一种多通道荧光免疫分析仪的设计*

2021-06-28余元骏周利茗高利宏

中国药业 2021年12期

余元骏，赵荻，周利茗，高利宏 △

（1. 重庆市药品技术审评认证中心，重庆 401120； 2. 重庆市食品药品检验检测研究院，重庆 401120）

免疫层析技术（ICA）是将免疫技术和色谱层析技术相结合的分析方法，具有特异性强、操作简单、快速等特点［1－3］。荧光免疫分析仪用于人体的血清、血浆、全血、尿液样本的检测，其结果多作为心肌损伤、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心血管炎症、静脉血栓栓塞、常规炎症、细菌／病毒感染、急慢性肾病等疾病的辅助诊断依据［4－8］。目前，已上市的荧光分析仪器多为单通道设备，无法实现单样本多项目的同时检测，效率低、速度慢，当样本量较大时，难满足检测需求。且现有多通道荧光分析仪多采用转盘式结构，其结构复杂，可靠性差，测量结果准确性和稳定性较差。由于转盘式结构固有的缺陷，易造成进卡失败，分析仪因卡顿而死机，试剂卡翻转、卡死，转盘转动时，试剂卡易偏移，影响测量的重复性；试剂卡和光源相对运动，造成测量结果的准确性和稳定性较差等。鉴于此，本研究中设计出一种新型多通道荧光免疫分析仪，其采用一体化设计，使用医用适配器供电，可在保证光路检测系统稳定的情况下，同时满足多个检测试剂卡检测的高通量需求，提高处理效率。现报道如下。

1 系统设计方案

1.1 机械结构［9－12］

整个机械部分由试剂卡放置结构、扫描检测结构及导轨结构组成。目前设计16 个通道（见图1），采用双层结构模式，每层有8 个通道（见图2），每层都包含上述3 个部分。可根据需要添加通道数，相比于现有多通道模式，在扩展性上更灵活。

图1 设备样机示意图Fig.1 Diagrammatic sketch of analyzer prototype

图2 机械设计结构Fig.2 Structure model of mechanical design

试剂卡放置结构：用于安放待测试剂卡样本，采用插卡模式。在试剂卡放置结构末端放置反射式光电收发管，用于监测该卡槽是否有待测样本，或试剂卡是否安放到位。卡槽底部放置弹簧片，用于固定试剂卡，防止振动或其他因素造成的检测过程中试剂卡偏移。整层试剂卡放置结构的底部放置硅胶加热片，用于检测前孵育插拔模式放置，试剂卡水平放置，可避免转盘式离心运动造成的偏差。该检测模式下，试剂卡放置到位后静置不动，通道扫描检测结构运动，避免转盘式相对运动造成的偏差。每个通道上均配1 个状态指示灯（见图1），用于指示测试状态。

扫描检测结构：由步进电机、限位开关及采集转换电路安放结构组成。步进电机用于带动采集转换电路装置，检测荧光强度。安放结构上存在2 个孔位用于放置激发光源及光电接收管，后者内部放置650 nm 波长红光窄带滤光片，用于消除背景光的干扰。机构的前端安放有轻触限位开关，上电时或通道扫描时，主机通过该限位开关确定起始位置。

导轨结构：每层的导轨结构均是采用步进电机加皮带方式，可实现对该层8 个通道的横向逐个检测。由于每层导轨结构独立，每层检测过程也相对独立，故在检测效率上高于相同通道数的转盘式设计。

1.2 电路

包含数据采集转换电路和检测控制电路两大模块。整个电路的数据通信采用485 总线方式，包括两大电路模块间的通讯及两者与上位机软件的通讯。

采集转换电路：包括荧光收发电路、放大滤波电路和模拟数字（AD）采集电路。荧光收发电路的激发光源为365 nm 波长紫外发光二极管，荧光接收传感器为硅光敏二极管。采用多级滤波放大电路预处理硅光敏二极管输出的光电信号，放大滤波电路见图3，根据输入信号的幅值、AD 基准电压及扫描电机转数，采用放大倍数为20 倍，低通滤波器的截止频率为10 Hz。AD 电路采用自带有24 位高精度模拟数字转换器（ADC）的单片机（C8051F340 型）。因此，可实现ADC 转换及中值滤波法对AD 数据预处理，同时实现对光敏二极管的亮度及开关控制，同检测控制电路的通讯，同上位机软件的通讯。采集转换电路模块见图4。

检测控制电路：由电源管理电路、电机控制电路、孵育控制电路、状态检测电路及工控板控制电路组成。电源管理电路用于实现直流－直流（DC－DC）电平转换，可满足不同功能模块或IC 对电平幅度的要求。电机控制电路的电机驱动芯片采用两相步进电机驱动芯片（安森美 STK682－010－E 型），内部集成了细分、电流调节、互补金属氧化物半导体（CMOS）功率放大等电路，配合简单的外围电路即可实现高性能、多细分、大电流的驱动电路，具有低成本、低振动、小噪声、高速度的特点。孵育控制电路包含温度采集及加热控制两部分，硅胶加热片的温度采集传感器采用高精度的PT1000 型，通过比例－积分－微分（PID）控制算法实现对所需孵育温度的精准控制。状态检测电路主要用于检测试剂卡是否安放到位及通道检测完成情况。工控板控制电路主要用于保证设备通电或断电时工控板电脑的正常开关机，避免异常关机可能造成的系统崩溃或硬盘损坏。详见图5 和图6。

图3 放大滤波电路Fig.3 Amplifying and filtering circuit

图4 采集转换电路模块实物Fig.4 The real object of the acquisition and conversion circuit module

图5 关机控制流程Fig.5 Flow chart of shutdown control

1.3 工控板及显示屏

采用工控板及电容显示屏作为算法、人机交互界面及数据存储打印的载体。相比于商用主板，工控板在尺寸设计、稳定性、抗干扰、工作环境等方面更优。液晶屏采用 12.1电容式触摸屏。目前大部分荧光免疫设备均配有1 个数据ID 卡，用于存储批次信息及校准曲线等参数。ID 卡内部参数须根据每批试剂卡的情况进行更新，否则易导致检测结果不准确。同时，目前市面上设备ID 卡存储方式采用 EEPROM 或FLASH 存储，数据存在丢失或易被篡改等风险。故在工控板内置1 个4G的模块接口，需要时，厂商或服务商可通过4G 网络，从公司本部或服务商数据中心的服务端口，采用短信模式，先激活设备与数据中心的网络连接，然后通过TCP／IP模式，实现每批次参数的及时更新，操作更简便。