氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物的制备及工艺优化

范珊珊 李铁男 陆纪宏 陈丽萍 田宏迪

浙江省金华康恩贝生物制药有限公司，浙江金华 321016

氯雷他定（loratadine）属于三环类第二代的抗组胺药物，通过选择性抑制外周神经组胺H1受体活性，抑制组胺引起的过敏症状，与第一代抗组织胺药相比，氯雷他定的一大特性是无瞌睡作用[1]，目前市售的氯雷他定口服制剂包括片剂、胶囊剂和糖浆剂。氯雷他定属于生物药剂学分类系统（BCS）Ⅱ类药物，水中溶解度仅为4 μg/ml[2]，水溶性较低，生物利用度较差。羟丙基-β-环糊精（HP-β-CD）是β-环糊精的一种羟烷基衍生物，具有优良的包合作用，可以提高被包合物质的稳定性，增加难溶性药物的溶解性，降低药物毒副作用以及提高药物的生物利用度[3]。HP-β-CD作为一种药物的辅料，在药剂学方面已经有了广泛的应用[4]，本研究为氯雷他定包合物的制备工艺提供一些依据。

1 仪器与材料

高效液相色谱 仪，L.7110（HITACHI）；XX型恒温磁力搅拌器，79HW-1（乐成电器厂）；紫外可见分光光度计，UV-VIS8500（上海天美科学仪器有限公司）；医用超声清洗器，KQ-100E（昆山市超声仪器有限公司）；电子分析天平，AEL.16-21（SHIMADzU）；远红外辐射干燥箱，766型-3（江苏省南通农业科学仪器）；电热恒温水浴锅，H.H.S.21.6（上海医疗器械三厂）；氯雷他定（Loratadine）原料药，含量95.68%（HPLC测 定）；羟 丙 基 -β － 环 糊 精（hydroxypropylβcyclodextrin，HP.p.CD，淄博千汇精细化工有限公司）；其他试剂均为分析纯、色谱纯。

2 方法与结果

2.1 含量测定的分析方法及方法学验证

2.1.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱条件：Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇：0.02 mol/L磷酸二氢钾（83∶17），检测波长：247 nm，流速：1 ml/min，理论塔板数按氯雷他定峰计算不得低于1000[5-8]。羟丙基-β-环糊精无影响。氯雷他定的HPLC色谱图见图1。

图1 氯雷他定的HPLC色谱图

2.1.2 线性 称取氯雷他定原料药100 mg，用流动相溶解稀释至100 ml，得氯雷他定对照品溶液。精密量取上述对照品溶液 0.1、1.0、2.0、3.0、5.0 ml，分别置于100 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，制得浓度分别为 1、10、20、30、50 μg/ml的溶液。在上述色谱条件下，分别精密量取20 μl注入液相色谱仪，以峰面积对进样浓度进行回归分析，得氯雷他定的回归方程为y=42 376x+25 097（r=0.9999），结果表明，其浓度在1.0～50μg/ml范围内呈良好的线性关系。

2.1.3 回收率试验 精密称取氯雷他定原料药适量，制成氯雷他定高中低3个浓度的样品。按“2.1.1项”下测定并计算回收率。见表1。

表1 回收率试验结果

2.1.4 精密度试验 取“2.1.3”项下同一浓度氯雷他定溶液，按“2.1.1”项下色谱条件连续测定6次，记录峰面积。见表2。

表2 精密度试验结果

2.1.5 包合物含量测定 称取包合物适量（约含氯雷他定100 mg），置于100 ml量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1 ml置于100 ml容量瓶中，用流动相稀释刻度，摇匀，照“2.1.1”项下测定氯雷他定的含量，按照下列公式计算包合物含药量（%）：

包合物含量（%）=样品中含药量/样品量×100%

包合率（%）=包合物样品含药量/投入药品量×100%

2.2 氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物的制备及工艺优化

2.2.1 氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物制备的基本工艺 称取HP-β-CD 9.00 g置于小烧杯中，加入20 ml蒸馏水，于恒温磁力搅拌器内搅拌使HP-B-CD溶解，40 ℃保温。另称取氯雷他定原料药0.766 g缓缓加入HP-β-CD溶液中，在40 ℃下不断搅拌（搅拌转速300 r/min），连续搅拌包合1 h，抽滤，得氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物溶液，滤液喷雾干燥，得疏松状的颗粒，即氯雷他定羟丙-β-环糊精包合物颗粒[9-12]。

2.2.2 氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物制备工艺的正交试验优化 为得到最佳包合物制备工艺，采用正交设计试验[13-15]，对影响包合工艺的主要因素氯雷他定与HP-β-CD的投料摩尔比A、包合时间（h）B、搅拌速度（r/min）C和包合温度（℃）D分别选择三个水平 A1（1 ∶ 3）A2（1 ∶ 4）A3（1 ∶ 5），B1（1）B2（2）B3（3），C1（300）C2（500）C3（800），D1（40）D2（50）D3（60）进行考察， 以氯雷他定的包合率为指标， 确定最佳制备工艺。正交试验因素见表3。

表3 正交试验因素、水平表

根据正交表L9（34）的9种试验方案，制备氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物，测定其包合率。结果见表4。

表4 L9（34）正交实验方案和结果

由试验结果分析各因素各列水平的情况：第1列A因素：K2＞K3＞K1，极差最大，为影响包合率的主要因素；第2列B因素：K3＞K1＞K2， 该因素对包合率影响较小；第3列C因素：K2＞K3＞K1，极差最小，说明对包合率影响最小；第4列D因素：K3＞K2＞K1，对包合率影响不大。综合考虑各因素对包合率的影响，筛选出投料比1∶4，包合时间3 h，搅拌速度500 r/min，温度60 ℃为氯雷他定羟丙基－β－环糊精包合物最佳制备工艺。

2.2.3 氯雷他定羟丙基－β－环糊精包合物样品制备 为验证本品最佳制备工艺，称取HP-β-CD 12.0 g置于小烧杯中，加入20 ml蒸馏水，于恒温磁力搅拌器内搅拌使HP-β-CD溶解，60 ℃保温。另称取氯雷他定原料药0.766 g缓缓加入HP-β-CD溶液中，在60 ℃下不断搅拌，连续包合3 h，抽滤，得氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物溶液，将滤液喷雾干燥，得疏松状的颗粒，即氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物。该工艺制备的包合物包合率见表5。

表5 A2B3C2D3最佳制备工艺包合率试验结果

2.3 稳定性试验

2.3.1 加速试验 称取一定量的氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物和氯雷他定原料药适量，分别置于开口称量瓶中，在（40±2） ℃，RH 75%条件下放置5、10 d，测定氯雷他定含量，结果见表6。实验结果表明，氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物在高温条件下具有较好的稳定性。

表6 样品加速试验含量检测结果

2.3.2 溶出度试验 称取氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物与氯雷他定原料药和HP-β-CD的混合物适量（约含氯雷他定10 mg），用滤纸包裹后置于干燥转篮内。采用溶出度测定法第一法，转速100 r/min，平稳后，将转篮降入溶出杯中，溶出杯中介质为蒸馏水900 ml，并保持（37±0.5）℃恒温，于45 min取样5 ml，经0.45 μm的微孔滤膜过滤后，取20 μl注入HPLC，按外标法计算，氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物中氯雷他定溶出度为97.67%，氯雷他定和HP-β-CD的混合物中氯雷他定溶出度为13.56%。实验结果表明，氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物溶出度较好。

2.4 结果

①制成氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物提高了氯雷他定在水中的溶解度。②按正交试验方法进行工艺摸索试验，氯雷他定羟丙基β-环糊精包合物的最佳包合工艺为投料比1∶4，包合时间3 h，搅拌速度500 r/min，温度60 ℃，该工艺可制备所得的包合率较高。③加速试验结果表明，氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物具有很好的稳定性，氯雷他定原料稳定性较差；溶出度试验结果表明，氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物溶出度较好。

3 讨论

采用正交试验法，对影响包合工艺的主要因素进行摸索试验，优化得到了最佳制备工艺，加速和溶出试验证明，氯雷他定羟丙基-β-环糊精包合物较稳定，且溶出度较高。由于本品放大生产过程后可能导致工艺控制不稳定，建议对产品进行预中试放大，摸索确定大生产工艺参数范围，为大生产提供参数依据及数据积累。