寻常型银屑病血浆中CGRP1、VIP 水平与PASI 评分的相关性分析

张春利，王 薇，刘利君，何 磊，吴景良，牛艳东，李雪飞，段昕所

（1.承德医学院附属医院皮肤病与性病科，河北 承德 067000；2.天津医科大学总医院总医院滨海医院皮肤科，天津 300450）

银屑病（psoriasis vulgaris，PV）是免疫介导的慢性、复发性、炎症性皮肤病，典型皮损临床表现为鳞屑性红斑或斑块，其发生与遗传、环境因素如潮湿、外伤、饮酒、精神紧张等因素有关[1]；且大多患者存在心理健康、情绪及社会适应能力等问题[2]。研究表明[3-5]，与敏性疾病和黑色素瘤患者相比，银屑病患者更容易出现精神并发症及自杀的念头，主要是心理应激因素通过中枢神经系统、外周神经系统和皮肤下丘脑-垂体-肾上腺素轴，参与对银屑病的神经免疫调节。而中枢神经系统在应激情况下可导致促炎神经肽[降钙基因相关肽（CGRP）、血管活性肠肽（VIP）]表达升高[6]。目前评估银屑病严重程度的常用指标之一为银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）[1]。本研究通过检测不同PASI 评分的银屑病患者血浆中的CGRP1、VIP 的表达情况，分析严重程度不同的寻常型型银屑病患者血浆CGRP1 及VIP 表达水平及其与PASI 的相关性，以期为确定寻常性银屑病严重程度的实验室判定指标提供支持。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018 年1 月～12 月于承德医学院附属医院收治的寻常型银屑病患者60 例作为研究对象。纳入标准：①依据2018 年银屑病对寻常型银屑病的诊断标准[1]；②2 个月内未进行规范化治疗或出现病情复发的情况；③无严重肝肾功能异常、感染、肿瘤及其它系统性疾病或免疫性疾病等。排除标准：①伴发有其它皮肤病、精神神经类疾病或者肿瘤性疾病患者；②妊娠期或哺乳期妇女。依据2018年寻常型银屑病诊疗指南的PASI 对患者的病情严重程度进行评估[1]（PASI＜3 分为轻度银屑病，PASI 3～10 分为中度银屑病，PASI≥10 分为重度银屑病），将PASI 评分＜10 分设为PV1 组，PASI 评分10～20 分设为PV2 组，PASI 评分20～30 分设为PV3组，各20 例。同时另选取本院健康体检者20 名作为对照组。PV1 组男14 例，女6 例，年龄11～82，平均年龄（50.80±9.87）岁；PV2 组男17 例，女3 例，年龄9～66，平均年龄（42.90±18.27）岁；PV3 组男15例，女5 例，年龄17～83，平均年龄（39.35.20±21.69）岁；对照组男14 例，女6 例，年龄18～64，平均年龄（50.80±9.87）岁。四组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会审批通过，所有研究对象知情同意并签署知情同意书。

1.2 主要仪器及试剂 低速离心机（北京雷勃尔医疗器械有限公司），-80 ℃低温冰箱（Haier 电器），4 ℃低温冰箱（Haier 电器），全自动酶标仪（Thermo scientific Multiskan Mk3），定轨摇床（海门市其林贝尔仪器制定有限公司），GN-RO-100 型纯水机（北京双峰纯水设备厂），人/小鼠/大鼠CGRP1 ELISA 试剂盒（美国RayBiotech 公司），人/小鼠/大鼠VIP ELISA 试剂盒（美国RayBiotech 公司）。

1.3 方法

1.3.1 标本采集及保存 采集研究对象外周静脉血5 ml，置于肝素抗凝管中，均于3000 r/min 的转速下离心10 min，取上清，并按一次用量分装，冻存于-80 ℃低温冰箱中保存。

1.3.2 CGRP1、VIP 检测 参照ELISA 试剂和说明操作的检测，在450 nm 波长处检测出反应孔的OD值。使用SigmaPlot 12.0 软件，以标准品浓度为横坐标，以B（标准品或样本的OD 值）/B0（0 ng/ml 标准品的OD 值）为纵坐标，绘制标准曲线，并计算各样本的浓度。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0 统计学软件对数据进行统计分析，利用Shapiro-wilk 检验判断样本的正态性，计数资料以（n）表示，采用χ2检验；计量资料以（）表示，采用F检验或Welch 检验；利用线性回归分析进行相关性分析，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四组CGRP1、VIP 水平比较 四组血浆CGRP1及VIP 表达水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），其中PV3 组＞PV2 组＞PV1 组＞对照组；但PV1 组与对照组血浆CGRP1、VIP 比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；PV2 组与PV3 组血浆VIP 比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 四组CGRP1、VIP 水平比较（，ng/ml）

表1 四组CGRP1、VIP 水平比较（，ng/ml）

2.2 PV 组血浆CGRP1 及VIP 的表达水平与PASI的相关性分析 PV 患者血浆CGRP1 与PASI 呈正相关（r=0.7093，P=0.0001）；PV 患者血浆VIP 与PASI 无相关性（r=0.2289，P=0.7850），见图1。

3 讨论

银屑病是一种反复发作的慢性炎症性皮肤病，现广泛认为银屑病发病机制与神经、环境、遗传、感染、代谢、免疫等因素有关。Vegas O 等[6]在银屑病小鼠模型中将皮肤支配神经切断后发现，皮损现象明显好转，炎症因子相对减少，但皮损补充神经肽后出现加重的情况，炎症因子逐渐增多，这表明神经参与银屑病的发病过程。皮肤是外周的神经内分泌器官，与中枢神经系统具有相同的神经外胚层来源、相似的下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA）系统和密布复杂的神经纤维，并表达多种激素、神经肽及其受体。研究表明[7]，CGRP 和VIP 相关神经纤维在银屑病患者的真皮乳头层增多，可导致真皮乳头的血管扩张加重，从而加重银屑病。

CGRP 在银屑病皮损中是一种高表达的神经肽，它包括37 个氨基酸，分为2 个亚型，具有相似的生物学效应。CGRP 广泛存在于神经系统，大部分由感觉神经分泌，为皮肤中重要的感觉神经递质，与皮肤免疫密切相关。研究显示[8]，CGRP 可能通过促进HaCaT 细胞增殖和分泌神经生长因子（NFG），并刺激朗格汉斯细胞分泌白介素-1β（IL-1β）、白介素-10（IL-10），产生自身迁移[9]，从而使血管内皮细胞活化，引起血管扩张[10]；且CGRP 通过调节朗格汉斯细胞抗原提呈过程，可诱导CD4+T 细胞分化为Th17细胞[11]，参与银屑病的发生途径。而在银屑病皮损中高表达的另一种神经肽VIP 是一个由28 个氨基酸组成的脑肠肽，广泛存在于神经系统，在神经-内分泌系统发挥着重要的免疫调节作用。研究表明[12]，VIP 可促进表皮角质形成细胞产生血管内皮生长因子（VEGF），引起血管过度增生和血管扩张，与表皮角质形成细胞（KC）上的VIPR 结合，从而调节KC的功能，高浓度时促进KC 分泌IL-6/IL-8 等细胞因子，导致KC 增殖[13]；且VIP 可调节肥大细胞脱颗粒刺激KC 增殖[12，13]。本研究检测了这两条种神经肽在外周血的表达情况，结果显示四组血浆CGRP1 及VIP 表达水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），其中PV3 组＞PV2 组＞PV1 组＞对照组；但PV1 组与对照组血浆CGRP1、VIP 比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；PV2 组与PV3 组血浆VIP 比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示寻常型银屑病患者血浆中CGRP1、VIP 表达水平总体高于健康人群，而轻中度银屑病患者与健康人群的血浆中CGRP1 及VIP 水平表达一致。此外，本研究相关性分析显示，PV 患者血 浆CGRP1 与PASI 呈 正 相 关（r=0.7093，P=0.0001）；PV 患者血浆VIP 与PASI 无相关性（r=0.2289，P=0.7850），说明寻常型银屑病患者外周血CGRP1 水平随着寻常型银屑病严重程度的增加而增加，而外周血VIP 水平有所升高，但不随着寻常型银屑病严重程度的增加而增加。

综上所述，寻常型银屑病患者血浆CGRP1 与PASI 评分密切相关，可作为辅助评价寻常性银屑病严重程度的相对客观的实验室指标。但由于银屑病的发病机制比较复杂，涉及的细胞因子较多，需要扩大样本量，丰富检测方法以验证寻常型银屑病患者外周CGRP1 与疾病严重程度之间的关系。