东兴市活禽市场禽流感流行病学调查

曹显永

摘  要：为掌握中越边境地区禽流感流行趋势，2013年10月～2020年10月对辖区内活禽销售市场进行系统监测。监测结果显示：活禽市场内常年都有病毒循环，呈多亚型病毒共存状态;环境样品的阳性率高达30.82%，家禽样品阳性率为20.77%。市场调查发现：东兴市的活禽销售市场规模不大而交易频繁;市场交易活禽主要来自本地小型养殖场、广西其他地区活禽交易批发市和规模养殖场以及边境走私家禽;活禽市场生物安全措施不到位，也未严格执行休市制度。监测和调查结果表明，东兴市活禽销售市场管理水平低，家禽来源复杂;市场环境污染严重，多种亚型禽流感病毒共存，且存在家禽隐性带毒现象，因而有病毒散播风险。因此需要加强禽流感监测力度，提高活禽市场的管理水平和生物安全措施。

关键词：活禽市场;禽流感病毒;监测;流行病学调查;东兴市

中图分类号：S858.311.3        文献标识码：B        文章编号：1673-1085（2021）7-0033-04

東兴市位于广西壮族自治区南部，临海临边，东南濒临北部湾，西南与越南接壤。东兴活禽市场家禽交易频繁，市场不休市，未销售完的家禽会滞留在此数日，大量不同来源的鸡、水禽、野鸟等在同一空间共处，给禽流感病毒基因变异、基因重组、跨种传播提供了便利。为摸清东兴市活禽市场家禽禽流感和市场带毒情况，2013年以来国家和自治区就在东兴市开展禽流感监测和流行学调查工作，本研究对2013年10月～2020年10月东兴市活禽市场禽流感监测数据进行分析，以期掌握东兴市活禽市场禽流感流行状况。

1 材料与方法

1.1 材料

H1～H16 亚型禽流感标准阳性血清，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供;RNA 提取试剂盒 TaKaRa Mini BEST Viral RNA/DNA Extraction KitVer.5.0，购自大连宝生物工程有限公司;禽流感病毒荧光PCR 试剂盒（H1～H16亚型），购自上海之江生物科技股份有限公司;SPF 鸡胚，购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。

1.2 方法

1.2.1 采样地点 东兴市辖区内的6个活禽销售市场。

1.2.2 采样方法 对6个活禽销售市场全部采样，每个市场采集约100份家禽拭子（水禽80份、鸡20份）和20份环境拭子。每季度1次。

1.2.3 流行病学调查 在采集样品的同时，收集市场基本信息，包括样品来源、家禽流通情况以及生物安全管理状况等数据。

1.2.4 病毒分离和鉴定 在哈尔滨国家禽流感参考试验室进行。将拭子样品接种SPF鸡胚进行增毒，再用血凝试验（HA）、血凝抑制试验（HI）和荧光RT-PCR 方法鉴定流感病毒及亚型。

1.2.5 统计分析 用Microsoft excel 软件，统计分析样品的病毒分离及亚型鉴定结果。

2 结果

2.1 广西边境地区活禽市场禽流感监测结果

2.1.1 禽流感病毒分离情况 从2013年10月～2020年10月份，共进行了25次采样，共采集样品3513份，共分离到禽流感病毒763株，阳性率达21.72%，分离到病毒亚型有H1、H3、H4、H6、H7、H9、H10和H11等多种亚型，其中以H3、H6和H9亚型最多。在763株禽流感病毒中，在市场环境中分离到102株，阳性率为30.82%（102/331）;在家禽中分离到661株，阳性率为20.77%（661/3182）。

2.1.2 群间分布 分离出病毒的阳性样品来源包括鸡、鸭、鹅和环境，其中水禽样品的阳性率显著高于鸡（图1）。

不同种类的家禽分离出禽流感病毒亚型及阳性率有所不同。鸡源样品分离到H3、H4、H6、H7、H9、H10等亚型病毒，阳性率为10.71%（156/1456）;鸭源样品分离到H1、H3、H6、H7、H9、H11等亚型病毒，阳性率为32.13%（408/1270）;鹅源样品分离到H3、H6、H9等亚型病毒，阳性率为21.27%（97/456）。

2.1.3 市场禽流感病毒时间分布情况 如果按季节区分，春季病毒分离率为16.14%（113/700），夏季为13.13%（125/952），秋季为18.70%（43/230），冬季为29.55%（482/1631），夏季的病毒分离率最低，显著低于冬季。因此，东兴市活禽市场一年四季都有病毒在循环。10～12月份样品的阳性率处在一个较高的水平，3～6月份样品的阳性率要低得多，详见图2。

2.2 活禽销售市场基本状况

2.2.1 家禽贸易 东兴市民日常以活禽消费为主，活禽贸易比较频繁，呈常态化。活禽销售市场每天都开放，未销售完的家禽都会在市场留存过夜。东兴市行政区域面积小，下辖3个镇，2020年末常住人口16.54万，活禽年交易量在40万只左右，每个活禽市场每日交易量在几十到几百只之间。东兴市活禽销售市场的家禽来源：①本地养殖场（户）：2020年东兴市全年家禽出栏量为46万羽，年未存栏60万羽;有小规模养场50个;由于海鸭蛋产品畅销，东兴市鸭的养殖数量达40万～50万，在家禽中占比较大;②区内规模养殖场：主要来自相邻的钦州、北海、南宁等市的规模养殖场，由养殖场定期送货;③区内各大活禽批发市场：包括南宁、玉林、钦州和贵港等市的大型活禽批发市场，主要是商贩自行到防城港市防城区的活禽交易批发市场进货;④走私活禽、走亲访友携带活禽入境的行为时有发生，存在越南活禽流入市场的隐患。

2.2.2 活禽销售市场的管理 市场准入制度不完善，没有安排专人对市场内的活禽进行查证验物，市场监管机制存在欠缺。市场休市制度落实不到位，配备消毒、无害化处理设施设备不足，笼子器具清洁消毒不彻底。目前，东兴市已有1个活禽市场完成升级改造，商户之间分隔开，每户内部又设置独立的销售、待宰、屠宰“三分区”，地面墙壁铺设瓷砖方便清洗消毒，这类设施改造将有利于切断病原在活禽市场的循环，对禽流感防控起到积极作用。

3 討论

东兴市活禽销售市场禽流感病毒阳性率为21.27%，显著高于广西边境地区活禽市场禽流感病毒平均阳性率15.95%，市场环境阳性率（30.82%）也显著高于广西边境地区（23.65%）（邹联斌等，2018）[1]，这说明东兴市活禽销售市场流感病毒污染非常严重，这和活禽销售市场老旧和长期不休市、不清洗消毒有很大关系。

监测结果显示，东兴市活禽销售市场出现多种亚型禽流感病毒共存的现象，不同亚型的流感病毒长期在市场里循环增殖，容易发生基因重组而变异，需要引起高度重视。

监测结果显示，在东兴市活禽销售市场中H3、H6和H9亚型禽流感病毒为优势毒株，而亚型H3、H6禽流感病毒又以水禽来源为主，鸡源H9亚型禽流感病毒也远高于水禽。表明一些亚型AIV对宿主有一定的偏嗜性，这结论与莫胜兰[2]、黄建龙[3]等人研究结论一致。监测结果也揭示水禽是流感病毒的重要宿主。虽然2013年12月和2014年10月两次在鸭体内分离到H7亚型禽流感病毒，但最终鉴定不是高致病性H7N9禽流感，而是常见的低致病性H7亚型禽流感。今后，我中心将继续配合上级部门，以便更好地开展高致病性禽流感疫情风险评估工作。

根据东兴市历年气象统计数据显示，12月至次年2月是一年中温度较低的时期，其中1月份的平均气温最低。低温有利于禽流感病毒的生存。但监测结果显示，10月和11月份的病毒分离率最高，这说明气温不是决定AIV分布的唯一因素，需要综合考虑社会、环境和经济等多方面因素。

4 结论

经过长期系统的流行病学调查和监测发现，东兴市活禽销售市场禽流感病毒污染严重，多种亚型病毒共存;市场上家禽交易频繁、来源复杂，且市场管理水平低、生物安全措施不到位;加之东兴市处于边境和候鸟迁徙线上，地理位置特殊。因此，需要对东兴市的禽流感防控多加关注，加强禽流感监测力度，推行活禽市场升级改造，提高市场监管力度。

参考文献：

[1] 邹联斌，莫胜兰，屈素洁，等.广西边境地区活禽批发市场禽流感流行病学监测[J].中国动物检疫，2018，35（05）：1-4.

[2] 莫胜兰，尹彦文，施开创，等.广西边境地区家禽H9亚型流感病毒调查[J].中国预防兽医学报，2018，40（09）：775-778.

[3] 黄建龙，王昌建，邓国华，等.2015-2016年湖南省长沙市活禽批发市场禽流感流行病学调查[J].中国动物检疫，2018，35（02）：5-8.

Abstract： In order to recognize the situation of Avian influenza in China-Vietnam border areas，a systematic monitoring towards AIV infection in live birds markets（LBMs）of Dongxing city was carried out during October 2013 to October 2020. The surveillance results showed that LBMs in Dongxing were seriously polluted by AIV，and multiple subtypes of AIV coexisted. the positive rate of environmental samples was 30.82%，while the positive rate of  birds samples was 20.77%. The market survey showed that LBMs in Dongxing were small-scale but the trading frequency was high. Birds in these LBMs were mainly from local small-scale farms，live birds wholesale markets and large-scale farms from other areas of Guangxi or other countries outside of China（by cross-border smuggling）. LBMs in Dongxing had poor bio-security measures， and closing-market system was not implemented strictly. Monitoring and survey results showed that management level of LBMs was low，and the sources of live poultry were complex. AIV pollution in these LBMs was serious，the multiple virus subtypes were accumulating in the markets for a long time，and the phenomenon of recessive infection existed，indicating there was a risk of virus spreading. Therefore，it was necessary to intensify the monitoring of AIV and to improve management and  bio-security measures in these LBMs.

Keywords： LBMs ; AIV ; surveillance ; epidemiological survey ; Dongxing