麻布七化学成分的研究

王菲，张娇，李玉泽，罗定强，宋小妹*（1.陕西省食品药品监督检验研究院，西安 710065；.陕西中医药大学 药学院，陕西 咸阳 71046）

麻布七又名高乌头，为毛茛科乌头属（AconitumL.）植物高乌头Aconitum sinomontanumNakai的根。因其根大多分支，并且有的从主根头部直接分支，且下部须根较多，延长相互交织，结如网状，中空，形如麻袋，故名“麻布七”，又因其有治疗跌打损伤、骨折的功效，故又名“碎骨还阳”。其药性味苦、辛，性温；有毒。具有祛风除湿、理气止痛及活血消肿的功效。临床常用于治疗类风湿关节炎、跌打损伤、胃痛、胸腹胀满、急慢性菌痢、急慢性肠炎、瘰疬、疮疖等症[1]。目前从麻布七中分离了28 个化合物，其中生物碱27 个（二萜类生物碱26 个[2-4]），主要化学成分为二萜类生物碱，这类成分多具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、抗癫痫、抗寄生虫和改善心血管等作用[5-7]，麻布七中高乌甲素成分的抗炎镇痛作用也较明显[8-9]。为了进一步开发利用本植物，本实验对麻布七的化学成分进行了研究，从中分离得到5 个化合物（见图1），其中化合物1～4 为首次从该植物中分离得到。

图1 化合物1～5 的结构Fig 1 Structures of compounds 1～5

1 材料

核磁共振仪（型号：Burker AVANCE 400 型，瑞士Burker 公司）；三用紫外线分析仪（型号：ZF-1，上海金鹏分析仪器有限公司）；电子分析天平（型号：OB204，万分之一，瑞士METTLER TOLEDO 公司）；Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶（美国GE 公司）；数控超声波清洗器（型号：KQ-500DE，昆山市超声仪器有限公司）；半制备液相色谱仪（型号：岛津LC-6AD，检测器SPD-20A，日本Shimadzu 公司）；柱色谱硅胶（100～200 目）、薄层色谱用硅胶G（青岛海浪硅胶干燥剂有限公司）；半制备色谱柱（型号：YMC-Pack R&D ODS-A，5 μm，10 mm×250 mm）；旋转蒸发仪（型号：EYELAN OSB-2100）、水浴锅（型号：HH-2）（常州国华电器有限公司）；色谱甲醇（天津市科密欧公司）；娃哈哈纯净水；分析甲醇、二乙胺、丙酮、三氯甲烷、石油醚（30～60℃）（天津科密欧公司）；显色剂为碘化铋钾溶液（源叶生物）。

麻布七药材于2016年7月采自陕西省太白山，经陕西中医药大学王继涛教授鉴定为毛茛科乌头属植物高乌头Aconitum sinomontanumNakai的干燥根。存放于陕西中医药大学药学院中药标本室（标本号：20160727）。

2 提取与分离

称取麻布七药材5.0 kg，粉碎，10 倍量80%乙醇80℃回流提取3 次，每次1.5 h，滤过，合并滤液，减压浓缩得浸膏。将浸膏分散于盐酸水溶液，用稀盐酸调pH 至1，石油醚萃取酸水液，萃取后水相用氨水调pH 至10，用三氯甲烷萃取碱水相得到总生物碱（256 g）。

取总生物碱，经硅胶柱色谱，石油醚-丙酮-二乙胺（50∶1∶0.1～1∶1∶0.1）梯度洗脱，得到4 个部分（Fr.1～Fr.4）。Fr.1 经硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮-二乙胺（50∶1∶0.1～1∶1∶0.1）洗脱，得到Fr.1-1 和Fr.1-2 组分，将Fr.1-2 组分采用丙酮进行重结晶得到化合物2（20 mg），Fr.1-1 组分经Sephadex LH-20 凝胶柱色谱分离得到化合物5（20 mg）。Fr.2 经硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮-二乙胺（40∶1∶0.1～1∶1∶0.1）洗脱得到Fr.2-1 和Fr.2-2 组分，将Fr.2-1 组分纯化得到化合物3（15 mg），Fr.2-2 组分经半制备高效液相（75%甲醇-水）分离得到化合物4（10 mg）。Fr.3经硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮-二乙胺（30∶1∶0.1～1∶1∶0.1）洗脱得到化合物1（15 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无定型白色粉末，碘化铋钾反应阳性（红棕色），表明该化合物可能为生物碱类。分子量为495 [M]＋；1H-NMR（400 MHz，CDCl3）中δH1.07（3H，t，J＝7.2 Hz），2.75（1H，m），2.98（1H，m）显示该化合物含有一个N-CH2CH3基团；δH2.00（3H，s）推测含有-OCOCH3；δH3.34（6H，s），3.33（3H，s）显示该化合物含有3个-OCH3；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）谱图显示26 个碳信号，其中δC172.6，22.8 推测为乙酰基信号，δC90.2，88.1，82.2，78.3，77.5，75.9，72.9 为7 个连氧碳信号，通过与文献[10]中化合物delcosine 相比，发现多出两个碳信号，分别为δC172.6 和22.8，可归属为一个乙酰基信号。结合上述信息，化合物1 比delcosine 结构只多出一个乙酰基；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δC：72.9（C-1），27.7（C-2），29.6（C-3），37.8（C-4），45.4（C-5），90.2（C-6），88.1（C-7），78.3（C-8），45.5（C-9），39.6（C-10），49.0（C-11），29.5（C-12），44.2（C-13），75.9（C-14），34.7（C-15），82.2（C-16），66.5（C-17），77.5（C-18），57.3（C-19），13.9（N-CH2-CH3），50.6（N-CH2-CH3），57.6（6-OCH3），56.7（16-OCH3），59.3（18-OCH3），171.4（14-OCOCH3），22.8（14-OCOCH3）。以上数据与文献[11]报道一致，故化合物1 鉴定为acetyldelcosine。

化合物2：无色晶体（甲醇），碘化铋钾反应阳性（红棕色），表明该化合物可能为生物碱类。HR-EI-MS 显示m/z495.2328 [M]＋；1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δH1.03（3H，t，J＝7.1 Hz），2.90（1H，m），2.81（1H，m）推测该化合物含有一个-N-CH2CH3基团；δH3.25（3H，s），3.29（3H，s），3.35（3H，s），3.46（3H，s）推测该化合物含有4 个-OCH3，δH1.99（3H，s）可能归属为一个乙酰基质子信号；δH4.02（1H，s）和2.84（1H，s）推测可能为6 位和17 位的氢质子信号；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）显示26 个碳共振信号，δC91.3，89.9，84.6，84.4，82.7 和78.9 为6 个连氧碳信号；δC172.0 和22.2 归属为一个乙酰基信号；δC51.8 和14.5 可归属为N-CH2CH3信号。结合上述信息推断该化合物为乌头碱型C19类二萜生物碱。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δC：85.4（C-1），28.0（C-2），32.3（C-3），82.7（C-4），56.0（C-5），91.3（C-6），89.9（C-7），78.9（C-8），45.0（C-9），47.1（C-10），52.2（C-11），29.7（C-12），39.4（C-13），84.4（C-14），34.8（C-15），84.6（C-16），65.6（C-17），56.7（C-19），14.5（N-CH2-CH3），51.8（N-CH2-CH3），58.0（1-OCH3），59.1（6-OCH3），56.5（14-OCH3），56.6（16-OCH3），171.2（4-OCOCH3），22.2（4-OCOCH3）。以上数据与文献[12]报道一致，故化合物2 鉴定为kirinenine A。

化合物3：白色无定形粉末，碘化铋钾反应阳性（红棕色），表明该化合物可能为生物碱类，UV 254 nm 外有吸收。HR-EI-MS 显示m/z357.2274 [M]＋；1H-NMR（CDCl3，400 MHz）谱中：δH1.00（3H，t，J＝7.1 Hz），2.60（1H，m），2.69（1H，m）推测该化合物具有一个-NCH2CH3；δH0.82（3H，s）推测该化合物含有一个叔甲基；δH5.18（2H，brd，J＝1.5 Hz）显示该化合物含有一个-C＝CH2基团；δH1.14（1H，dd，J＝4.3 Hz）和1.85（1H，dd，J＝6 Hz）可分别归属为C-14上的两个H 质子信号；2.45（1H，d，J＝6 Hz）可归属为C-13 上的H 质子信号。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）显示22 个碳共振信号，δC157.8和109.7 分别为-C＝CH2信号，δC48.5 和14.4为-NCH2CH3信号，综上所述该化合物为napelline型C20二萜类生物碱；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δC：68.0（C-1），30.1（C-2），24.7（C-3），38.0（C-4），32.7（C-5），24.2（C-6），46.9（C-7），50.7（C-8），46.1（C-9），52.1（C-10），28.0（C-11），76.6（C-12），49.0（C-13），30.6（C-14），77.8（C-15），157.8（C-16），109.7（C-17），19.2（C-18），93.2（C-19），66.2（C-20），14.4（N-CH2-CH3），48.6（N-CH2-CH3）。以上数据与文献[13]报道基本一致，故化合物3 鉴定为dehydronapelline。

化合物4：白色无定形粉末，碘化铋钾反应阳性（红棕色），表明该化合物可能为生物碱类，UV 254 nm 外有吸收。分子量为359；1H-NMR（CDCl3，400 MHz）：δH1.02（3H，t，J＝7.1 Hz），δH2.30（1H，m）和2.68（1H，m）显示该化合物具有一个-NCH2CH3；δH0.67（3H，s）推测该化合物含有一个叔甲基；δH5.01（1H，s），δH5.21（1H，s）推测该化合物含有一个-C＝CH2基团。13C-NMR（100 MHz，CDCl3）显示22 个碳共振信号，δC71.1，73.4 和78.2 可归属为3 个连氧碳信号；δC154.8 和109.5 可归属为-C＝CH2信号；δC50.9 和13.9 可归属为-NCH2CH3信号。综上所述推测该化合物为C20类二萜生物碱；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δC：71.1（C-1），31.5（C-2），38.9（C-3），33.9（C-4），51.2（C-5），23.3（C-6），47.0（C-7），43.9（C-8），54.4（C-9），52.6（C-10），73.4（C-11），42.5（C-12），24.8（C-13），27.7（C-14），78.2（C-15），154.8（C-16），109.5（C-17），26.2（C-18），57.3（C-19），67.9（C-20），13.9（N-CH2-CH3），50.9（N-CH2-CH3），以上数据与文献[14]报道一致，故化合物4 鉴定为11-α-hydorxy-lepenine。

化合物5：白色无定型粉末。1H-NMR（CD3OD，400 MHz）δH：0.71（3H，s，H-18），1.01（3H，s，H-19），0.94（3H，d，J＝6.4 Hz，H-21），0.88（3H，d，J＝7.7 Hz），0.85（3H，d，J＝7.7 Hz）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δC：38.7（C-1），33.2（C-2），72.6（C-3），43.6（C-4），142.4（C-5），122.6（C-6），33.4（C-7），32.5（C-8），51.9（C-9），37.8（C-10），22.3（C-11），41.3（C-12），43.2（C-13），58.3（C-14），25.5（C-15），30.6（C-16），57.6（C-17），12.5（C-18），20.0（C-19），37.6（C-20），19.5（C-21），35.3（C-22），27.4（C-23），47.5（C-24），30.9（C-25），19.6（C-26），20.3（C-27），24.3（C-28），12.4（C-29）。以上数据与文献[15]报道一致，故化合物5 鉴定为β-谷甾醇。

4 讨论

本实验从麻布七中共分离得到4 个生物碱。近年来，麻布七的药理活性主要围绕高乌甲素及N-去乙酰基高乌甲素进行研究；另有研究发现delcosine 和lepenine 为麻布七治疗类风湿关节炎的有效成分，为麻布七治疗类风湿关节炎等炎症提供科学依据[16]。而关于本研究中4 个生物碱的活性及其作用机制未见有报道，有待进一步研究。