臭氧对银耳标准菇房的消毒效果及其安全性研究
2021-07-29郑峻
郑峻
(福建省食用菌技术推广总站 福州350003)
银耳(Tremella fuciformisBerk.)又名白木耳,具有滋阴、润肺、养胃生津的功效,被人们誉为“菌中之冠”。银耳在我国已有悠久的栽培历史,宁德市古田县是银耳的主产区,全国90%左右的银耳来源于宁德市古田县袋料栽培。2012年古田县银耳栽培规模达3.68亿袋,银耳产量达28万t,成为当地农户的主要经济来源之一[2-3]。农户栽培由于投入小、条件简陋,通常是接种间和出菇房经过简单的烟雾消毒后就进行接种使用,造成银耳在生产过程中易遭受病虫害的危害[4],一方面破坏培养基造成坏包,另一方面侵染子实体降低产量和品质,给生产带来极大的损失,已成为困扰广大菇农的一个重要问题[5]。目前银耳栽培过程受到的危害有病害和虫害2种,病害包括木霉、链孢霉、曲霉、青霉等霉菌,虫害主要为害螨、蚊蝇和跳虫,这些病虫害经常同时发生[6-7]。
针对银耳生产中病虫害的危害,消毒杀菌是关键环节。传统方法是采用化学消毒剂进行空间消毒,最常用的是采用甲醛-高锰酸钾、二氯异氰尿酸钠等熏蒸杀菌,或用敌敌畏和鱼藤精等农药喷洒消毒[8-10],这种化学消毒方法会强烈刺激使用者的眼睛和呼吸道,严重影响生产者的身体健康,同时会产生部分化学药物的残留,对银耳造成二次污染,极大的影响了采摘银耳的品质[11-12]。近年来食用菌产品的质量安全问题越来越受到重视,对农药的残留把控也越来越严格,因此寻找新的空间消毒灭菌方法是银耳栽培的关键环节。臭氧是一种高效、广谱的杀菌剂,利用其强氧化性,可以在较短的时间内破坏各种细菌、霉菌、原虫孢体卵囊和其他微生物的生物结构,臭氧的灭杀率与过氧乙酸相当,强于甲醛-高锰酸钾、二氯异氰尿酸钠等消毒剂,并且其氧化消毒后的产物是氧气[13-14],不会造成二次污染,且在有效杀菌浓度范围内几乎不会对彩钢板造成腐蚀。本试验对臭氧在银耳标准菇房中的杀菌消毒效果和安全性进行了研究,以期对银耳栽培农户的生产具有指导意义。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验设备 超净工作台、臭氧机(徐州锦康臭氧设备有限公司生产的JK-Y50,臭氧产量为50 g/h)。
1.1.2 试验药品与培养基配方 LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取粉5 g,NaCl 5 g,琼脂15 g,水1000 mL。121℃灭菌20 min。
气雾消毒剂:保菇王,主要成分为二氯异氰尿酸钠,有效成分为69%。
1.1.3 试验菇房概况 试验菇房是银耳标准菇房,长12 m、宽4.5 m、高4.5 m。
1.1.4 试验年份 试验于2020年在古田县渭洋村梦幻食用菌专业合作社进行。
1.2 试验方法
1.2.1 臭氧浓度试验 ①沉降菌试验。参考《GB/T 16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》,在菇房内地面上按附图布置采样点,将已制备好的LB平板按采样点布置逐个放置,然后从里到外逐个打开培养皿盖,让固体培养基表面暴露在空气中,静置60 min后盖上平板封上封口膜,将培养皿放置于30℃恒温培养箱中培养2 d后记录每个平板上的菌落数量,计算平均值。②浓度试验。选择3个洁净大小一致的菇房,按照“1.2.1①”的方法进行沉降菌试验,测量消毒前的菌落数,分别采用1台臭氧机、2台臭氧机和3台臭氧机消毒1.0 h,静置2.0 h后,按照“1.2.1①”的方法进行沉降菌试验,测量消毒后的菌落数,对比消毒前后菌落数变化。
附图 采样点分布
1.2.2 臭氧消毒时间试验 随机选择4个菇房分别用2台臭氧机进行消毒,消毒时间设置为0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h,按“1.2.1①”中方法进行消毒前后沉降菌试验,测试消毒效果。
1.2.3 生产试验 随机选择3间清洗晾干后的菇房,每间菇房都按“1.2.1①”中的方法测试空间沉降菌,然后用2台臭氧机消毒1.0 h,再测试空间沉降菌,消毒后将刚灭完的银耳料棒放进菇房,待菌棒冷却后再进行臭氧消毒接种,待翻筒上架时统计污染率。以传统气雾消毒接种方法作对照,气雾消毒剂根据传统方法使用,生产中每间菇房保菇王用量为1000~1200 g(400 g的3包或500 g的2包)。
1.2.4 安全性试验 按照“1.2.3”的方法进行消毒后定期观察菌丝生长情况,测量菌丝生长速度,记录出菇情况和产量,采菇后检测六六六、滴滴涕、氯氰菊酯、溴氰菊酯4种农药。
2 结果和分析
2.1 臭氧浓度试验结果
浓度试验结果表明(表1),随着臭氧浓度的升高菌落减少率升高,浓度达到100 g后便不显著,菌落减少率达到85.6%。
表1 不同臭氧浓度下的消毒效果
2.2 作用时间试验结果
作用时间试验结果表明(表2),随着臭氧机工作时间的增加菌落减少率随之增加,但作用时间在1.0 h、1.5 h和2.0 h情况下没有显著差异,菌落减少率在86.6%左右。
表2 不同工作时间下的消毒效果
2.3 生产试验结果
生产试验结果表明(表3),按试验方法进行臭氧消毒的效果略优于气雾消毒剂,沉降菌测试菌落减少率达88.9%,高于气雾消毒剂的72.5%,菌包污染率为2.2%,低于气雾消毒剂的3.0%。
表3 不同消毒剂生产试验结果
2.4 安全性试验结果
安全性试验结果表明(表4),臭氧消毒和气雾消毒剂在菌丝生长、出菇情况和产量方面均没有显著差异,六六六、滴滴涕、氯氰菊酯、溴氰菊酯这4种农药均未检测出,且使用臭氧消毒后空气中没有刺鼻气味。
表4 安全性试验结果
3 结论与讨论
食用菌生产过程中消毒杀菌是关键环节,传统方法是采用气雾消毒剂进行空间消毒,但是气雾消毒剂有刺鼻气味,对接种人员有一定伤害,同时气雾消毒产生的盐酸、次氯酸等对标准菇房的彩钢板墙体产生腐蚀。臭氧是一种高效、广谱、清洁的杀菌剂,其氧化消毒后的产物是氧气,不会造成二次污染[15]。
本研究表明,在长12 m、宽4.5 m、高4.5 m的银耳标准菇房内采用2台50 g/h的臭氧机消毒1.0 h,能够达到和气雾消毒剂相同的效果,且消毒完成后臭氧降解后空气清新,无刺鼻气味,并且对菌丝生长和出菇无影响,无农药残留,是一种比较清洁的消毒剂。