一种新的菜瓜农药残留检测方法的建立及应用

曹红娣

（常州市金坛区种植业技术推广中心，常州 213200）

菜瓜是葫芦科黄瓜属甜瓜种的一个变种，为夏秋季节重要的果菜，生食酥脆，汁水丰盈，风味独特，是很好的消暑解渴瓜果。菜瓜是一种爬地栽培的瓜果，生长极为迅速，田间枝繁叶茂、不透气，易出现病虫害，故在其种植过程中常需施用农药进行病虫害防治。施用农药虽然可有效防治病虫害，但也给菜瓜带来了农药残留。因此，快速、准确地测定菜瓜中的农药残留具有重要意义。同时，由于菜瓜样品中含有一些糖、脂肪、色素等内源性大分子杂质，在经过QuEChERS前处理后可能还有残留，这会对目标物的测定造成干扰。而凝胶渗透色谱（GPC）是基于体积排阻的分离原理，能有效去除大分子杂质干扰物，降低样品基质带来的背景影响[1]。为此，笔者拟采用QuEChERS分散固相萃取、乙腈提取、大体积进样，再经GPC净化后与GCMS仪器联用实现自动化检测，建立一种新的、可同时测定菜瓜中9种农药残留的检测方法。现将相关研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验仪器与试剂

实验仪器：在线凝胶渗透色谱-气相色谱质谱联用仪GPC-GCMS-TQ8040（日本岛津公司），氮气吹干仪（美国organomation公司），电子天平（余姚金诺天平），冷冻离心机（德国eppendorf公司），高速冷冻离心机（美国Thermo公司），微型漩涡混合仪（金坛顶新），高速组织匀浆机（德国IKA公司）。

实验试剂：乙腈、丙酮和环己烷（均为色谱纯，上海安谱），提取包（内含4 g硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸氢二钠，上海安谱），净化管（内含900 mg硫酸镁和150 mg PSA，上海安谱），9种农药（乙烯菌核利、毒死蜱、三唑酮、水胺硫磷、腐霉利、三唑磷、异菌脲、甲氰菊酯、氰戊菊酯）标准溶液[浓度为1 000 mg/L，购于农业农村部环境质量监督检验测试中心(天津) ]，检测样品来源于江苏省常州市金坛区各乡镇生产基地。

1.2 实验方法

1.2.1 样品的前处理

称取10.00 g匀浆过的样品，放入50 mL塑料离心管中，加入10 mL乙腈、提取包，旋上离心管盖，剧烈震荡1 min后于4 200 r/min下离心5 min，吸取上清液到净化管中，涡旋混匀1 min，于4 200 r/min下离心5 min，吸取上清液过0.22 μm微孔滤膜，用于色谱-质谱测定。

1.2.2 标准溶液的配制

混合标准中间溶液的配制：分别移取9种标准溶液，用丙酮稀释配成10 mg/L的混合标准中间溶液。

基质混合标准工作溶液的配制：分别移取混合标准中间溶液，用丙酮逐级稀释配成5、10、50、100、500μg/L的混合标准工作溶液。按1.2.1样品的前处理方法得到的菜瓜基质溶液，经氮气吹干，分别加入1 mL上述混合标准工作溶液复溶，过微孔滤膜，得到5、10、50、100、500μg/L的系列菜瓜基质混合标准工作溶液（该溶液现配现用）。

1.2.3 仪器实验条件

GPC条件：CLNpak EV-200凝胶渗透色谱柱（2 mm×150 mm）；紫外检测，波长为210 nm；流动相为丙酮∶环己烷混合溶液（3∶7），流速为0.1 mL/min，进样量为20 μL。

色谱条件：惰性熔融石英毛细管柱（5 m×0.53 mm），DB-5 ms预柱（5 m×0.25 mm×0.25 μm），DB-5 ms分析柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；载气为氦气（纯度99.999%），恒线速度模式，流速为1.75 mL/min；柱温箱升温程序为初始温度82.0 ℃，保持5.0 min，以8.0 ℃/min的速度升到300.0 ℃，保持7.75 min，分析时间约40.0 min；PTV进样口升温程序为初始温度120 ℃，保持5 min，以100 ℃/min迅速升温到250 ℃，保持33.7 min，不分流进样。

质谱条件：电子轰击电离源EI，碰撞能量为70 eV；碰撞气为氩气（纯度99.999%）；离子源温度为230 ℃，接口温度为300 ℃；溶剂延迟时间为9 min；采集方式为MRM。

2 结果与分析

2.1 新检测方法的线性关系、检出限和定量限

对5～500 μg/L的基质混合标准工作溶液进行测定，采用1.2.3的实验条件进行分析，以得到的各农药残留对应的定量离子的色谱峰面积为纵坐标（y），以对应的各农药残留的浓度为横坐标（x），绘制标准曲线，获得线性关系。由表1可知，9种农药在5～500 μg/L范围内呈线性关系，相关系数（r）在0.999 0～0.999 9之间。以样品中组分在仪器上产生的3倍信噪比（S/N）所对应的组分浓度为本方法的检出限（LOD），9种农药的检出限（LOD）为0.08～0.53 μg/L；以样品中组分在仪器上产生的10倍信噪比（S/N）所对应的组分浓度为本方法的定量限（LOQ），9种农药的定量限（LOQ）为0.25～1.78 μg/L。

表1 9种农药的线性方程、相关系数、检出限和定量限

2.2 添加回收试验

称取菜瓜样品6份，添加5个水平的混合标准溶液，每个水平重复6次，进行回收率和精密度测定。样品采用1.2.2的方法进行前处理，按1.2.3的实验条件进行分析。由表2可知，在样品中添加5个水平后，9种农药的回收率在71%～103%之间，精密度在1.8%～7.5%之间。

表2 菜瓜样品中添加5个浓度水平后9种农药的回收率和精密度(n=6)

2.3 新测定方法的具体应用

在金坛区各乡镇基地随机抽检菜瓜样品30份，按照1.2的实验方法进行处理测定，上述9种农药均未检出。

3 结 论

采用在线凝胶渗透色谱-气相色谱质谱联用仪，按照GB 23200.113-2018中QuEChERS前处理法，建立了一种新的菜瓜农药残留检测方法。采用该检测方法可同时测定菜瓜中9种常见农药的残留，结果表明，9种农药在5～500 μg/L范围内呈现出良好的线性关系，回收率和精密度均能满足测定的要求。该检测方法操作简便、快速、准度高，适合菜瓜中9种农药残留的同时测定。