原发性胃癌患者血清中胃蛋白酶原、胃泌素含量检测及其与肿瘤恶性程度的相关性分析

郭俊贤 李丽萍

（河南省濮阳市安阳地区医院消化内科 安阳455000）

原发性胃癌是临床最多见的消化系统恶性肿瘤性疾病之一，目前疾病早期确诊率仍不高[1]。 胃蛋白酶原（PG）、胃泌素（G）均是正常胃黏膜细胞分泌的消化酶，可反映不同胃黏膜组织的形态与功能，检测其含量对胃部疾病的早期筛查、诊断具有一定临床意义，且检测操作可重复进行、无侵入性损害[2]。 原发性胃癌患者是否存在PG、G 等消化酶含量的特殊改变，换言之，检测PG、G 含量能否作为原发性胃癌诊断及病情判断的辅助指标，仍存在争议。 本研究对比胃部良恶性疾病患者血清中PG、G 含量的差异，并进一步探讨其含量与胃癌细胞恶性生物学行为的内在联系， 以期明确PG、G 在原发性胃癌诊断及治疗指导中的价值。 现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2017 年 8 月 ~2019 年 10 月在本院接受手术治疗的原发性胃癌患者98 例作为胃癌组，均经病理确诊，入院前未经其他保守治疗、术前无新辅助化疗。 同期在本院进行胃镜检查并切除息肉的胃息肉患者77 例作为胃息肉组。 胃癌组男 51 例，女 47 例；年龄 41~78 岁，平均（69.26±8.53）岁。 胃息肉组男 40 例，女 37 例；年龄 38~79岁，平均（68.71±9.62）岁。 两组胃部疾病患者的性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。医院医学伦理委员会通过研究计划书。

1.2 血清PG、G 含量检测 入组即刻（未经任何治疗），留取两组患者外周血标本3 ml 并分离血清，采用全自动酶标仪检测其中胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）、胃泌素 -17（G-17）的含量，计算PGⅠ/PGⅡ比值。

1.3 胃部病灶组织中恶性分子表达量检测 留取原发性胃癌患者术中胃癌病灶组织标本、 胃息肉患者的息肉组织标本，采用荧光定量PCR 法检测其中胃癌相关增殖、侵袭基因表达量，按照试剂盒说明书进行操作并计算表达量。 具体胃癌相关增殖基因包括 Gli1、Septin2、Klotho， 胃癌相关侵袭基因包括FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes、GKN2。

1.4 统计学方法 胃蛋白酶原及胃泌素含量，增殖、侵袭基因表达量均属于计量资料，以（）表示，由具备专业统计学资质的人员（同一人）将其录入软件SPSS24.0 中，经t检验计算得到统计值P，经Pearson 检验进行相关性分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清PG、G 含量比较 胃癌组患者血清PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值低于胃息肉组，G-17 含量高于胃息肉组， 差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 1。

表1 两组血清 PG、G 含量比较（）

表1 两组血清 PG、G 含量比较（）

组别 n PGⅠ（μg/L） PGⅡ（μg/L） PGⅠ/PGⅡ G-17（pmol/L）胃息肉组胃癌组77 98 tP 109.46±13.26 63.21±10.18 26.105 0.000 9.32±1.27 8.07±0.95 7.448 0.000 11.46±1.94 7.29±0.81 19.260 0.000 11.37±1.98 17.60±2.97-15.843 0.000

2.2 两组胃癌相关增殖基因表达量比较 胃癌组病灶组织中增殖基因Gli1、Septin2 mRNA 的表达量高于胃息肉组，Klotho mRNA 的表达量低于胃息肉组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 2。

表2 两组胃癌相关增殖基因表达量比较（）

表2 两组胃癌相关增殖基因表达量比较（）

组别 n Gli1 Septin2 Klotho胃息肉组胃癌组tP 77 98 100 138.92±15.71-18.928 0.000 100 151.07±18.95-21.413 0.000 100 76.21±0.85 23.462 0.000

2.3 两组胃癌相关侵袭基因表达量比较 胃癌组病灶中侵袭基因 FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA 的表达量高于胃息肉组，GKN2 mRNA 的表达量低于胃息肉组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 两组胃癌相关侵袭基因表达量比较（）

表3 两组胃癌相关侵袭基因表达量比较（）

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2.4 相关性分析 Pearson 检验发现， 原发性胃癌患者血清中PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值与Gli1、Septin2、FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA的表达量呈负相关（r=-0.314、-0.342、-0.294、-0.307、-0.318、-0.344，P＜0.05），与 Klotho、GKN2 mRNA 的表达量呈正相关（r=0.351、0.389，P＜0.05）。 原发性胃癌患者血清中 G-17 的含量与 Gli1、Septin2、FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA 的表达量呈正相关（r=0.375、0.309、0.412、0.423、0.297、0.388，P＜0.05），与 Klotho、GKN2 mRNA 的表达量呈负相关（r=-0.374、-0.291，P＜0.05）。

3 讨论

PG 是胃蛋白酶的前体， 包括PGⅠ、PGⅡ两个亚型，PGⅠ/PGⅡ比值水平反映胃黏膜萎缩程度，随黏膜萎缩加剧，PGⅠ/PGⅡ比值进行性下降[3]。 G 是由胃幽门部的G 细胞分泌， 哺乳类动物的G 均为17 个氨基酸的多肽、即G17[4]。本研究中胃癌组患者PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值均较良性病变患者大幅下降，血清G-17 含量高于胃息肉组患者。目前关于PGⅠ/PGⅡ及G17 含量能否反映胃癌细胞恶性生物学行为这一命题尚不清楚。

Gli1 是Hedgehog 信号通路的核心分子， 该通路激活已被证实与多种恶性肿瘤细胞的增殖侵袭相关[5]。Septin2 是一种细胞骨架成分，参与细胞内物质运输、细胞周期及凋亡等生理过程调控，参与肿瘤恶性增殖过程[6]。 Klotho 是与抗衰老相关的基因，在多种恶性肿瘤组织中呈低表达，被认为是一种抑癌基因。 本研究胃癌组病灶中Gli1、Septin2 mRNA 的表达量较高，Klotho mRNA 的表达量较低， 与各个基因的病理学作用一致。 相关性分析进一步证实，原发性胃癌患者血清PGⅠ、PGⅡ含量及PGⅠ/PGⅡ比值与Gli1、Septin2 mRNA 的表达量呈负相关，与Klotho mRNA 的表达量呈正相关； 而G-17 含量与Gli1、Septin2 mRNA 的表达量呈正相关， 与 Klotho mRNA 的表达量呈负相关，说明PG、G 的含量异常可客观反映胃癌细胞的增殖活力。

肿瘤细胞的侵袭也由多种分子介导。 FHL2、FMNL2 通过促进上皮-间质转化使细胞获得侵袭能力；IGF1R 通过PI3K/AKT 信号通路促进癌细胞增殖、侵袭、迁移；Exosomes 通过刺激血管新生、帮助细胞免疫逃逸等途径加速癌细胞的侵袭转移；GKN2 是GKNs 的亚型， 有助于维持胃上皮内环境并抑制肿瘤发生， 其异常低表达是胃癌发生的重要原因。 本研究胃癌组病灶中 FHL2、IGF1R、FMNL2、Exosomes mRNA 的表达量较高且与PGⅠ/PGⅡ比值呈负相关、与G-17 呈正相关，GKN2 mRNA 的表达量较低且与PGⅠ/PGⅡ比值呈正相关、 与G-17呈负相关， 说明原发性胃癌患者血清中PG、G 含量可客观反映癌细胞的侵袭活力。

综上所述， 原发性胃癌患者血清中PG、G 含量异于良性病变者， 且含量与癌细胞的增殖及侵袭活力直接相关。 早期检测血清PG、G 含量可作为原发性胃癌筛查、辅助诊断、病情判断等重要手段。