类风湿因子干扰导致化学发光法检测cTnI假阳性结果处理与分析

陈超超，毕晓洁，沈 波

（温州医科大学附属台州医院检验科，浙江 台州 317000）

心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）是心肌损伤的确诊标志物，其特异性较高[1]，可敏感地反映小灶性、可逆性心肌损伤的存在，还可用于溶栓后再灌注的判断[2]。目前，cTnI多采用化学发光法检测，自身免疫性抗体、人抗动物抗体、异嗜性抗体等可能会对其结果造成一定的干扰。本研究对cTnI测定中的假阳性结果进行分析。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取温州医科大学附属台州医院就诊患者10例，其中男4例、女6例，年龄（60.5±5.5）岁。纳入标准：（1）有类风湿性关节炎病史；（2）检验结果多次提示cTnI显著增高，但患者无明显胸闷、胸痛表现；（3）心电图检查未发现明显异常；（4）头颅电子计算机断层扫描（computed tomography，CT）提示未见明显异常，排除心肌相关疾病。

1.2 样本

采集所有对象静脉血6 mL，其中3 mL采用乙二胺四乙酸二钾抗凝，剩余3 mL置于促凝管中，分别以800×g离心10 min，分离血清或血浆。以各仪器配套的阳性质控品作为阳性对照样本。本实验室用于cTnI测定的常规检测系统为UniCel DxI 800全自动化学发光免疫分析仪（美国贝克曼库尔特公司）及配套cTnI试剂（简称DxI 800系统），检测原理为双位点酶联免疫法。cTnI参考区间为<0.10 ng/mL。

1.3 处理方法

1.3.1 直接测定患者及阳性对照样本 分别采用cobas e411全自动电化学发光分析仪（瑞士罗氏公司）及配套cTnI试剂（简称e411系统）、ARCHITECT i2000SR全自动化学发光免疫分析仪（美国雅培公司）及配套cTnI试剂（简称i2000SR系统）和CL-6000i全自动化学发光免疫分析仪（深圳迈瑞公司）及配套cTnI试剂（简称CL-6000i系统）直接测定10例患者样本及阳性对照样本。

1.3.2 稀释法处理 采用Access Sample Diluent A样本稀释液（美国贝克曼库尔特公司）对患者样本和阳性对照样本分别进行2、4、8倍稀释，采用DxI 800系统检测cTnI水平。

1.3.3 异嗜性阻断试剂（heterophilic blocking reagent，HBR）预处理 采用HBR预处理患者样本及阳性对照样本，采用DxI 800系统检测cTnI水平。

1.3.4 采用2-巯基乙醇（2-mercaptoethanol，2-Me）预处理 采用2-Me预处理患者样本及阳性对照样本，采用DxI 800系统检测cTnI水平。

2 结果

2.1 10例患者一般临床资料

10例患者血清类风湿因子（rheumatoid factor，RF）均>1 000 kU/L，心肌相关指标（B型钠尿肽、天门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶和肌酸激酶）均处于参考区间内，仅cTnI水平异常升高。见表1。

表1 10例患者一般临床资料

2.2 不同检测系统直接检测患者样本及阳性对照样本的结果

e411系统、i2000SR系统和CL-6000i系统检测10例患者样本的cTnI结果均正常，DxI 800系统检测cTnI的结果均异常升高。见表2。

表2 不同检测系统直接检测患者样本及阳性对照样本的cTnI结果 ng/mL

2.3 患者样本和阳性对照样本经稀释、HBR及2-Me处理后的cTnI检测结果

按2、4、8倍稀释后，患者样本的cTnI检测结果无线性变化规律，而阳性对照样本的cTnI检测结果随稀释倍数的增大而成倍降低。经HBR处理后，患者样本与阳性对照样本检测结果均未见明显下降。经2-Me处理后，10例患者样本检测结果均降至正常，阳性对照样本未见明显变化。见表3。

表3 患者样本和阳性对照样本经稀释、HBR及2-Me处理后的cTnI检测结果 ng/mL

3 讨论

多种病理学因素可能在无明显缺血性心脏疾病条件下引起肌钙蛋白升高，如充血性心力衰竭、急性和慢性创伤、电击复律等[3]，因此在临床难以判断时需要进行连续监测。

RF是以变性IgG为靶抗原的自身抗体。人血清中的IgM、IgG型RF可以与化学发光系统中的捕捉抗体及酶标二抗的Fc段直接结合，从而导致检测结果出现假阳性[4]。加入2-Me可直接破坏IgM、IgG等分子中的二硫键，使RF灭活。RF属于内源性干扰因素之一，会对β-人绒毛膜促性腺激素、促甲状腺素、cTnI和B型钠尿肽等的检测造成影响[5-7]。

本研究10例患者入院后多次采用DxI 800系统检测cTnI，结果均升高。与临床沟通后，考虑到这些患者无胸痛、胸闷等症状，且心电图不支持心肌损伤，因此怀疑存在某种干扰，造成结果假性增高。本研究通过稀释法处理、更换检测系统、添加阻断剂以及物理化学技术对样本进行预处理。患者样本经2-Me预处理后，检测结果变为阴性，可证实RF为干扰cTnI检测的因素。本研究使用的DxI 800系统、e411系统、CL-6000i系统均采用双抗体夹心法，但是RF仅对DxI 800系统产生干扰，可能与双抗体标记的位点不同有关。

总之，在实际工作中，如遇到RF水平较高的患者，在使用DxI 800系统检测相关项目时应引起重视，若检测结果异常，应结合临床，多方面考虑，以减少不必要的检查及用药。