根除儿童口腔幽门螺杆菌预防胃内幽门螺杆菌感染的多中心研究

黄超，彭伟强，吴海涛，程水颖，陈姣姣，赵庆波，钟海彬，马健，赵莉

1.广州医科大学附属深圳沙井医院（深圳市中西医结合医院）脾胃病科，广东深圳518104；2.东莞口腔医院综合科，广东东莞523000；3.东莞口腔医院种植科，广东东莞523000；4.东莞口腔医院牙周科，广东东莞523000；5.广东医创时代科技发展有限公司，广东广州511442；6.五华县中医医院内科II区，广东梅州514400；7.青海省黄南藏族自治州人民医院，青海黄南811300

前言

大多数幽门螺杆菌（Hp）患者是在体检中发现的，有70%的人感染Hp后没有症状，10%的人可能存在消化不良，10%～20%的人可能有消化道溃疡。很多无症状感染患者会发生Hp相关性胃炎，尽管无症状，但胃粘膜已经发生炎症，不进行干预治疗，部分患者在炎症基础上发生萎缩或肠上皮化生，进一步导致低级别乃至高级别上皮内瘤变等癌前病变，最后甚至恶变为癌。目前国际共识是，不管有没有症状和并发症，Hp感染性胃炎都是一种传染性疾病，一旦发现，必须根除Hp。但目前根除Hp的主要方法为PPI联合铋剂及两种抗生素，这一方法不适用于患儿，且不少患儿采用不规范治疗导致Hp耐药［1］。另外，中国人平均Hp感染率高达59%，其中儿童的感染率平均为40%，即便是无症状儿童感染率也非常高，如四川省南充市无症状儿童Hp感染的流行病学调查显示Hp阳性率为18.16%（223/1 228）［2］。我国各地区Hp感染率差异显著［3］。这么高的感染率和地区差异性是因为Hp存在于口腔中，主要传播途径为“口-口”传播，中国口腔卫生及使用公筷习惯差异是导致上述情况的主要原因。可否通过杀灭口腔中的Hp对传染源和传播途径加以控制，从而降低胃内Hp感染率呢？本研究针对这个设想进行探讨。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究选取2019年11月～2020年12月间在广东省深圳市2 所幼儿园、广东省东莞市2 所幼儿园、广东省梅州市1所幼儿园以及青海省黄南藏族自治州2所幼儿园就读的儿童，口腔Hp阳性，但血清Hp抗体阴性并C13呼气试验阴性儿童共计427 例，平均年龄（4.6±1.2）岁。将患者随机分为“无幽梅”抗Hp牙膏治疗试验组与普通牙膏治疗对照组。两组患儿性别、年龄、牙菌斑指数、父母亲口腔保健态度指数、儿童口腔清洁能力、少数民族占比以及生活质量指数等一般资料见表1。两组开始治疗前各项基本状况指标均无统计学差异（P＞0.05），具有可比性。

表1 两组对象基本资料比较Tab.1 Comparison of basic information between two groups

1.2 纳入和排除标准

纳入标准：①年龄3 周岁（含）至6 周岁（含）儿童，性别不限；②口腔Hp检测阳性：采用套式PCR 技术对Hp基因组DNA 860 bp 片段的两套引物进行分析，这些引物已被其他研究人员报道为高度敏感和特异的；③血清Hp抗体阴性及C13呼气试验阴性；④1个月内未服用抗生素。

排除标准：①对黄芩、金银花、乌梅过敏的儿童；②不能按照要求刷牙的儿童；③不愿意参与研究的儿童。

1.3 方法

研究对象按照1：1比例，随机分为使用“无幽梅”牙膏试验组与使用普通牙膏对照组。试验组和对照组每天早晚各刷牙1 次，每次不少于3 min，连续3 个月，疗程结束后采用套式PCR 技术对Hp基因组DNA 860 bp 片段的两套引物进行分析。口腔Hp根除率是指疗程结束后，套式PCR 复查口腔Hp阴性所占的比例。之后，重新分组，将口腔Hp阳性及阴性的患者各分为一组，分别为口腔Hp阳性组及口腔Hp阴性组，1年后，行C13呼气试验检查，分析两组患者胃内Hp感染情况。

1.4 质量控制

为防止偏倚的发生：①严格执行随机双盲试验，分组符合均衡性检验标准；②两种牙膏均由广东医创时代科技发展有限公司赠送，普通牙膏除未添加3种天然药物外，其余包括外包装、膏体成分、膏质色泽与“无幽梅”牙膏保持一致；③采用儿童圆弧刷牙法：刷前牙时上下牙齿相对，选择直径较细的小头软毛牙刷（由广东医创时代科技发展有限公司赠送），放在上颌最后一颗磨牙的颊侧，以圆弧的动作从上颌牙龈拖拉到下颌牙龈。

1.5 统计学方法

运用SPSS 22.0 进行数据分析。计量资料用均数±标准差描述，采用成组t检验；计数资料采用卡方检验。P＜0.05认为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 使用“无幽梅”牙膏的试验组与使用普通牙膏的对照组口腔Hp根除率比较

3个月疗程结束后，普通牙膏组未完成试验12人，口腔Hp根除例数25例，根除率为12.43%（25/201）。“无幽梅”牙膏组未完成试验11人，口腔Hp根除例数为192例，根除率为94.58%（192/203），两组牙膏口腔Hp根除率比较差异具有统计学意义（P＜0.01）。

2.2 口腔Hp 阳性组与口腔Hp 阴性组胃内Hp 感染率比较

口腔Hp阴性组合计217 人，口腔Hp阳性组合计187 人。1年后口腔Hp阴性组未进行C13呼气试验21人，未完成试验率为9.68%（21/217），经C13呼气试验证实胃内Hp阳性患者1 人，感染率为0.51%（1/196）；口腔Hp阳性组失访18 人，失访率为9.63%（18/187），经C13呼气试验证实胃内Hp阳性患者11 人，感染率为6.51%（11/169）。两组胃内Hp感染率具有统计学差异（P＜0.01）。

3 讨论

口腔内存在Hp且与多种口腔疾病密切相关［4］。Leimola-Virtanen 等［5］对发生在颊粘膜（11 例）、唇粘膜（6例）、唇沟处粘膜（4例）、舌部（4例）、颊侧附着龈（2 例）以及腭侧牙龈（2 例）共29 例口腔溃疡作活体检查，病程1月～10年不等，粘膜损害表现为周围绕以苔藓样改变的溃疡16 例，单个萎缩性溃疡者7 例，阿弗它溃疡6 例，所有活检标本均行HpDNA 原位检测，其中6例HpDNA阳性，HpDNA定位于溃疡的表面或靠近溃疡面的上皮细胞中，甚至在肉芽组织中亦见到HpDNA，且发现HpDNA 阳性的溃疡均位于颊粘膜，由此可见口腔溃疡的发生可能与Hp感染相关。Desai 等［6］对牙菌斑和胃中Hp的相关性研究发现，24 例消化不良患者的Hp检测，牙菌斑为98%，胃体部为70%，胃窦部为67%，抗Hp治疗后，患者胃粘膜中Hp均根除，而牙菌斑中则持续存在，故Hp再感染可能来源于牙菌斑中的Hp。Shames等［7］研究发现牙菌斑中的Hp酶切图谱与胃粘膜标本中一致，证实不同部位感染相同菌株的Hp。Schein等［8］发现Hp的自然“居住地”是牙周袋，这样一个良好的微需氧环境适合Hp生存。Shimada 等［9］用PCR 检测胃炎患者唾液中的Hp，结果发现阳性率为24.3%，说明口腔是Hp的一个寄居部位。上述研究提供了以下科学论据，包括口腔内存在Hp，Hp可存在口腔粘膜、牙菌斑、牙周袋以及唾液中，口腔Hp与多种口腔疾病密切相关，口腔Hp与胃内Hp同源，根除胃内Hp的方法不能根除口腔Hp。但可否通过根除口腔Hp降低胃内Hp感染率，如果可能，将有重要意义，特别是针对儿童胃内Hp感染的预防有重要意义。Hp被列为一类致癌因子，其重要原因之一就是儿童期感染Hp，导致Hp长期存在于人体内，进而有发生胃癌的可能性。事实上，Berkowicz等［10］研究某个弱智学校学员的Hp感染率，该校学员通过“口-口”传播Hp相关疾病的机率很高，对该校的进一步调查发现学员血清中Hp抗体阳性率达60%～80%。因此根除口腔Hp可能是防止胃Hp感染的重要措施。为此，本研究从儿童角度出发，采用前瞻随机研究，口腔Hp阳性及阴性儿童随访1年，结果表明胃内感染率存在统计学差异。其次，本研究再次证实“无幽梅”中药牙膏根除口腔Hp的可行性，也为挖掘中国传统医学，从中医药角度出发研制抗Hp方法提供了全新思路［11］，更为重要的是本研究为从儿童出发预防Hp感染提供了新手段。