Hp感染状态、IL-6-174基因多态性与HDL水平的相关性研究*

崔晓容，熊 玮

(陆军军医大学第一附属医院老年医学科，重庆 400038)

近年来人口老龄化进程日益加剧，老年健康问题也成为社会关注的焦点之一。消化不良是一种常见的症候群，症状含反复或持续性发作的上腹部不适、饱胀、早饱、灼热、隐痛等，经上消化道内镜、肝胆胰影像学、生化检查均无明显异常为功能性消化不良，老年群体生理机能的退化很容易引发此病。对于老年功能性消化不良患者而言，多数存在幽门螺杆菌(Hp)感染，而Hp感染与动脉粥样硬化性血清脂质变化有关[1-4]；此外，Hp感染可引起多种细胞因子反应，包括白细胞介素-6(IL-6)的释放[5]，而血清IL-6水平升高又能导致类脂物代谢作用的改变[6]。早在20世纪，FISHMAN等[7]就认为基因5′侧翼区IL-6基因启动子-174(IL-6-174)多态等位基因G/C(rs1800795)与血清IL-6水平升高有关，只是有学者认为IL-6-174多态性与血清IL-6水平之间的关系似乎随着参与者群体的变化(不同年龄、种族等)而有所不同[8-10]；然而FERNNDEZ-REAL等[11]研究发现IL-6-174多态性与血脂异常存在一定的联系。但国内关于老年患者Hp感染、IL-6-174多态性与血脂相关性的研究相对较少。鉴于此，本研究对老年功能性消化不良患者进行溃疡、血脂检查、Hp检测及IL-6-174基因型分析，以探讨老年患者Hp感染、IL-6-174基因多态性与血清高密度脂蛋白(HDL)水平关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年8月至2019年12月本院行内窥镜检查的298例老年功能性消化不良患者为研究对象。纳入标准：(1)涉及符合RomeⅢ诊断标准的消化不良症状，即3个月内出现餐后饱胀、早饱感、上腹痛或上腹烧灼感；(2)年龄60岁以上。排除标准：(1)患有免疫抑制性疾病或恶性疾病；(2)既往接受过Hp根除治疗、免疫抑制治疗或抗凝药物治疗；(3)曾接受过胃外科手术、或正在进行抗生素治疗；(4)患有代谢性疾病、慢性炎性疾病的患者。

1.2 方法

1.2.1检测内容

(1)Hp感染情况；(2)HDL水平；(3)IL-6-174基因多态性。

1.2.2Hp检测

碳13呼气试验(13C-UBT)检测Hp：患者晨起空腹及口服1粒尿素[13C]胶囊(深圳市中核海得威生物科技有限公司)，静坐30 min，全力向集气袋吹气。通过集气袋收集气体，通过分析呼气中碳13标记的CO2的含量来判断是否存在幽门螺杆菌感染。Hp阳性(Hp+)参考值为DOB≥4.0%，反之为Hp阴性(Hp—)。

1.2.3HDL检测

采用Global Site全自动生化分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)，通过超速离心结合ALBK法测定血清HDL水平(HDL<1.04 mmol/L为低HDL水平[12])。根据HDL水平将其分为正常HDL水平患者和低HDL水平患者。

1.2.4IL-6-174基因多态性检测

提取患者血液中DNA，基于限制性片段长度多态性方法(RFLP)，通过限制性内切酶NlaⅢ、PCR引物(上游引物5′-GCG CAA TTC TCC GTG ACA G-3′，下游引物5′-CGA GAA GGT CTG ATT GGA C-3′)、PCR仪、电泳仪聚丙烯酰胺配制试剂等检测上述DNA标本IL-6-174基因多态性。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 患者一般资料

正常HDL水平与低HDL水平患者的胃溃疡、Hp感染状态比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 患者一般资料(n=298)

2.2 不同变量与低HDL水平的相关性

通过logistic回归模型调整相关混杂因素后，结果显示男性、Hp+、胃溃疡与低HDL水平相关(P<0.05)，见表2。

表2 不同变量与低HDL水平的logistic回归分析

2.3 不同Hp感染状态下IL-6-174基因型与低HDL水平的相关性

通过logistic回归模型调整相关混杂因素后，结果显示Hp+患者中，CC基因型与低HDL水平相关(P<0.05)，见表3。

表3 不同Hp感染状态下IL-6-174基因型与低HDL水平的logistic回归分析

2.4 不同IL-6-174基因型下Hp感染与低HDL水平的相关性

通过logistic回归模型调整相关混杂因素后，结果显示CC基因型患者中，Hp+与低HDL水平相关(P<0.05)，见表4。

表4 不同IL-6-174基因型下Hp感染状态与低HDL水平的logistic回归分析

3 讨 论

因胃动力障碍引起的消化不良主要分为器质性消化不良(因某种器官病变-如肝病、胆道等引起的症状)和功能性消化不良[2]，临床上对消化不良患者行消化道内镜、肝胆胰影像学及生化检查判断检查结果有无明显异常以便对症治疗；对于无明显异常的患者及功能性消化不良患者，继续进行Hp检测(若为Hp+则行根除治疗)[13-14]。考虑Hp感染后机体非特异炎性反应会伴随着细胞因子、炎性介质参与[15]，其中IL-6对机体多种细胞功能都能产生一定影响[16]，且IL-6基因启动因子多态性(174G/C、572C/G)对IL-6基因转录和表达水平产生的影响会随着机体状态的改变而变化[17]，故非常有必要对Hp感染患者IL-6基因位点多态性进行研究。有研究表明，Hp感染会引起脂质代谢异常、白细胞介素或多种黏附因子等的表达增强进而导致血脂代谢紊乱，因而其与血脂异常存在一定的关联[18-19]。而血脂异常是心血管疾病的主要风险因素[20]，同时，鉴于国内少有关于Hp感染患者IL-6-174基因多态性(GG、GC、CC)与血脂关系的研究，故本研究对此进行了分析。

本研究在对低HDL水平的影响因素进行logistic回归分析发现，Hp+是低HDL水平发生的独立影响因素。血清HDL可抵抗动脉粥样硬化，是冠心病的保护因子，其能促进消除外周组织中的胆固醇，HDL增高有利于防止动脉粥样硬化、预防冠心病，然而血清HDL水平偏低会增加冠心病发病率[6,21]。临床上血脂异常(主要是HDL偏低)的重要致病原因之一是细菌感染，Hp感染会加剧炎性细胞(中性粒细胞、单核细胞)聚集以促进肿瘤抑制因子、IL-6等细胞因子表达抑制肝脂蛋白酶活性，从而进一步增加载脂蛋白的分泌，最终使得患者血清HDL水平偏低[22-23]，这一影响机制可以总结为Hp感染后一系列炎性活动导致血脂代谢紊乱。

基于IL-6-174基因多态性(GG、GC、CC)分组分析发现，IL-6-174 CC基因型患者中Hp感染与低HDL水平明显相关，而在GG和GC基因型患者中，未发现类似相关性；且仅在Hp+患者中发现IL-6-174 CC基因型与低HDL水平相关。这些发现也可以理解为CC基因型患者Hp感染会增加低HDL水平的发生率。TSAI等[24]研究表明Hp感染及消化性溃疡与IL-6表达增强有相关性，而高血清IL-6水平与低HDL水平存在一定关联，且IL-6的表达可以减少脂蛋白脂肪酶的活性，这一活性的降低会进一步诱发血清HDL水平下降[25]，这一系列的反应最终形成IL-6和血清HDL间相互作用的一种可能机制。OBERBACH等[26]认为运动仅可能降低IL-6-174 C等位基因携带者的血清IL-6水平，同样，较IL-6-174 G等位基因携带者而言，运动结合生活方式干预可以明显增加IL-6-174 C等位基因携带者血清HDL水平[27]。此外，本研究发现IL-6-174 CC基因型Hp感染者血清HDL水平更容易呈降低趋势。基于这些结果，IL-6-174 CC基因型个体血清HDL水平异常与否很有可能在一定程度上取决于外部因素(如运动、Hp感染)。

本研究不足在于研究群体皆为老年个体，且未能对IL-6-174 CC基因型多态性与血清LDL升高关系进行分析[28]；此外，本研究大多数老年患者均无运动习惯，且所有患者在血清标本采集前2 h无任何运动，暂不清楚运动对血清HDL水平影响时效，故对该研究结果可能产生一定影响。

综上所述，Hp感染与低HDL水平有相关性，且相对IL-6-174 GG/CC基因型而言，IL-6-174 CC基因型患者Hp感染更有可能增加低HDL水平的发生率。这一结果可为临床上对Hp+个体实施以抑制IL-6释放进而降低HDL偏低发生率为目标的相关干预提供参考。