rb-bFGF联合利多卡因治疗儿童复发性口腔溃疡的效果及对患儿Treg细胞的影响

李群，谭劲，刘寻，周婷婷，左巧娟

复发性口腔溃疡又称为复发性口疮或复发性阿弗他口炎，是临床常见的口腔黏膜疾病之一，发病率极高，具有周期性、复发性及自限性等特点[1]。常见发病部位有唇、颊、舌缘等，在黏膜任何部位均可发生[2]。目前对于复发性口腔溃疡的发病机制仍尚未明确，但普通感冒、精神紧张、情绪低下、消化不良等情况均能偶然引起此病的发生[3]。患儿因免疫调节能力较差，容易感染此病，且部分患儿忍耐性差，对其家属造成困扰。张悦等[4]研究认为，复发性口腔溃疡经常反复发作且伴随疼痛，严重影响患儿的日常生活质量。目前临床以药物治疗复发性口腔溃疡为主，常见药物有左旋咪唑、维生素等。现观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor，rb-bFGF)联合利多卡因治疗儿童复发性口腔溃疡的效果及对患儿调节性T细胞(Treg)因子的影响，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年1月—2020年6月湖南中医药大学第一附属医院口腔科诊治复发性口腔溃疡患儿156例，随机数字表法分为利多卡因组和联合用药组，各78例。利多卡因组男38例，女40例，年龄2～11(6.3±1.5)岁；溃疡分级：Ⅱ级20例，Ⅲ级35例，Ⅳ级23例。联合用药组男39例，女39例，年龄2～13(6.5±1.7)岁；溃疡分级：Ⅱ级18例，Ⅲ级36例，Ⅳ级24例。2组患儿性别、年龄、溃疡分级等资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会审批通过，患儿家属均知情同意并签署知情同意书。

1.2 病例选择标准 (1)纳入标准：符合“复发性阿弗他溃疡诊疗指南(试行)”[5]中相关诊断标准。(2)排除标准：患有霉菌性口腔炎及手足口病等口腔疾病或全身感染者；近3个月内服用过免疫调节类药物者；对研究所用药物过敏者；合并精神病或严重心、肝、肾等脏器急慢性病变者；用药依从性差者。

1.3 治疗方法 治疗前对患儿均进行口腔清洁，尤其针对溃疡面黏膜组织及分泌物，并视情况适当补充维生素及氨基酸营养液等。利多卡因组在餐前涂抹适量2%利多卡因(同方药业集团有限公司生产)，外涂溃疡面，2次/d。联合用药组在其基础上将rb-bFGF外用凝胶(珠海亿胜生物制药有限公司生产)涂抹于溃疡处，3次/d，用药后30 min禁止饮食漱口,2组患儿均持续治疗7 d。

1.4 观察指标与方法

1.4.1 临床症状缓解时间：观察2组患儿疼痛消失、溃疡愈合、进食改善时间。

1.4.2 溃疡面积、个数及疼痛评分：观察2组患儿溃疡面积、个数； 采用视觉模拟评分法(VAS)对患儿疼痛程度进行评价，总分10分，数值越大，表示疼痛程度越重。

1.4.3 血清Treg细胞因子检测：分别于治疗前、后抽取患儿清晨空腹静脉血3 ml，离心留取血清，采用贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司的CytoFLEX 流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+、NKT水平 。

1.4.4 血清炎性因子检测：上述血清采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、IL-4、IL-8水平。

1.4.5 不良反应：观察2组患儿恶心、呕吐、皮疹等不良反应发生情况。

1.5 治疗效果评价 根据中华口腔医学会口腔黏膜病专业委员会颁布的复发性口腔溃疡效果评估标准对治疗效果进行判定[6]。 显效：患儿口腔溃疡愈合面积≥80%，无充血、疼痛现象，6个月内未见复发；有效：患儿口腔溃疡愈合面积30%～<80%，局部轻度充血，疼痛感缓解，3个月内未见复发；无效：患儿口腔溃疡愈合面积<30%且缓慢，局部充血、疼痛、渗出现象严重。治疗总有效率=(显效+有效)/总例数×100%。

2 结 果

2.1 2组治疗效果比较 联合用药组治疗总有效率为98.72%，高于利多卡因组的89.74%，差异具有统计学意义(χ2=5.778,P=0.016)，见表1。

表1 2组复发性口腔溃疡患儿治疗效果比较 [例(%)]

2.2 2组临床症状缓解时间比较 联合用药组临床症状缓解时间明显短于利多卡因组，差异具有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 2组复发性口腔溃疡患儿临床症状缓解时间比较

2.3 2组治疗前后溃疡面积、个数及VAS评分比较 治疗前2组患儿溃疡面积、个数及VAS评分比较，差异无统计学意义 (P>0.05)；与治疗前比较,治疗7 d后2组患儿溃疡面积减小，溃疡个数减少，VAS评分降低，且联合用药组各指标均低于利多卡因组，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表3。

表3 2组复发性口腔溃疡患儿治疗前后溃疡面积、个数及VAS评分比较

2.4 2组治疗前后血清Treg细胞因子比较 治疗前2组患儿血清Treg细胞因子比较，差异无统计学意义(P>0.05)；与治疗前比较,治疗7 d后2组患儿血清Treg细胞因子均升高，且联合用药组高于利多卡因组，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表4。

表4 2组复发性口腔溃疡患儿治疗前后血清Treg细胞因子指标比较

2.5 2组治疗前后血清炎性因子水平比较 治疗前2组患儿血清炎性因子水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；与治疗前比较,治疗7 d后2组患儿血清TNF-α、IL-8水平降低，IL-2、IL-4水平升高，且联合用药组降低/升高幅度大于利多卡因组，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表5。

表5 2组复发性口腔溃疡患儿治疗前后血清炎性因子水平比较

2.6 2组不良反应比较 联合用药组不良反应发生率为6.41%，高于利多卡因组的2.56%，但2组比较差异无统计学意义(χ2=1.346，P=0.246)，见表6。

表6 2组复发性口腔溃疡患儿不良反应比较 [例(%)]

3 讨 论

复发性口腔溃疡常见的症状为口腔黏膜出现孤立的圆形或椭圆形浅表层小溃疡，常伴随着一定的疼痛感，尤其在遇到物理性刺激后疼痛感更为强烈[6]。此病的发生发展可能与遗传、感染、精神、机体免疫、内分泌失调等因素相关，其中免疫失调是致病的重要原因之一[7-8]。目前，临床上治疗口腔溃疡以对症治疗、提高创口愈合及免疫力、降低复发率为主要原则[9]。rb-bFGF是一种多功能细胞生长因子，来源于中胚层和神经外胚层细胞，具有促分裂增殖的作用，可对新生血管的形成、组织损伤后创面愈合起一定的促进作用；此外还可促进小鼠细胞免疫功能[10-11]。rb-bFGF对组织具有刺激作用，还可改善局部血液循环、调节免疫功能[12]。利多卡因是可卡因的衍生物，常用于局部麻醉及心律失常中，麻醉见效快且效果较强、持久[13]。利多卡因属于酰胺类局部麻醉药物，具有穿透性好、敏感性高、不良反应小等特点，在复发性口腔溃疡中可有效缓解溃疡面疼痛，但其在控制炎性反应、改善免疫功能上作用有限[14-15]。本结果显示，与利多卡因单独治疗相比，rb-bFGF联合利多卡因疗效更佳，其原因可能为两药联合可发挥协同效应，同时发挥局部作用和全身性作用，并通过多种作用机制共同促进疗效整体性提高，进一步改善临床症状及免疫功能。

复发性口腔溃疡属于自身免疫性疾病，其发展过程中T淋巴细胞亚群发挥关键作用，可诱导及辅助免疫系统调节[16]。有研究显示[17-19]，复发性口腔溃疡会对机体免疫功能和免疫细胞亚群、免疫细胞及因子造成一定影响，并导致CD3+、CD4+、CD8+等T淋巴细胞亚群水平下降，双向免疫功能紊乱，与本研究中复发性口腔溃疡患儿机体免疫功能较低结论一致。NKT细胞是特殊的T细胞亚群，它可产生大量的细胞因子，其活化后对免疫应答有较大的影响[20]。在本研究中，rb-bFGF联合利多卡因可有效增强机体免疫功能，其原因可能为两药联合可激活免疫细胞，调节机体免疫系统，促使创面愈合。

炎性反应亦是复发性口腔溃疡发病重要因素，其中TNF-α、IL-2、IL-4、IL-8为机体炎性反应的重要介质[21]。复发性口腔溃疡存在炎性反应，其中TNF-α水平升高会对细胞因子数量及功能产生影响，促进IL-2、IL-6等多种促炎因子释放，引起并加重级联反应，进一步加重溃疡程度[22-23]。IL-2是存在于免疫系统中的一类细胞生长因子，属于抗炎因子，可调控免疫系统中白细胞的活性，还可参与抗体反应、造血和肿瘤监视；此外，其水平变化与复发性口腔溃疡密切相关[24]。IL-8是趋化细胞因子之一，在人类生殖生理和病理过程中起一定的调节作用，它可通过细胞趋化作用实现其对炎性反应的调节、杀菌和减少细胞损伤的目的[25]。 rb-bFGF联合利多卡因可有效改善炎性因子水平，其原因可能为两药联合可有效发挥杀菌、减轻炎性反应的作用，改善病变黏膜微循环，减轻黏膜损伤。

综上所述，rb-bFGF联合利多卡因治疗儿童复发性口腔溃疡可有效促进溃疡恢复，缓解临床症状，减轻疼痛感和机体炎性反应，增强免疫功能，效果显著。但因本研究纳入的样本数量有限和研究时间较短，rb-bFGF联合利多卡因治疗儿童复发性口腔溃疡的临床效果还需进一步开展大样本试验证实。

利益冲突：所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明

李群、刘寻：设计研究方案，实施研究过程，论文撰写，进行统计学分析；谭劲、左巧娟：提出研究思路，分析试验数据，论文审核；周婷婷：实施研究过程，资料搜集整理，论文修改