中草药组方“消腐汤”防治中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病试验研究

邓位喜 刘廷江 马啸天 吴廷昌 韩建伦

摘要：欧洲幼虫腐臭病在各养蜂国均常有发生。开展了中草药复方制剂“消腐汤”及抗生素对中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病防治效果试验。结果表明，中药黄连和黄柏抑菌效果最为明显，蜂房球菌对土霉素、氨苄西林和氟本尼考等抗生素均为敏感，“消腐汤”治疗欧洲幼虫腐臭病治愈率为58.82%，有效率为76.47%，死淘率为23.53%，效果显著优于氨苄西林、土霉素和氟本尼考（P<0.01）。

关键词：欧洲幼虫腐臭病，中华蜜蜂，中草药，消腐汤，防治效果

中图分类号：S895        文献标识码：A        文章编号：1007-273X（2021）05-0005-03

欧洲幼虫腐臭病（European foulbrood，EFB）简称欧幼病，目前在各养蜂国均有发生。典型临床症状表现为“花子脾”，死亡幼虫体表失去正常光泽，虫尸肿胀、瘫软、苍白，继而转变为黄色，呈溶解性腐败，有酸臭味，体液黏性不大有短拉丝，干枯后呈深褐色。发病呈现明显的季节性，两个发病高峰分别在蜂群春秋两季的繁殖高峰期。近年来遵义地区均有养殖场报告发生该病，多数蜂场采用抗生素进行预防和治疗，一方面产生耐药性后效果不佳，另一方面给蜂产品质量安全带来了隐患。笔者探索了使用中草药预防和治疗欧洲幼虫腐臭病，以减少抗生素在养蜂生产中的使用，提升蜂产品质量和安全水平。

1 材料与方法

1.1 试验地点

遵义地区选择发病的6个蜂场进行试验。

1.2 临床试验蜂群分组

按照中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病典型临床特征进行初步诊断，结合实验室检测确诊，确定参与临床治疗的试验蜂群，其余受威胁蜂群作为中草药组方预防试验蜂群。对发病蜂场随机分组，分别为中草药试验组和抗生素治疗对照组 （抗生素分别为氨苄西林、土霉素和氟本尼考）（表1）。參与预防试验的蜂群随机分为中草药试验组和抗生素预防对照组（抗生素分别为氨苄西林、土霉素和氟本尼考）（表2）。

1.3 中药组方“消腐汤”

通过征集本地蜂农防治中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病临床有效中草药组方，优化组成“消腐汤”参与试验。“消腐汤”组成：黄莲18 g、黄芩15 g、黄柏15 g、穿心莲15 g、鸭跖草12 g、如意花根15 g等，煎煮浓缩至500 mL（6脾/箱2 d的剂量），加白糖溶解搅拌均匀，至含糖量60%～65%，静置即得“消腐汤”药液，根据蜂群强弱确定药液用量。连续使用1周为1个疗程。

1.4 治疗方案

1.4.1 中草药试验组 按照“1.3”中“消腐汤”使用方法进行治疗，执行“消毒隔离、弃脾断子、关王造脾”常规处置措施。

1.4.2 抗生素治疗对照组 结合查阅资料和药敏试验结果，选择氨苄西林、土霉素、氟本尼考进行10倍稀释，按蜂群群势强弱进行喷脾治疗，执行“消毒隔离、弃脾断子、关王造脾”常规处置措施。

1.4.3 疗效评价标准 痊愈：治疗3个疗程（21 d）后，患病蜂群精神抖擞，幼虫发育完全恢复正常，蜂群群势维持在75%以上。有效：治疗3个疗程（21 d）后，幼虫停止或逐渐减少死亡，病态基本消除，发育趋向恢复正常，蜂群群势维持在50%以上。无效：治疗无效果，蜂群群势减少到50%以下（不含50%），蜂群死亡或淘汰。

1.5 预防处理方案

1.5.1 中草药试验组 中草药组方预防用药2个疗程，并执行“消毒、隔离、强群”的常规处置措施。

1.5.2 抗生素预防对照组 选择氨苄西林、土霉素、氟本尼考进行10倍稀释，按蜂群群势强弱进行喷脾治疗，并作“消毒、隔离、强群”的常规处置进行处理。

1.5.3 效果观察 按照中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病临床诊断标准进行蜂群观察，确定是否发病。

1.6 数据分析

采用SPSS软件对数据进行单因素方差分析，选择Duncan′S方法进行组间多重比较，结果以平均值±标准误表示。

2 结果与分析

2.1 治疗试验效果

由表3可见，通过中草药组方“消腐汤”治疗3个疗程（21 d）后，痊愈20箱、有效26箱、无效8箱，治愈率58.82%、有效率76.47%、死淘率23.53%;氨苄西林对照组痊愈11箱、有效20箱、无效14箱，治愈率32.35%、有效率58.82%、死淘率41.18%;土霉素对照组痊愈13箱、有效19箱、无效15箱，治愈率38.24%、有效率55.88%、死淘率44.12%;氟本尼考对照组痊愈16箱、有效25箱、无效9箱，治愈率47.06%、有效率73.53%、死淘率26.47%。将中草药试验组和抗生素治疗对照组的效果进行比较，中草药试验组治疗效果极显著优于3个抗生素治疗对照组（P<0.01）。

2.2 预防试验效果

由表4可见，采用中草药组方“消腐汤”预防性用药2个疗程，第21天观察，中草药试验组发病12箱，发病率11.65%;氨苄西林对照组发病31箱，发病率30.10%;土霉素对照组发病38箱，发病率36.89%;氟本尼考对照组发病12箱，发病率11.65%。将中草药试验组和抗生素对照组的预防效果进行比较，发现中草药试验组和氟本尼考对照组预防效果相当，两者均极显著优于氨苄西林和土霉素对照组（P<0.01）。

3 小结与讨论

（1）欧洲幼虫腐臭病（EFB）是以蜂房蜜蜂球菌（Melissococcus plutonius）为主要致病菌的一种危害严重的传染病[1]。Belloy 等[2]研究表明，欧洲幼虫腐臭病主要发生于幼蜂阶段，成年工蜂可携带蜂房蜜蜂球菌，导致欧洲幼虫腐臭病在蜂群内甚至是不同蜂群和蜂场间传播。欧洲幼虫腐臭病长期以来给遵义地区蜂农造成巨大经济损失，但目前没有较为快速有效的鉴定手段和预警机制。

（2）防治欧洲幼虫腐臭病常用药物有青霉素、土霉素等，但长期使用抗生素会造成耐药性，治疗效果降低，同时也给蜂产品质量安全造成较大影响。通过征集当地蜂农防治中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病临床有效中草药组方，优化组成中草药复方制剂“消腐汤”，由黄连、黄芩、黄柏、穿心莲、鸭跖草、如意花根等中草药组成。其中黄连味苦性寒，具有清热解毒，泻火燥湿的功效，含有黄酮、生物碱、萜类、挥发油、有机酸、香豆素等多种化学成分，可抗菌、抗病毒、抗肿瘤、降血糖、抗氧化等[3-5];黄芩含有黄酮类、木脂素和挥发油等多种成分，具有抗炎、抗肿瘤等多种药理活性[6];黄柏主要成份有黄柏苷、异黄柏苷、槲皮素、黄柏酮等，具有燥湿清热、解毒泻火、去腐消肿的功效[7]。通过临床试验取得较好防治效果，为欧洲幼虫腐臭病防治建立了绿色防治方案。

（3）蜜蜂传染病暴发不仅与食物、水、空间不足等群体压力有关，还受遗传因素、气候及地理环境等因素影响[8]。因此，针对遵义地区中华蜜蜂欧洲幼虫腐臭病发病特点及流行现状，应采取“以防为主，防治結合”的防控方针，严格执行“消毒、隔离、强群”处置措施[1，8，9]，为中华蜜蜂产业健康发展、蜂产品质量安全提供技术保障。

参考文献：

[1] 王丽君， 王 琛， 崔学沛，等.欧洲幼虫腐臭病病原检测及防控建议[J].蜜蜂杂志， 2017， 37（8）：8-12.

[2] BELLOY L， IMDORF A， FRIES I， et al. Spatial distribution of Melissococcus plutonius in adult honey bees collected from apiaries and colonies with and without symptoms of European foulbrood[J]. Apidologie，2007， 38（2）：136-140.

[3] 曹 富， 查孝柱， 徐 宁， 等.黄连及其药对的研究进展[J].名医，2020 （9）：330-331.

[4] 高耀星， 于建设， 都日娜， 等. 黄连水提物对人皮肤肿瘤 A431细胞凋亡、增殖的影响[J].中国医药导报，2019， 16（16）： 21-24.

[5] 徐 萍， 顾治平.黄连的药理作用研究进展[J]. 临床医药文献电子杂志，2017， 4（27）：5333，5336.

[6] 李化玲， 王 鑫， 刘有平， 等. 葛根-黄连药对提取物对α-葡萄糖苷酶活性及大鼠餐后高血糖的抑制作用[J]. 沈阳药科大学学报，2015， 32（12）：975-979.

[7] 姚 雪， 吴国真， 赵宏伟， 等.黄芩中化学成分及药理作用研究进展[J]. 辽宁中医杂志，2020， 47 （7）：215-220.

[8] 陈阳峰， 钟晓红.黄柏的药理作用及其活性成分提取[J].作物研究，2015， 29（5）：564-568.

[9] 刘学录， 童金凤， 马振刚. 蜜蜂主要病害及其病原PCR检测研究进展[J]. 南方农业学报，2016， 47（1）：147-152.