新疆奶茶对小鼠生理生化指标的影响

◎ 阮巧莉，韩俊成，代 濛，李亚丽，吾买尔江·牙合甫，弓 超，徐 晶，周亚斐

（1.新疆农业大学 动物医学学院，新疆 乌鲁木齐 830052；2.乌鲁木齐迪安元鼎医学检验所有限公司，新疆 乌鲁木齐 830010）

随着饮食健康问题受到关注，部分消费者将市售奶茶和新疆奶茶混为一谈，新疆奶茶大多为咸口，主要成分是牛奶，并配以砖茶、食盐、水等辅料烧制而成，两种奶茶对健康的影响也受到争议。随着经济发展和城镇化推进，牧民从牧区走向城市，原有生活节奏发生改变，现在城市家庭制作奶茶普遍采用红茶，红茶茶性温和，滋味醇厚，具有极好兼容性，制成的奶茶既保留牛奶所特有高营养素和各种微量元素，又在高温烧制过程中各种微量元素与高分子量蛋白质分解，成为更益于被生物体吸收的游离金属离子[3]。高食盐的饮食摄入，是我国高血压高发病率的重要原因，而新疆高血压发病率高于内地，哈萨克族高血压患病率显著偏高，而哈萨克族人，饮水主要为加盐的奶茶[4]，由此，对于新疆奶茶的质疑也更多，因此，对含盐新疆奶茶对人体，特别是对少数民族同胞身体健康影响的研究具有重要意义。

本文通过不同含盐量奶茶的小鼠生理生化指标影响的研究，来分析奶茶含盐量对健康的影响，为新疆少数民族生活方式和饮食习惯提供科学依据，指导人们养成健康的饮茶习惯，减少高血压及相关疾病的发生。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

鲜牛奶，新疆西域春乳业有限责任公司；叶尔羌红茶，新疆叶尔羌茶业有限公司；食盐，新疆盐湖制盐有限责任公司，批号：20170722232。

健康昆明小鼠30只，雌雄各半，4周龄体重（20±2）g，附带小鼠全价基础颗粒饲料购于新疆医科大学实验动物中心，实验动物在温度（20±2）℃的条件下饲养，相对湿度为65%RH～80%RH。

1.2 仪器与设备

BC-2800 Vet全自动血液细胞分析仪，深圳迈瑞有限公司；GLAMOUR 1800型生化分析仪测定；TD-4M离心机，山东博科科学仪器有限公司；FC204型电子分析天平，上海第二天平仪器厂；500 mL烧杯，四川蜀玻集团。

1.3 实验方法

1.3.1 奶茶制备

精确称量5 g红茶（叶尔羌红茶），浸泡在210 mL开水中1 min，微火熬制5 min，熬煮完毕后，用100目纱布过滤，去掉茶叶，把茶水浓缩至150 mL，取适量全脂鲜牛奶煮沸，精确量取50 mL，倒在茶水里搅拌加热制得奶茶200 mL，即为无盐奶茶，量取60 mL无盐奶茶，溶解5.4 g食盐制成高盐量奶茶（90 mg·mL-1），用无盐奶茶进行稀释，分别制备中盐量奶茶（45 mg·mL-1）、低盐量奶茶（20 mg·mL-1）放至室温20 ℃备用。

1.3.2 动物分组及灌胃

通过对生产单位产品能耗较高原因的分析，其中蒸汽能耗占白酒生产过程综合能耗的80%以上。许多厂家没有节能工艺与设备，对酿酒生产过程中二次蒸汽利用研究不够深入，不能多次有效地合理利用余热，造成热能利用率不高，酿酒生产汽耗较高。目前国内地方及行业标准中已逐步列入白酒制造单位产品综合能耗的限额指标，针对企业对于白酒生产过程节能降耗的需求，通过已建成的一套酿酒生产节能系统进行实验平台测试，对相关能源消耗数据分析，为企业在白酒生产过程中挖掘回收水、汽资源提供有效的技术途径。

昆明小鼠30只，雌雄各半，体重为（20±2）g，经过7 d适应喂养，根据体重随机分成5组，分别为空白组（N）、无盐奶茶组（C）、低盐量奶茶组（L）、中盐量奶茶组（M）和高盐量奶茶组（H），每组6只小鼠，分笼饲养，每笼3只小鼠，每组小鼠灌胃量为0.20 mL/10 g，1次/d，自由饮水与进食，饲喂相同全价基础饲料。小鼠饲养在方形透明鼠笼中，在实验期间，每天注意观察小鼠的生长活动和健康状况，在一定的时间段补充相应的饲料，各组实验动物需每周测量一次体重，以便于调整灌胃的剂量，首次处理前禁食8 h，末次处理时，小鼠禁食不禁水。

1.3.3 小鼠血液常规测定方法

经过连续30 d灌胃后，各组小鼠在采血前12 h禁食不禁水，采用眼眶取血法，用肝素钠抗凝管收集血液，摇匀，用全血模式测定小鼠血液白细胞总数（WBC）、淋巴细胞（LYM）、淋巴细胞比率、中间细胞（MID）、中间细胞比率、粒细胞（GRAN）、粒细胞比率、红细胞总数（RBC）、血红蛋白浓度（HGB）、红细胞压积（HCT）、红细胞平均体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度标准差（RDW-CD）、红细胞分布宽度变异系数（RDW-CV）、血小板总数（PLT）、血小板平均体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、血小板压积（PCT）和血小板大细胞比率[5]。

1.3.4 小鼠血液生化指标测定方法

经过连续30 d灌胃后，用促凝管眼眶采血，离心（3 500 r·min-1，10 min），移液枪移取上层血清到生化分析测定管中，测定20项血液生化指标：血糖（GLU）、血尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、血尿素氮/肌酐比（BUN/CREA）、磷离子（PHOS）、钙离子（CA）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、白蛋白/球蛋白比（ALB/GLOB）、丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALKP）、谷氨酰转移酶（GGT）、总胆红素（TBIL）、胰淀粉酶（AMYL）、脂肪酶（LIPA）、总胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度胆固醇（HDL-C）和低密度胆固醇（LDL-C）[5]。

1.3.5 小鼠体重和脏器重量的测定

实验前禁食12 h，称取小鼠体重，眼眶采血后脱颈椎处死，立即剖取心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏，滤纸吸干表面液体，剔除脏器表面脂肪和筋膜后称重。

1.3.6 数据分析

实验数据结果采用均数±标准差（x±s）表示，用SPSS 17.0对各组计量资料进行单因素方差分析（ANOVA），组间比较采用t检验，p＜0.05具有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 血液生理指标结果

连续30 d灌胃后，对小鼠采血，采用细胞分析仪对红细胞总数、白细胞总数、淋巴细胞总数等20项血液生理指标进行测定，以研究奶茶对小鼠血液生理指标的影响，对试验结果分析。由表2可知，在GRAN和粒细胞比率两项指标上、无盐奶茶组、低盐奶茶组、中盐奶茶组、高盐奶茶组均显著高于空白组，在RBC、HGB、HCT 3项指标上，高盐奶茶组显著高于其他4组，另外，其余15项血液生理指标均在正常范围内，各组差异不显著（p＞0.05），即奶茶对小鼠其他血液生理指标无明显影响。所有实验GRAN和粒细胞比率升高如图1B所示，可能是由于实验操作连续灌胃对实验组小鼠造成不同程度损伤所引起的。综上，如图1A所示高盐量奶茶组在RBC、HGB、HCT这3项指标上显著升高，说明高盐度奶茶会造成小鼠生理性脱水，水分丢失过多，进而导致红细胞相关的3项血液生理指标增高。

表2 奶茶对小鼠血液生化指标的影响表

图1 奶茶对小鼠血液RBC、HGB、HC、GRAN和粒细胞比率的影响图

2.2 各项血液生化指标结果

经过30 d灌胃后，对小鼠采血，分离血清，对GLU、BUN、CREA、ALT等20种血液生化指标进行测定，对结果进行分析。由表3可知，肾功能方面，高盐奶茶组BUN与其余4组相比均显著增高；肝功能方面，高盐奶茶组TP与其余4组相比显著增高；高盐奶茶组、中盐奶茶组的ALT和TBIL含量与空白组、无盐奶茶组和低盐奶茶组比较显著增高；血脂方面，高盐奶茶组CHOL含量与对其他4组相比显著增高；高盐奶茶组、中盐奶茶组的TG、LDL-C含量与空白组、无盐奶茶组和低盐奶茶组相比显著增高；高盐奶茶组、中盐奶茶组的HDL-C含量与空白组、无盐奶茶组和低盐奶茶组相比则显著降低；各剂量组的其他生化指标：GLU、CREA、BUN/CREA、PHOS、CA、ALB、GLOB、ALB/GLOB、ALKP、GGT、AMYL和LIPA与 空 白组相比均无显著差异，如图2A-D所示，中盐奶茶组会对表征肝功能的指标ALT、TBIL，表征血脂的指标TG、LDL-C、HDL-C产生显著影响；高盐奶茶组会对表征肾功能的指标BUN，表征肝功能的指标TP、ALT、TBIL，表征血脂的指标CHOL、TG、LDL-C、HDL-C产生显著影响，表明高含盐奶茶会对肝肾产生损伤，同时升高血脂，诱发肥胖和高血压。

图2 奶茶对小鼠血液BUN、TP、ALT、TBIL、CHOL、TG、HDL-C、LDL-C的影响图

2.3 奶茶对小鼠脏器系数的影响

灌服不同盐度奶茶30 d后，分析脏器系数结果如表3所示。结果表明，与其他4组相比，高盐奶茶组肝脏指数显著性降低；高盐奶茶组肾脏指数虽然也降低但与其他组间差异不明显；灌服不同盐度奶茶30 d后，小鼠心脏指数、肾脏指数、肺脏指数、脾脏指数各组之间差异不显著，高盐奶茶组肝脏和肾脏指数与其他组相比下降，表明高盐奶茶会对肝脏肾脏产生损伤。如图3所示，脏器指数变化可在一定程度上反应出小鼠机体状况，高盐奶茶会对小鼠肝脏产生显著性损伤，低盐度或者无盐奶茶不会对小鼠脏器产生影响。

表3 奶茶对小鼠脏器系数的影响表

图3 奶茶对小鼠脏器系数的影响图

3 讨论

关于市售奶茶不健康的讨论已经屡见报端，新疆奶茶是否健康也经常被讨论，新疆奶茶是草原游牧民族终日必备的饮料，不仅有牛奶和茶，盐也必不可少，因此关于新疆奶茶是否符合现代健康标准，应该怎么饮用，需要科学依据，本研究以不同盐浓度奶茶灌服小鼠，观察奶茶对小鼠生理生化指标的影响来评估其对人体的影响。研究发现高含盐奶茶会导致小鼠体内钠离子浓度过高，增加肾血流量和肾小球的滤过率，加重肾脏负担，肾脏血管发生病理性改变，导致肾脏组织损伤，代谢平衡失调，进而导致失水[6]。这与本研究RBC、HGB、HCT升高相同，高盐引起肾皮质组织疏松、间隙较大、肾小球减少，血管球与肾小囊之间的囊腔变大，肾小球粘连、硬化、肾小管扩张，远曲小管和近曲小管的管径变大，肾锥体结构不清，导致肾排钠功能下降，肾小球滤过率降低，肾功能指标BUN和血清钙水平上升，提示肾脏有实质性损伤，间质充血及蛋白管型，炎症细胞浸润等[7]。血清肌酐及血尿素氮是用来检测肾脏损害的主要生物标志物，高盐可通过调节一氧化氮等血管舒张因子，增加肾血浆流量和肾小球滤过率，导致肾单位出现高灌注和高滤过，增加蛋白尿，加重肾脏负担，使肾脏血管发生病理性改变，影响肾脏功能，高盐可引起小鼠肾脏损害[8]，这与本实验所检测的血浆尿素氮和总蛋白升高一致。

高盐会使小鼠肝脏中的超氧化物歧化酶（SOD）活力降低，丙二醛（MDA）含量升高，损伤肝细胞膜结构，导致肝板分布不均，组织疏松，肝细胞肿胀或融合，肝功能障碍[9]。本研究发现，高盐组小鼠肝功能指标TP、ALT、TBIL增高，这与8%氯化钠高盐诱导C57BL/6J小鼠肝功能指标ALT、ALB和TP水平升高一致，肝损伤或炎性反应[7]。此外，研究发现，高盐导致肝脏星状细胞（HSC）活化标志α-平滑肌机动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达增多，肝脏损伤严重程度指标血清透明质酸（HA）水平升高，肝脏损伤程度加重，肝巨噬细胞比例升高，巨噬细胞促纤维化相关因子表达升高，巨噬细胞表达促纤维化因子，另一方面可造成肠道菌群紊乱，引起小肠组织促纤维化因子及单核细胞趋化因子表达增多，最终导致肝脏中巨噬细胞数量及活化增多，促进肝星状细胞活化，最终使肝纤维化加重[10]，引起高盐奶茶组的肝脏脏器系数降低。

长期摄入高盐会诱发高血压，CHOL和TG水平显著升高，高盐奶茶组与其他4组相比CHOL，TG、LDL-C显著增高，HDL-C含量显著降低，说明升高血脂，诱发肥胖和高血压。徐小江等人研究指出茯砖茶能够使TC、TG含量降低，HDL-C的含量升高，可将肝脏组织外的胆固醇转运到肝脏中代谢，茶多酚能够有效地降低小鼠的体重、TC、TG含量以及血清瘦素水平，促进脂肪组织的氧化，加速脂肪组织排泄，从而起到降脂的作用[11-12]，普洱茶可以降低甘油三酯有降血脂的作用[13]，而本研究无盐奶茶组和低盐奶茶组，降血脂作用差异不显著，可能与本研究时间为30 d，且本研究是针对正常健康小鼠而非高血脂小鼠相关。

4 结论

本实验研究结果表明，连续30 d灌胃不同盐度新疆奶茶，对于RBC、HGB、HCT 3项指标，高盐奶茶组显著高于其他组，其余15项指标各组差异不显著，表明高盐奶茶会导致小鼠脱水，而对其他生理指标不会产生显著影响；高盐奶茶组会显著增高表征肾功能相关指标BUN含量，高盐奶茶组和中盐奶茶组会显著增高表肝功能的指标ALT、TBIL，高盐奶茶组显著增高另一项肝功能指标TP，同时高盐奶茶组小鼠肝脏指数呈现显著性降低，表明含有高盐的奶茶会对肝脏产生较为严重损伤，也会对肾脏产生一定损伤；高盐量奶茶组会对表征血脂的指标CHOL、TG、LDL-C、HDL-C产生显著影响，中盐量奶茶组会对表征血脂的指标TG、LDL-C、HDL-C产生显著影响，高含盐奶茶会产生高血脂症，诱发肥胖和高血压。综上，低盐度下奶茶对不会对小鼠产生不良影响，而随着盐度的升高，会对小鼠肝肾尤其是肝脏产生损伤，还会让机体脱水，升高血脂，由于心血管疾病与TC、TG含量的增加成正比，高盐奶茶容易引发心血管疾病。本实验表明，适量饮用奶茶不会对身体产生不良影响，但应控制奶茶中的含盐量，过高含盐奶茶会对肝肾产生损伤，还会升高血脂，容易引发肥胖和心血管疾病，因此在日常生活中制作新疆传统奶茶时尽量少添加食盐，不宜过咸，饮用高盐奶茶会引起高血脂，具体诱发机制需要进一步研究，本研究为新疆少数民族健康饮用奶茶提供了科学依据。