测和监控的验证，为粮油食品生产安全的检测提供精确装备，建立高效质量监控体系，验证可以取代传统检测方法确保食品生产过程的质量。黄曲霉毒素B1胶体金快速测试卡，具有快速测定和操作简单的优点，在生产过程中能大大地提高检测效率，可快速有效开展生产过程及产品中黄曲霉毒素B1的检测和监控，确保食品生产过程质量安全，具有重要的经济价值和社会价值。

参考文献

[1]刘峰良，赵志辉，谢晶.谷物中真菌毒素的研究进展[J].广东农业科学，2012，39（19）：115-119.

[2]王镱睿，粮食中常见的真菌毒素及其限量标准、检测方法[J].山西农经，2019（6）：119-121.

[3]赵丽杰，高星，吴丽华.粮食及其制品中真菌毒素限量标准及检测方法概述[J].现代面粉工业，2019，33（3）：26-28.

[4]王海涛.粮食中真菌毒素快速定量检测方法应用研究[J].饮食科学，2017（8）：15.

[5]王文珺，桑华春.真菌毒素免疫检测技术的研究进展[J].食品安全导刊，2017（16）：24-26.

基金项目：2020年广东科技专项资金项目“粮油食品中真菌毒素的快速检测关键技术研究”（200119165873020（汕府科〔2020〕年53号文件-103））。

作者简介：林玉惠（1974—），女，汉族，广东汕头人，本科，高级食品工程师。研究方向：轻工先进技术研究及成果转化。

陈伟民（1973—），男，汉族，广东汕头人，本科，助理工程师。研究方向：食品研究及开发。

袁如英（1980—）女，汉族，广东汕头人，本科，工程师。研究方向：高新技術及产业化。