复方冰甲乳膏药效学研究*

邱 洪，李新顺，王 慧

（中国人民解放军联勤保障部队第925 医院，贵州 贵阳 550009）

复方冰甲乳膏为我院皮肤科临床经验方，系冰片、硫磺、硼砂、甲硝唑、制霉菌素等中西药结合的复方制剂［1－2］，有清热燥湿、收敛生肌功效，主要用于治疗真菌感染引起的手足癣等［3］。本课题组前期已完成了相关毒理学研究［4－5］，为验证其临床疗效，进一步对该方进行了药效学研究。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

仪器：JM－B 型电子天平（余姚市纪铭称重校验设备有限公司）；ALC－210.3 型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）；SPX－500 型生化培养箱（常州市金坛高科仪器厂）；N－300M 型生物显微镜（南京江南永新光学有限公司）。

近年来，随着增减挂钩项目的试点推广，如何在增减挂钩实施过程中降低甚至规避项目潜在风险矛盾，使项目能实现其最大效益，成为了当前决策者和执行者面临的重大挑战，同时逐渐引起学者们的关注。相关研究大都是选择某一角度分析增减挂钩在某些特定环节中的矛盾冲突，尚缺乏对增减挂项目社会风险的系统全面分析。本研究拟立足于增减挂钩项目整个过程，运用工作分解结构法（WBS）梳理增减挂钩项目各个环节可能存在的风险因素，并系统性识别增减挂钩项目可能存在的社会风险点。

试药：复方冰甲乳膏（贵阳中医学院中药制剂研究中心，批号为20150126）；硝酸咪康唑乳膏（达克宁，西安杨森制药有限公司，批号为140608107，规格为每支20 g）；复方醋酸地塞米松乳膏（皮炎平，华润三九医药股份有限公司，批号为1405021H，规格为每支20 g）；二甲苯（天津市大茂化学试剂厂，批号为20080921）；卡拉胶（角叉菜胶，上海劲马生物科技有限公司，批号为20140625）；磷酸组胺（上海源叶生物科技有限公司，批号为YY10165）；蛋白胨（上海申科昆虫生物科技开发有限公司，批号为080109）；葡萄糖（天津市科密欧化学试剂有限公司，批号为20130320）；琼脂粉（天津市致远化学试剂有限公司，批号为20140726）；马铃薯为市售。

动物：豚鼠 130 只、体质量 240 ～ 260 g，昆明小鼠60 只、体质量 18 ～ 22 g，SD 大鼠 50 只、体质量 180 ～220 g，均雌雄各半。由贵阳医学院实验动物中心提供，实验动物生产许可证号为SCXK（黔）2012－001。饲料为全价颗粒饲料，由同一单位提供。

观察指标：于给药第 1，3，7，10 天时大体观察皮损鳞屑、红斑、脓肿等感染征象，皮损部位行真菌镜检及培养，测量皮损直径，以判断皮损面积。

1.2 方法

1.2.1 体外抗真菌作用［6－7］

治愈标准：皮损处无任何感染征象，真菌镜检、培养均呈阴性。

试验时从4 ℃冰箱中取出菌株，室温放置24 h 后接种于SDA 培养基，26 ℃培养10 d 后，挑取菌落接种至 60 mL PDB 培养基中，于 26 ℃ 培养 3 ～ 5 d，取出，作为原液。再用PDA 液体培养基稀释至浓度为1 ∶100，作为试验菌液，备用。

首先，大数据能够为学生的实验理论学习以及实践学习，提供源源不断的动力。随着当前整个教育改革制度的持续推进，理工类高等院校当中的实验教学模式也在不断地发生着相应的变化，以往传统的以教师讲授为主体的教学模式，被逐渐的淘汰掉了，而更加具有灵活性、更加具有开放性的实验室教学逐渐成为主体，学生在这样的过程当中能够得到教育工作者的关注和青睐。而理工类专业的学生，在实验课程上能够更好地验证自身理论知识的掌握程度，正是凭借着良好的实验室环境以及高效的管理模式，最终也就为学生的理论学习以及实践能力培养提供了源源不断的动力。

供试品溶液制备：取样品适量，用水配制成质量浓度为100 mg／mL 的供试品溶液，装入25 mL 小锥形瓶中，70 ℃加热溶解2 min，封口，备用。

西王集团以玉米深加工和特钢为主业，拥有三家上市公司，其成长历程堪称改革开放40年中的标志性企业。其创始人王勇是全国人大代表，也在今年入选改革开放40年感动山东人物。

最低抑菌浓度（MIC）测定：取13 支干燥无菌带塞小试管，无菌操作，分别加入1 mL SDB 培养基，然后向第1 支试管加入供试品溶液液1 mL，混匀，取1 mL 加入第2 支试管内，依次类推至第11 管，制成质量浓度依次 为 50.00，25.00，12.50，6.25，3.13，1.56，0.78，0.39，0.20，0.10，0.05 mg ／mL 的系列供试品溶液，每管加入0.1mL 菌液；第12 管不加菌液，作阴性对照；第13 管加菌液，作阳性对照。置生化培养箱中培养1 周。以真菌不生长的最高药物稀释度为该药的 MIC。配制过程中每一浓度梯度完成后应更换枪头。每个质量浓度重复3 管。

1.2.4 止痒作用［10］

在基层社会治理的模式构建中有三大要素对社会治理效果发挥着重要作用，分别是基础保障性要素、创新协同性要素和工具性要素。诚然，在社区治理中对社区治理主体进行简单的分类并没有实质性的意义，在归类基础上对其结构和资源的整合以及流程的再造才是要素区分的要义。

1.2.2 抗模型豚鼠真菌感染作用［8－9］

建模、分组与给药：将80 只豚鼠背部剃毛，面积9 cm2（3 cm×3 cm），用细砂纸在剃毛部位擦拭，以出现轻微渗血为度（提高接种成功率），24 h 后用1 mL 注射器在脱毛面中心区刺入豚鼠皮肤内（以不使皮肤出血为度）注入0.1 mL 菌悬混合液（玫瑰毛癣菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌。试验前恢复其致病力并接种于PDB 培养基，26 ℃培养1 周，制备成菌悬混合液，置4 ℃冰箱保存，备用），再用棉签蘸取菌悬混合液0.2 mL 涂布于脱毛创伤部位，1 天2 次，共感染3 d，以复制感染模型。豚鼠脱毛接种区皮肤出现红斑、丘疹及水疱，且真菌镜检及培养均为阳性为模型复制成功。于感染模型复制成功后第2 天随机分为模型组（A 组），复方冰甲乳膏高、中、低剂量组（B1组、B2组、B3组 ），阳性对照（达克宁）组 （C组），各 10 只。B1组、B2组、B3组用棉签取称量好的相应药物均匀涂抹于豚鼠皮损部位，剂量分别为0，0.70，0.35，0.18，0.70 g ／kg （后续试验中大鼠给药剂量同）连续涂药10 d，1 天1 次。模型组给予赋形剂，以下试验同。

菌株：玫瑰毛癣菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌，均购于中国医学科学院皮肤病研究所。

培养基制备：1）SDA 培养基，称取葡萄糖 40.0 g，蛋白胨 10.0 g，琼脂粉 20.0 g，加水定容至 1 000 mL，并用玻璃棒不断搅拌，使各成分溶解，然后煮沸1 min。115 ℃、高压灭菌 20 min，备用。2）沙氏葡萄糖液体（SDB）培养基，除不加琼脂粉外，其余制备方法同1）。3）马铃薯葡萄糖液体（PDB）培养基：称取马铃薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨5 g，水1 000 mL。马铃薯去皮及芽，加水煮烂（能被玻璃棒戳破即可），3 层纱布过滤。加葡萄糖、蛋白胨、蒸馏水，分装6 个三角瓶，加塞，包扎，121 ℃灭菌20 min，即得，备用。

杨春梅和郑岩在研究我国促进技术创新的相关财税政策中发现，当前，我国的财税政策之间缺乏联系，各个税种之间内在联系不紧密，一些新出台的政策和旧政策之间的衔接也不紧密、协调性差[9]。如中央和地方之间财税激励政策之间衔接的不紧密，上下不统一问题。如中发〔2015〕8号和国发〔2016〕16号等“新政”中提出取消科技成果“审批或备案”环节，给予企业、科研院所等更多自主权。但一系配套制度并未做出相应调整，导致财税激励政策上下联动受限，也给企业申报设置了不小障碍。

首先打开Shadow 数据属性表，选中值为 1的栅格，再选择 [转换工具][由栅格转出][栅格转面]工具，打开工具对话框，完成矢量转换，如图11。

对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的作用：将昆明小鼠随机分为模型组（A 组），复方冰甲乳膏高、中、低剂量组（B1组、B2组、B3组），阳性药（皮炎平）组 （C 组），各 12只。按前述方法用棉签取称量好的相应药物均匀涂抹于小鼠耳朵两面，连续涂药7 d，1 天1 次，剂量分别为0，1.00，0.50，0.25，1.00 g ／kg。第 7 天末次涂药 1 h 后，以水洗去膏药，用干棉球擦净。用二甲苯原液0.03 mL 涂于小鼠左耳前后两面，致炎40 min 后处死，剪取左右两耳，用直径8 mm 的打孔器于相同部位打取左右耳耳片，精密称定质量，以左右耳耳片质量之差为小鼠耳肿胀度，并计算小鼠耳肿抑制率。

真菌悬液制备：从保存菌种斜面上各挑取菌苔（玫瑰毛癣菌、絮状表皮癣菌、犬小孢子菌），分别接种至60 mL PDB 培养基中，于 26 ℃培养 3 ～ 5 d，取出，作为原液。再用PDB 培养基稀释至浓度为1 ∶100，作为试验菌液。

抑制率（%）＝（模型组耳肿胀度－给药组耳肿胀度）／模型组耳肿胀度×100%

对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的作用：将SD 大鼠随机分为模型组（A 组），复方冰甲乳膏高、中、低剂量组（B1组、B2组、B3组），阳性药（皮炎平）组 （C 组），各 10只。按前述方法用棉签取称量好的相应药物均匀涂抹于大鼠右后肢足跖处，连续涂药7 d，1 天1 次，第7 天末次涂药1 h 后，以水洗去膏药，用干棉球擦净。在大鼠右后肢足跖皮下注射1%角叉菜胶0.1 mL，分别于致炎后1，3，4，5，7 h 时用游标卡尺测量大鼠后肢左右足趾厚度，以左右足趾厚度的差值为肿胀度。

最低杀菌浓度（MBC）测定：取抑菌试验结果中透明的各试管，再依次取出不生长真菌的供试品溶液培养物0.1 mL，分别移至SDA 培养基中，用涂布棒均匀涂布，倒置于培养箱中，26 ℃培养1 周，以不生长真菌的最高稀释度为该药的 MBC。重复试验3 次。

将50 只豚鼠随机分为模型组（A 组），复方冰甲乳膏高、中、低剂量组（B1，B2，B3组），阳性药（皮炎平）组（C 组），各10 只。试验前，各组豚鼠于右后足脱毛约1 cm×2 cm。第2 天，在右后足背脱毛区皮肤面涂药，按前述方法用棉签取称量好的相应药物均匀涂抹，连续涂药7 d，1 天1 次。第7 次涂药前，用粗砂纸擦伤豚鼠右后足背脱毛处，面积约1 cm2。在擦伤处再按上述所示涂第7 次药，于末次涂药 10 min 后在擦伤处滴 0.01% 磷酸组胺0.05 mL，观察豚鼠回头舔右后足擦伤处反应，若豚鼠无此反应，可每隔3 min 重复滴药，直至豚鼠出现该反应为止，以最后出现该反应时的磷酸组胺总量为致痒阈。

1.3 统计学处理

1.2.3 抗炎作用［8－10］

待两组患者建立静脉输液通道后，对其进行诱导麻醉，给予患者标准剂量的咪达唑仑、舒芬太尼，静脉注射依托咪酯，而后检查患者睫毛放射和意识是否已经消失。对照组接受苯磺顺阿曲库铵（江苏恒瑞医药股份；国药准字H20060869；规格：10 mg）静脉注射，剂量使用如下：0.12 mg/kg；观察组患者接受罗库溴铵（荷兰欧加农；国药准字H20130486；规格：5 mL：50 mg）静脉注射，使用剂量如下：0.5 mg/kg。待肌松药给药后，对两组患者行气管插管和机械通气，并给予患者0.15%七氟烷气体以维持患者处于深度麻醉。

2 结果

2.1 体外抗真菌作用

结果见表1。可见，絮状表皮癣菌、玫瑰毛癣菌对复方冰甲乳膏较敏感，MIC 均为 3.13 mg／mL，而犬小孢子菌的 MIC 为6.25 mg／mL；絮状表皮癣菌、犬小孢子菌、玫瑰毛癣菌的 MBC 分别为 3.13，6.25，50 mg ／mL。

2.2 抗豚鼠真菌感染作用

用药第1 天时，各组皮损处出现红斑，直径约7 mm，伴有鳞屑、脓肿等感染征象，皮损部位镜检可见真菌。复方冰甲乳膏高、中、低剂量组及阳性对照组于治疗第7 天时，皮损感染症状已明显好转，红斑直径明显缩小，鳞屑已消失，至治疗第10 天时，部分皮损感染现象已消失，真菌镜检及培养均为阴性，且复方冰甲乳膏存在一定的剂量依赖性，高、中、低剂量组治疗率分别为70%，50%，40%（阳性对照组为80%）。模型组病变部位至第7 天时持续加重，之后逐渐好转，但未见痊愈。试验组与模型组比较，差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。详见表2。

有些教师的确是拒绝、惧怕课改的，他们希望按照多年不变的方法教语文，既省力又省心，所以对新的理念和方法本能地有排斥心理。但绝大多数还是欢迎课改的，他们的困惑反映课改出了问题。毫无疑问，课改以后的语文课，出现许多非常好的变化：学生的地位突出了，教学方法丰富了，教学手段改进了，课堂空间拓展了。但一些不正常的理念也开始滋生，一些畸形的课堂教学观开始蔓延。

表1 复方冰甲乳膏体外抗真菌作用Tab.1 Effect of Compound Bingjia Cream against fungal in vitro

表2 复方冰甲乳膏对模型豚鼠皮损直径的影响（，mm，n ＝ 10）Tab.2 Effect of Compound Bingjia Cream on the lesion diameter of guinea pigs（，mm，n ＝ 10）

表2 复方冰甲乳膏对模型豚鼠皮损直径的影响（，mm，n ＝ 10）Tab.2 Effect of Compound Bingjia Cream on the lesion diameter of guinea pigs（，mm，n ＝ 10）

注：与模型组比较，*P ＜0.05，**P ＜0.01。表 3 至表 5 同。Note：Compared with those in the model group，* P ＜ 0.05，** P ＜0.01，as well as Tab.3，Tab.4 and Tab.5.

组别A 组B1 组B2 组B3 组C 组剂量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70治疗后1 d 7.43 ±0.70 7.28 ±0.64**7.18 ±0.79**7.31 ±0.84**7.31 ±0.85治疗后3 d 10.21 ±1.08 6.63 ±0.65**6.92 ±0.59**7.55 ±0.90**6.79 ±0.77治疗后7 d 10.85 ±0.64 4.15 ±0.91**4.71 ±0.96**5.72 ±1.68**3.68 ±0.94治疗后10 d 8.34±2.14 0.93±1.52**1.96±2.10**2.32±2.09**0.56±1.19

2.3 抗炎作用

与模型组比较，各给药组小鼠耳廓肿胀度均明显减轻（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。详见表 3。大鼠足跖皮下注射角叉菜胶后3 h 内足趾肿胀度持续升高，之后开始降低。而各给药组足跖肿胀度的增加均受到抑制，尤其是复方冰甲乳膏高剂量组，除致炎后5 h 外，其余各个时间点足跖肿胀度与模型组比较均明显减轻（P ＜0.05，P ＜ 0.01）。详见表 4。

2.4 止痒作用

与模型组比较，各给药组大鼠的致痒阈均明显升高（P ＜0.05，P ＜0.01）。详见表 5。

表3 复方冰甲乳膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度的影响（，n ＝ 12）Tab.3 Effect of Compound Bingjia Cream on auricle swelling induced by xylene in mice（，n ＝ 12）

表3 复方冰甲乳膏对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度的影响（，n ＝ 12）Tab.3 Effect of Compound Bingjia Cream on auricle swelling induced by xylene in mice（，n ＝ 12）

组别A 组B1 组B2 组B3 组C 组剂量（g ／kg）0 1.00 0.50 0.25 1.00耳肿胀度（mg）19.60 ± 4.60 13.90 ± 2.90**16.60 ± 2.70**15.60 ± 3.50**12.80 ± 3.10耳肿胀抑制率（%）29.08 15.31 20.41 34.69

表4 复方冰甲乳膏对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀度的影响（，mm，n ＝ 10）Tab.4 Effect of Compound Bingjia Cream on paw swelling induced by carrageenan in rats（，mm，n ＝ 10）

表4 复方冰甲乳膏对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀度的影响（，mm，n ＝ 10）Tab.4 Effect of Compound Bingjia Cream on paw swelling induced by carrageenan in rats（，mm，n ＝ 10）

组别A 组B1 组B2 组B3 组C 组剂量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70治疗后1 h 1.52 ±0.45 0.97 ±0.36**1.07 ±0.52*1.25 ±0.75 1.00 ±0.54*治疗后3 h 2.14 ±0.32 1.51 ±0.28**1.58 ±0.31**1.66±0.96 1.52 ±0.48**治疗后4 h 1.87 ±0.256 1.57 ±0.55*1.47 ±0.76 1.68±0.85 1.60 ±0.32*治疗后5 h 1.60 ±0.27 1.40 ±0.32 1.35 ±0.51 1.42±0.83 1.46 ±0.24治疗后7 h 1.26 ±0.38 0.87 ±0.29*0.90 ±0.51*1.28±0.57 1.09 ±0.73

表5 复方冰甲乳膏对模型大鼠致痒阈的影响（，μg，n ＝10）Tab.5 Effect of Compound Bingjia Cream on itch thxeshold in model rats（，μg，n ＝ 10）

表5 复方冰甲乳膏对模型大鼠致痒阈的影响（，μg，n ＝10）Tab.5 Effect of Compound Bingjia Cream on itch thxeshold in model rats（，μg，n ＝ 10）

组别A 组B1 组B2 组B3 组C 组剂量（g／kg）0 0.70 0.35 0.18 0.70致痒阈9.50 ± 5.00 26.50 ± 7.00**23.00 ± 9.80**16.50 ± 9.70**19.00 ± 12.60

3 讨论

复方冰甲乳膏为中西药复方制剂，用于真菌感染引起的手足癣、股癣等的治疗。本研究结果显示，复方冰甲乳膏体外有抑菌和杀菌作用；杀菌效果絮状表皮癣菌优于犬小孢子菌，犬小孢子菌优于玫瑰毛癣菌；高、中、低剂量复方冰甲乳膏能明显缩小真菌感染豚鼠皮损直径，并使皮损外观症状好转或消失，明显升高治愈率；能显著抑制二甲苯导致的小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶诱发的大鼠足肿胀；能明显提高磷酸组胺致痒模型豚鼠的致痒阈。

综上所述，复方冰甲乳膏可通过体内、体外抗真菌、抗炎和止痒共同发挥治疗手足癣的作用。本研究为复方冰甲乳膏的临床使用提供了实验室依据。