生鲜猪肉中磺胺类药物残留检测技术研究进展

2021-07-20崔贝贝李长滨

现代牧业 2021年2期

杨娜，崔贝贝，李长滨

(河南牧业经济学院食品与生物工程学院，河南郑州 450046)

1 引言

在集约化养殖过程中，养殖户预防和治疗动物疾病时，不遵照兽药正确用法和用量；屠宰动物时未严格执行休药期等，造成磺胺类药物在动物体内的残留。研究表明，食品中磺胺类、四环素类等抗生素都有一定的检出率，其中磺胺类残留高达20%[1]。

磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)具有化学性质稳定、抗菌谱广、价廉等优点，广泛应用于畜禽疾病的预防和治疗[2]。SAs不易代谢，很容易在动物体内蓄积，通过食物链在人体内蓄积，进而对人体健康造成一定的危害[3]。张梦雪等[4]发现，SAs残留对人体有泌尿系统及肝损害、胃肠道及消化系统不良症状、过敏症状、溶血性贫血、再生障碍性贫血等严重反应。人体中的药物残留主要来自于肉、乳等食物。我国猪肉占比市场较大，集约化养殖引起的抗生素残留较严重，生鲜猪肉中时有SAs超标。潘娟等[5]对市场上260批次猪肉样品检测发现，SAs残留阳性样品14批次。SAs在动物肌肉和肝脏中最大残留限量为 100 μg/kg[6]，由于SAs在肉中残留量少且生鲜猪肉结构复杂，严重加大了检测的难度。

猪肉中残留SAs对人类的危害比较大，综述生鲜猪肉中SAs残留检测技术的研究，对找到合适的样品前处理方法和检测技术非常重要，能为有效地监控生鲜猪肉的安全提供理论依据。

2 样品前处理技术分析

2.1 固相萃取技术(SPE)

有研究人员使用SPE对猪肉中的SAs残留检测进行富集处理，具体详见表1。从表1可以看出，研究者主要进行了柱料、洗脱液体积比、检出限、定量限等方面的研究和优化。回收率>70%，部分研究检出10多种药品。

表1 固相萃取技术分析统计

2.2 固相微萃取技术(SPME)

SPME集采样、萃取、富集和进样于一体，有灵敏度高、对环境无二次污染等优点。Lu等[12]采用PDMS/DVB包覆纤维，在最佳条件下提取猪肉样品中的SAs，用静态解吸法在SPME-HPLC解吸室中解吸15min，共检测了五种SAs。

2.3 磁性固相萃取技术(MSPE)

MSPE是21世纪在分离富集领域的革命性技术，具有适用范围广、吸附速度快、分离效率高、操作简单和材料易于回收等优点。 Xia等[13]合成了一种磁性介孔核壳结构的复合材料，并将其作为磁性固相萃取吸附剂，用于肉样中SAs残留检测，回收率为76.1～102.6%，RSD<4.5%，RSDs为2.1～6.4%。

2.4 基质固相萃取(MSPD)

MSPD技术是将待测样品与填料充分混合，经研磨制成半固态后装柱，依据相似相溶原理，优化合适的洗脱剂来洗脱待分析物。Wang等[14]合成了一种新型混合模板分子印迹聚合物，并且利用该聚合物建立了同时提取猪肉样品中20种SAs的基质固相分散法。罗辉泰等[15]采用0.1 mol/L Na2EDTA溶液及含1 %乙酸的乙腈涡旋提取，C18吸附剂分散固相萃取净化，并用HPLC-MS检测样品中63种药物残留。

2.5 分子印迹技术(MIPs)

MIPs具有特异性强、灵敏度高、准确度高、实用性强等优点。李玲等[16]采用本体聚合法，合成磺胺二甲基嘧啶分子印迹聚合物，印迹聚合物对模板分子的饱和吸附量可以达到11.37 mg/g，对7 种SAs具有特异性吸附效果；其同时建立了SPE-HPLC法检测猪肉中痕量SAs。Song等[17]合成了一种能同时识别8种氟喹诺酮类药物和8种SAs的双模版分子聚合物，制备并优化了固相萃取柱，并结合UHPLC法，对猪肉和鸡肉中的16种药物进行了测定。该柱可重复使用80次，对药物吸附力高(34.9～74.2 μg)，回收率高(92～99%)。

2.6 分散液液萃取(DLPME)

DLPME具有萃取溶剂用量少、萃取速度快、操作简单、对环境污染小等特点。张晶等[18]利用DLPME-HPLC法测定水样中 3 种SAs残留。对萃取剂、分散剂的种类和体积、pH值、盐浓度等影响萃取效率的因素进行了优化。在最优的萃取条件下，3种抗菌药的检出限为 0.07～0.25 μg /L，回收率在 82.0 %～104.0 %之间，相对标准偏差<5.9 %。

2.7 QuEChERS

QuEChERS具有快速、准确、高效的特点[19]。黄泽玮等[20]运用QuEChERS EMR-Lipid 技术作为前处理方法，通过HPLC-MS法建立了猪肉中55 种兽药残留的快速检测方法。Wen等[21]优化了盐出溶剂萃取-DSPE-QuEChERS净化方法，能降低基质效应，有效地从多种食用动物组织中提取SAs。许丹等[22]建立了检测猪肉中SAs的改良QuEChERS 法，结合FLD-HPLC法，测定18种SAs，其检出限(S/N=3)为 1～18 μg/kg，定量下限(S/N=10)为3～60 μg/kg。

2.8 其他萃取技术

除了以上萃取技术，研究者还开发了免疫亲和色谱技术[23](IAC)、超声辅助萃取、微波辅助萃取(MAE)、加压液相萃取(PLE)等萃取技术。

SPE是目前应用最广泛的前处理技术，QuEChERS法和MIPs的实用性更强，DLPME成本低、速度快、操作简单、对环境污染小等优点。

3 检测技术研究现状及特点

3.1 高效液相色谱技术(HPLC)

HPLC在抗生素检测上应用广泛，目前以猪肉样品作为基质，进行SAs残留的研究已经趋于成熟，相关研究统计详见表2。从表2可以看出，萃取方法以液液萃取和固相萃取为主，色谱柱以C18为主，保留时间最短，小于8 min；检测种类可达到10种。

表2 HPLC法分析统计

3.2 超高效液相色谱-串联质谱 (UPLC-MS/MS)

UPLC-MS/MS具有专一可靠、灵敏度高、高通量等特点[29]。该技术辅以合适的前处理方法，已成为目前国内外定量测定的黄金方法，相关研究统计详见表3。从表3可以看出，萃取方法以液液萃取为主，色谱柱以C18为主，质谱条件差别较大，检测种类可达到10种。

表3 UPLC-MS/MS技术分析统计

3.3 电化学技术

在SAs检测中，电化学分析方法的研究取得了较大的发展，但对于生鲜猪肉中SAs检测的文献较少[35]。目前对于食品中SAs的检测，常用的电传感一般为多壁碳纳米管(MWNTs)修饰电极。电化学检测的研究是开发低成本和便携式的常规分析仪器。因此，设计和开发用于SAs现场分析的微型电化学传感器具有广阔的应用前景。