甘肃省河西地区规模羊场主要疫病血清抗体水平检测

赵书艺 ， 崔 燕

(1.中农威特生物科技股份有限公司 ， 甘肃 兰州 730046 ； 2. 甘肃农业大学动物医学院 ， 甘肃 兰州 730070)

近年来，甘肃省河西地区肉羊产业发展势头强劲[1]，随着饲养规模的不断扩大，规模羊场数量不断增多，饲养方式也逐渐以舍饲圈养为主。然而，随着河西地区与内蒙古、新疆等地羊只流通、调运愈加频繁，进一步加剧了羊疫病的流行和发生[2]。口蹄疫(Food-and-mouth disease，FMD)、小反刍兽疫(Peste des petits ruminants，PPR)、羊痘(Sheep pox, SP)和布鲁氏菌病(Brucellosis)等羊常见疫病发病愈加频繁、感染率呈现上升趋势[3]。因此，为进一步了解河西地区规模羊场羊疫病血清抗体产生情况，笔者通过实地调查和血清学监测的方法对甘肃省河西四市2017年、2018年部分规模羊场4种疫病血清抗体产生状况开展较为系统的调查和分析，希望可以为河西地区羊场疫病防控提供一定的参考依据。

1 材料与方法

1.1 调查区域与对象 河西四市近年来在市场需求和相关政策引导下肉羊产业取得了快速的发展，成为西部地区重要的肉羊生产基地。截止2017年底，河西四市羊饲养量达1 831.88万只，其中存栏1 044.84 万只，出栏787.04万只，见图1。肉羊养殖分布情况分别为，酒泉市36.86%、武威市29.54%、张掖市26.27%、金昌市7.32%。

图1 河西四市2013—2017年肉羊养殖情况Fig.1 The situation of sheep breeding in the four cities of Hexi from 2013 to 2017

1.2 材料

1.2.1 血清样品 2017年、2018年共采集血清样品10 508份，其中2017年4 802份(免疫羊群血清3 246份，未免疫羊群血清1 556份)，2018年5 706份(免疫羊群血清4 084份，未免疫羊群血清1 622份)。分离血清后放置冰箱冻存，用于后续检测。

1.2.2 检测仪器与试剂 TDZ5-WS低速离心机，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；DNP-9082BS-III 电热恒温培养箱，上海新苗医疗器械制造有限公司；RT-6000酶标仪，深圳雷杜公司；SK96-3型微量震荡仪，江苏新康医疗器械有限公司。口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒，购自中国农业科学院兰州兽医研究所；小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测试剂盒，购自中国动物卫生与流行病学中心；羊痘抗体检测试剂盒，购自上海岚派生物科技有限公司；布鲁氏菌病虎红平板凝集抗原和试管凝集抗原，均购自中国兽医药品监察所。

1.3 方法 血清学调查方法：口蹄疫O型血清抗体检测采用正向间接血凝抑制试验；小反刍兽疫血清抗体检测采用阻断ELISA；羊痘血清抗体检测采用间接ELISA；布鲁氏菌血清抗体检测采用虎红平板凝集试验(RBT)初检，对初检阳性的再用试管凝集试验(SAT)方法复核。

2 结果

2.1 2017年、2018年全市种羊场布病血清流行率 结果见表1。从表1 可看出，2017年免疫羊群共检测3 246份血清，口蹄疫、小反刍兽疫和羊痘的抗体阳性率均超过农业部关于印发《2018年国家动物与疫病强制免疫计划》要求，其中口蹄疫抗体阳性率酒泉市最高、武威市最低；小反刍兽疫抗体阳性率金昌市最高、酒泉市最低；羊痘血清抗体阳性率张掖市最高，武威市最低；四市的布鲁氏菌病血清抗体阳性率均未超过甘肃省规定的70%的标准。未免疫羊群共检测1 556份血清样品，张掖市、酒泉市4种疫病血清抗体均有检出，武威市只有小反刍兽疫抗体未检出，其他3种疫病血清抗体均有检出；金昌市小反刍兽疫抗体、羊痘抗体均未检出，口蹄疫和布鲁氏菌病血清抗体均有检出，四市布鲁氏菌病血清抗体检出率最高，小反刍兽疫血清抗体检出率最低。

表1 2017年、2018年河西四市免疫羊群主要疫病免疫抗体检测结果Table 1 Test results of immune antibodies against the main epidemic diseases in the four cities of Hexi in 2017 and 2018

2018免疫羊群共检测4 084份血清，口蹄疫、小反刍兽疫和羊痘血清抗体阳性率均达到农业部关于印发《2018年国家动物与疫病强制免疫计划》要求，而布鲁氏菌病血清抗体未达到甘肃省地方政府要求。口蹄疫血清抗体阳性率张掖市最高、金昌市最低；小反刍兽疫抗体张掖市最高、酒泉市最低；羊痘血清抗体张掖市最高、武威市最低；布鲁氏菌病血清抗体均未达到甘肃省规定要求。未免疫羊群共检测1 622份血清样品，武威市口蹄疫、小反刍兽疫血清抗体未检出，金昌市小反刍兽疫血清抗体未检出，张掖市口蹄疫血清抗体未检出，酒泉市口蹄疫、小反刍兽疫血清抗体未检出。2018年布鲁氏菌病血清抗体检出率仍然较高，口蹄疫、小反刍兽疫血清抗体检出率较低。

3 讨论

本试验通过血清学调查的方法对河西四市2017年、2018年免疫羊群和未免疫羊群的口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘和布鲁氏菌病4种疫病的血清抗体产生情况进行了调查和分析。结果表明，2017年、2018年河西四市口蹄疫和小反刍兽疫2种国家强制免疫疫病的血清免疫抗体均超过了农业部关于印发《2018年国家动物与疫病强制免疫计划》要求，羊痘免疫血清抗体合格率达到甘肃省地方政府规定要求，而布鲁氏菌病免疫抗体平均合格率仍未达到甘肃省地方要求，表明当地畜牧兽医部门在羊主要疫病防控方面工作较为扎实[4]，当地规模羊场的防疫程序实施效果较好。但是，口蹄疫和小反刍兽疫免疫抗体的平均合格率均有小幅度降低，据分析可能由于2018年河西地区与周边地区商品羊流动频繁有关[5]。另外，布鲁氏菌病2年的免疫抗体平均合格率均未达到国家要求，可能与基层防疫人员操作规范程度[6]和布鲁氏菌病疫苗的免疫保护力有一定的关系[7]，说明布鲁氏菌病的防控形势仍然较为严峻。未免疫羊群血清抗体结果表明，河西四市隐性感染最严重的是布鲁氏菌病，之后依次为羊痘、口蹄疫和小反刍兽疫，表明这4种疫病在河西四市具有不同程度的隐性感染。

鉴于此，河西四市需要从以下方面加强规模羊场疫病防控工作[8]。第一，规范接种免疫。科学制定免疫防控程序，强化基层兽医技术人员技能培训，特别是对母羊、断奶羔羊及时补免，提高免疫覆盖率和免疫保护率[9]。第二，加强引种检疫。养殖场户必须严格遵循引种程序避免从疫情多发地引种，引进种羊要做到全覆盖检测并隔离饲养观察30 d， 待各项检测指标均合格后方可混群，对引种运输途中出现的病死羊要严格无害化处理[10]。第三，强化流行病学检测结果运用[11]。对检出未免疫羊群的阳性场户要全群检测，做好阳性畜处理，严格控制疫情的传播和蔓延。