尿蛋白三种定性检测方法的对比分析
2021-06-20王金娜贺红艳
王 青 王金娜 何 雪 刘 静 贺红艳
(西安医学院医学技术学院,陕西 西安 710021)
尿液蛋白质的定性检测是尿液常规检测必做项目之一,能够有效反映肾脏的功能状态,可作为泌尿系统疾病的筛选指标[1]。血浆中小相对分子量(<40 000)蛋白能顺利通过肾小球的滤过膜并被重吸收,由于其血浆中浓度较低,最终仅有少量蛋白出现在尿液中。白蛋白等中相对分子量的蛋白在血浆中浓度较高,绝大部分血浆白蛋白在通过滤过膜后都被肾小管重吸收,高相对分子量(>90 000)蛋白很难通过正常的肾小球滤过膜。一般常规方法无法检出[2]。随着医疗水平和人民健康意识的增强,人们对检测结果的准确性,可靠性要求更高[3]。如何合理选择检测方法是检验工作者必须认真思考的问题。该实验同时使用三种方法检测同一尿液标本,比较三种方法结果的差异,并从原理进行探讨分析。
1 材料与方法
1.1 标本
连续7 d随机收集住院病人尿液标本500例,并于2 h内检验完成。
1.2 试剂与器材
尿液分析仪,酒精灯,5%醋酸溶液,10%磺基水杨酸。
1.3 方法
(1)干化学法。确保仪器状态良好、质控结果在控后,严格按照试纸条和仪器使用说明进行操作,仪器自动打印结果。
(2)磺基水杨酸法。留取离心后上清尿液2 mL于小试管中,滴加10%磺柳酸试剂1~2滴,观察尿液浑浊度变化、有无沉淀生成,判读并记录结果。
(3)加热乙酸法。向玻璃试管加入尿液8 mL约占试管的2/3,试管夹持试管底部,试管呈60°倾斜,管口朝外,将尿液上端部分置于火焰上方加热煮沸,以小滴管加入2~3滴醋酸溶液后,观察有无浑浊,继续加热至沸,判读并记录结果。
1.4 统计学处理
对比干化学法、加热乙酸法,磺基水杨酸法三种方法的阳性率,计数资料以百分率表示。并将磺基水杨酸法作为参考方法,计算干化学法和加热乙酸法的灵敏度、特异度。
2 结果
对500例尿标本同时用三种蛋白定性方法进行检测。磺基水杨酸法蛋白阳性117例,阳性率23.40%;干化学法蛋白阳性161例,阳性率32.20%,加热乙酸法蛋白阳性111例,阳性率22.20 %。见表1。干化学法的假阳性率、真阳性率高于加热乙酸法,假阴性率、真阴性率低于加热乙酸法。见表2、表3。
表1 三种蛋白检测方法阳性率比较
表2 磺基水杨酸法(设为参考方法),干化学法、加热乙酸法检验结果比较
表3 干化学法、加热乙酸法评价指标的比较
3 讨论
尿液干化学法方便快捷,成本低,是临床实验室最常用的筛选方法[4]。但由于检测原理的局限,影响因素较多,如pH过高、阴道分泌物的污染、色素、部分盐类或标本含有较多细胞成分时,干化学法检测可引起假阳性。加热乙酸法中加入乙酸可使尿液pH下降到蛋白质等电点,从而促进蛋白质变性沉淀,并可消除尿液中某些磷酸盐受热析出结晶,进而避免混浊的干扰,结果准确,可作为蛋白质定性实验的确证实验,但当尿呈强碱性时,加热乙酸法呈假阴性反应。磺基水杨酸法操作便捷,敏感度较高。易受干扰因素影响,造成假性结果。
本实验对比了三种尿蛋白定性检测方法检测结果的差异,发现干化学法的假阳性率(误诊率)、真阳性率(灵敏度)高于加热乙酸法,假阴性率、真阴性率低于加热乙酸法,假阴性率(漏诊率)、真阴性率(特异度)低于加热乙酸法。林荣万[5]等研究尿蛋白三种检验方法比较结果显示,干化学法阳性率最高,为31.33%,且灵敏度较高,但误诊率较高,加热
乙酸法特异度最高,三种方法各有优缺点,应综合分析,慎重选择检测方法,与本研究结果相符。
综上所述,三种方法各有优缺点,相辅相成,在临床工作中应全面分析,合理选择,特别是要注重干扰因素的影响,从而降低方法学所带来的假阳性率和假阴性率。