抗疏水配体结合蛋白多肽抗体对干燥综合征诊断价值的Meta分析

张玉飞 李坤 魏琴 冯艳广 黄云慧 李长红

干燥综合征(SS)是临床上较常见的慢性全身性自身免疫性疾病之一，其特征症状为口腔干燥和干燥性角结膜炎[1]。在2002年欧洲风湿病联盟(EULAR)[2]或2012年美国风湿病学会(ACR)[3]关于SS的诊断标准中，抗SSA抗体和抗SSB抗体均作为诊断SS的血清学生物标志物，二者在疾病的发生和发展中起到重要作用。SS的病因尚不完全清楚，可能与遗传、病毒感染、环境及激素等因素有关。近年研究显示在SS中尚有一些新型生物标记物，如疏水配体结合蛋白(LCN)。LCN是脂笼蛋白超家族的一个成员，主要由泪腺和舌腺合成分泌，可清除亲脂性和潜在有害物质，因此可作为上皮细胞的一般保护因子[4-6]。既往研究结果显示，SS患者中LCN或抗LCN多肽抗体增加，抗LCN多肽抗体可能在SS诊断中有一定作用[7]。因此我们总结了有关LCN或抗LCN多肽抗体对SS的诊断价值的敏感度、特异度、似然比(LR)及诊断比值比(DOR)，并做循证医学分析。

资料与方法

1.资料：文献纳入标准：(1)研究目的为评价抗LCN多肽抗体对SS的诊断价值；(2)SS组患者均符合2002年EULAR或2012年ACR修订的诊断标准，对照组为健康人或其他风湿病患者；(3)能直接通过文献中提供的数据获得或通过计算得出真阳性例数(TP)、假阳性例数(FP)、假阴性例数(FN)及真阴性例数(TN)。文献排除标准：(1)对重复发表研究，选择最新或报道最全面的研究；(2)不能获得摘要或全文的研究；(3)无法准确提取数据的研究；(4)结局指标不一致的研究；(5)尚未公开发表的文献及会议论文。

2.方法：计算机检索CBM数据库、PubMed数据库、Embase数据库、Cochrane图书馆、Web of science数据库，检索词为：Sjögren’s Syndrome、Lipocalins。所有检索均采用主题词与自由词相结合的方式。检索时间为自建立数据库开始截止到2020年1月30日。资料提取由两位研究者独立完成，然后进行结果比对，如遇意见不一致时双方讨论解决。提取内容如下：(1)LCN抗原、抗LCN多肽抗体在SS中的诊断价值；(2)研究背景：第一作者、发表年限、国家、样本量、疾病病程、患者年龄、诊断标准、检测方法及检测数据结果，包括TP、FP、FN及TN，或通过计算获得以上数据。由两位研究员使用Review Manager 5.3软件自带的QUADAS软件独立对文献质量进行评价,意见不一致时讨论决定。评价条目主要包括：风险偏移(患者选择、待评价试验、金标准、病例流程及进展情况共4项条目)及临床适用性评价(患者选择、待评价试验、金标准3项条目)，并对纳入的条目逐条按“是”、“否”、“不清楚”进行评价。

3.统计学处理：应用Meta-Disc 1.4、Stata 16.0软件分析合并敏感度、特异度、阳性似然比(+LR)、阴性似然比(-LR)、DOR、综合受试者工作特征(SROC)曲线下面积(AUC)。采用χ2检验判断各研究之间的异质性，I2判断研究之间异质性的大小和显著情况。在研究无统计学异质性(I2≤50%)的情况下，应用固定效应模型(FEM);在研究有统计学异质性(I2>50%)的情况下，应用随机效应模型(REM)。以P<0.05差异有统计学意义。

结 果

1.文献检索结果：初步筛选出48篇相关文献，排除重复文献7篇，通过阅读标题和摘要，再排除31篇文献，剩余10篇文献。通过阅读全文，有4篇文献[8-11]符合纳入标准。纳入文献的基本信息见表1。

表1 纳入文献的基本信息

2.研究质量评价：4篇文献中，其中文献[10]完全符合7项条目，文献[9，11]符合6项条目，文献[8]符合5项条目。

3.Meta分析结果

(1)异质性检验：根据阈值效应检验，敏感度对数与1-特异度对数的Spearman分析结果显示，相关系数为0.20，P=0.80，表明纳入研究不存在阈值效应。

(2)合并统计量：研究共纳入4篇文献，合并统计量，抗LCN多肽抗体诊断SS敏感度为0.62(95%CI0.37～0.82)，特异度为0.78(95%CI0.67～0.86)，+LR为2.81(95%CI1.97～4.01)，-LR为0.48(95%CI0.27～0.86)，DOR为5.80(95%CI2.57～13.11)，SROC曲线下面积(AUC)=0.79。结果显示，抗LCN多肽抗体诊断SS具有较高的敏感度和特异度，抗LCN多肽抗体对SS诊断有一定准确性。见图1～3。

图1 抗LCN多肽抗体诊断SS合并敏感度和特异度的森林图

图2 抗LCN多肽抗体对诊断SS似然比的森林图

(3)发表偏倚：应用Stata 16.0软件绘制漏斗图评估研究发表偏倚，P值=0.53，未发现明显的发表偏倚。

讨 论

SS是一种常见的慢性自身免疫性疾病，难以治愈，早期诊断和治疗可延缓疾病进展，改善预后，从而提高患者的生活质量。当前诊断SS多采用2002年EULAR或2012年ACR的分类标准，该分类标准中均包含了血清学指标抗SSA抗体和抗SSB抗体，但仍有部分抗SSA抗体、抗SSB抗体血清学阴性SS患者，因此，需要寻求新的生物标志物以进一步提高SS诊断水平。近年来，在类风湿关节炎中发现了时钟基因新型生物标志物[12]，而在SS患者中，发现LCN或抗LCN多肽抗体增加，且可能为其特征性改变。LCN或抗LCN多肽抗体可能是诊断SS的潜在生物标志物。因此，我们系统性评估了抗LCN多肽抗体在SS中的诊断价值。

图3 抗LCN多肽抗体诊断SSDOR的森林图

早在1956年即有学者在人类泪液中分离出LCN，直至1992年才被确定其为脂蛋白的一种。后来，有学者发现编码人唾液腺蛋白的cDNA序列与泪液中相同，因此证明LCN蛋白存在于泪腺和舌腺中[6]。随着相关研究的不断深入，越来越多证据表明，LCN蛋白不仅存在于泪腺及舌腺中，在鼻黏膜、前列腺及气管中也有表达，甚至在人类恶性肿瘤中也有一定作用[5,13,14]。LCN在SS发病机制中的作用目前尚无定论，推测可能是LCN肽与EB病毒早期抗原蛋白D及α-胞衬蛋白肽具有同源性，识别EB病毒早期抗原蛋白D的抗体通过分子模拟机制识别蛋白，产生抗LCN多肽抗体，改变其对上皮细胞的保护功能[13]。

本研究结果表明，抗LCN多肽抗体具有中等敏感度(0.62，95%CI0.37～0.82)和特异度(0.78,95%CI0.67～0.86)。合并的+LR为2.81(95%CI1.97～4.01)，-LR为0.48(95%CI0.27～0.86)，表明当抗LCN多肽抗体检测结果为阳性时，患病的概率为未患病的2.81倍；抗LCN多肽抗体检测结果为阴性时，患病的概率为未患病的0.48倍。本研究中，合并的DOR为5.80(2.57～13.11)，这表明抗LCN多肽抗体检测可能对SS的诊断有用。此外，AUC为0.79，表明抗LCN多肽抗体对SS的诊断具有一定准确性。

本Meta分析通过检索多个数据库尽可能全面收集有关研究文献，但仍有一定局限性：(1)本研究仅纳入抗LCN多肽抗体对SS诊断相关研究，且纳入文献数量较少，仅检索了中文、英文两种语言，只有中国、意大利两个国家的文献，可能存在不同程度的偏倚。(2)纳入文献主要提及SS患者例数及敏感度和特异度，未直接提及TP、FP、FN、TN，故存在结果报告偏倚。(3)由于纳入文献数量较少，未能对人种、性别、疾病持续时间或疾病病情等进行亚组分层分析。因此，本研究结论需谨慎对待，有待多中心、大样本、跨区域和高质量的研究支持和验证。

综上所述，抗LCN多肽抗体作为SS诊断的生物标志物具有一定准确性。抗LCN多肽抗体具有中等敏感度和特异度，可作为现有诊断方法的有效补充。由于其在SS发病机制中的作用尚未被完全挖掘，因此，需要将LCN蛋白在SS中的作用进行深入研究。