乳黄消口服液治疗奶牛乳房炎的临床疗效观察

白东东，李新圃，杨 峰，罗金印，王旭荣，张 行，李宏胜

(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室，甘肃 兰州 730050)

奶牛乳房炎是奶牛场最常见的内科病之一，往往由环境、自身机体和病原菌三方面因素综合导致，它不仅可以使牛奶产量、质量下降[1]，治疗成本提高[2]，还可以导致患病奶牛的死亡[3]。目前奶牛场对于奶牛乳房炎的治疗方法仍以抗生素为主，但其因耐药性的问题受到了一定的限制。中兽药与抗生素相比，因其毒性低、残留量少、疗效确切等已成为国内外学者关注的焦点[4-5]。

乳黄消口服液是兰州畜牧与兽药研究所奶牛疾病创新团队研制的专用于治疗热毒壅盛型奶牛乳房炎的一种新型中兽药，在前期的药效学试验中已经证明其具有滋阴泻火、消肿止痛和扶正祛邪的功效，故本试验观察该药物对奶牛乳房炎的临床疗效，为后期正式临床试验提供数据参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 中药药液 乳黄消口服液由知母、丹参、连翘等10味药组成，其药材均购自兰州市黄河药材市场。取药材共5 kg，第1次加入4 L自来水，煎煮2 h， 过滤后药渣再加入3 L自来水，煎煮1 h，过滤后药渣再加3 L自来水，煎煮1 h，纱布过滤后3次滤液合并，将其浓缩至1 g/mL。

1.1.2 试验动物 正在泌乳期的健康奶牛和患有临床型奶牛乳房炎的奶牛，由甘肃省荷斯坦奶牛繁育中心提供。

1.1.3 仪器与设备 BC-2800vet兽用全自动血液细胞分析仪，购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司；XL-640全自动生化分析仪，购自Erba公司；J6-HC高速冷冻离心机，购自Backman公司；生化试剂盒，购自美康生物科技股份有限公司；Fossomatic 7，购自FOSS公司；HH-2数显恒温水浴锅，购自常州智博瑞仪器制造有限公司；公英散，购自河北宝典药业有限公司。

1.2 方法

1.2.1 动物的选择 纳入标准：年龄3～9岁，2～8胎次，处于泌乳期的奶牛，无传染病史，产前、产后无并发症，无全身症状，乳汁中有絮状物，颜色微黄或黄，乳房肿大或无，体温不超过40 ℃；排除标准：不在泌乳期的奶牛，或在泌乳期患有子宫内膜炎、胎衣不下、急性产后腹泻、蹄病、急性乳房炎、慢性乳房炎、隐性乳房炎等疾病和体温超过40 ℃的奶牛排除；剔除标准：试验期间，对受试奶牛进行抗炎或抗生素治疗措施、做过真胃移位手术或发生过蹄病以及意外死亡淘汰等情况，其试验结果均排除在外。

1.2.2 动物的分组 将纳入试验的40头患病奶牛随机分为4组，每组10头，即乳黄消口服液高剂量组(1 500 mL/头)、中剂量组(1 000 mL/头)、低剂量组(500 mL/头)和对照药物组(公英散)，健康组奶牛10头。

1.2.3 检测指标 一般观察：试验期间，每天下午观察各组奶牛的精神状态，采食饮水情况，乳房肿胀情况以及乳汁颜色。血常规检测：各组奶牛在治疗前、后尾静脉采血，全自动血细胞分析仪测定白细胞(White blood cell，WBC)、红细胞(Red blood cell，RBC)、血红蛋白(Hemoglobin，HGB)、红细胞压积(Red blood cell specific volume,HCT)和血小板(Blood platelet,PLT)等含量。血生化指标检测：尾静脉采血后，静置离心分离血清，测定其血清中总胆红素(Total bilirubin,TBIL)、白蛋白(Albumin,ALB)、谷丙转氨酶(Alkaline aminotransferase，ALT)、天冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferase，AST)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatise,ALP)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase，LDH)、肌酸激酶(Creatine kinase,CK)、尿素(UREA)和肌酐(Creatinine，CRE)。

乳汁中体细胞检测方法：首先在测定乳汁中体细胞前先将样品放置于39～42 ℃的水浴锅10～15 min(不可放置太久或重复加热)，颠倒几次样品使之混合均匀(切勿剧烈晃动)，然后将样品放置到Fossomatic 7传送带上搅拌器右侧，样品的处理确保是以相同方式进行，点击开始测定，收集数据。

1.2.4 临床疗效判断 有效：治疗后，患牛乳房红肿、硬结和热胀感明显减轻，乳汁水样或絮状沉淀减少或消失，奶产量有所增加；治愈：治疗后，患牛乳房红肿、硬结、热感消失，奶样外观、采食量、奶产量和精神恢复正常；无效：治疗后，患牛乳房临床症状未改善或情况恶化，放弃本中药治疗而用其他方法治疗。

1.2.5 数据处理 应用SPSS 20.0软件对各组数据进行单因素方差分析，结果用平均数±标准差表示。

2 结果

2.1 乳黄消口服液临床诊疗效果统计 对受试奶牛的临床具体情况进行统计分析，经统计观察，纳入的受试奶牛均未剔除，即受试奶牛的统计数据均可靠。从表1可以得出，乳黄消口服液高、中、低剂量组对奶牛乳房炎治愈率分别为70%、90%和60%，对照药物组治愈率为50%。

表1 乳黄消口服液和公英散治疗临床型奶牛乳房炎临床效果统计Table 1 Statistics on the clinical effects of Ruhuangxiao oral liquid and Gongyingsan in the treatment of clinical bovine mastitis

2.2 给药后患病奶牛血液生理指标的变化 对患病奶牛连续治疗3～5 d后，经统计分析发现，乳黄消口服液高、中、低剂量组和对照药物组的血液生理指标与健康组相比差异均不显著(P>0.05)，见表2。说明乳黄消口服液对受试奶牛的血液生理指标无影响。

表2 给药前后奶牛血液生理指标参数Table 2 Blood physiological indexes of cows before and after administration

2.3 给药后患病奶牛血液生化指标的变化 对患有乳房炎的奶牛连续治疗3～5 d后，统计分析发现，与健康组相比，乳黄消口服液高、中、低剂量组和对照药物组的血液生化指标差异均不显著(P>0.05)，见表3。说明乳黄消口服液对受试奶牛的血液生化指标无影响。

表3 给药前后奶牛血液生化指标Table 3 Blood biochemical indexes of cows before and after administration

2.4 治疗后患病奶牛乳汁体细胞的变化 对各组奶牛在治疗前、治愈后和治疗第30天采集奶样，测得其乳汁中的体细胞数。经统计发现，治疗前患病奶牛乳汁中的体细胞数和健康组奶牛乳汁中的体细胞相比差异极显著(P<0.01)，虽然治疗后体细胞数明显下降，但仍与健康组乳汁的体细胞差异极显著(P<0.01)，在治疗的第30天，各组患病奶牛乳汁中体细胞数与健康组相比差异不显著(P>0.05)，且均降至20万/mL以下。见表4。

表4 治疗前后各组奶牛乳汁体细胞的变化Table 4 Changes of milk somatic cells in each group before and after treatment

3 讨论

3.1 乳黄消口服液对奶牛乳房炎的临床治疗效果 奶牛乳房炎常因畜体津液不足，阴虚火旺，而出现乳汁变黄、口干舌红、尿赤粪干、脉洪大等临床表现，故应滋阴泻火、消肿止痛，乳黄消口服液中以知母为君药，其性寒，滋阴泻火；臣以银花、连翘等清热解毒、疏风解表，以助知母清热泻火之功；佐以丹参等，活血止痛、消肿生肌；久热绕于心，则神志不清，故加远志以安神，诸药合用，可其滋阴泻火、消肿止痛的作用。现代药理学研究，知母具有抗抑郁[6]、抗炎[7-8]、增强免疫力[9]、改善高血糖[10]、糖尿病[11]等作用，金银花具有保肝减肥[12]、驱蚊虫[13]、抗高尿酸血症[14]、抗炎、抗氧化[15-16]和调节免疫[17]等的功能，连翘具有抗炎[18]、抗菌[19]、增强免疫[20]等药理作用。综上所述，从现代药理学研究角度看，乳黄消口服液中的主药有一定的抗炎、抗菌和提高免疫力的作用，这与奶牛乳房炎的致病原因密切相关，故可在临床取得很好的疗效。从治疗效果来看，因各组未治愈的奶牛临床症状均无好转，故只有用治愈率来表示临床疗效，其中乳黄消口服液高、中、低剂量组和对照药物组的治愈率分别为70%、90%、60%和50%。说明乳黄消口服液中剂量组治疗奶牛乳房炎效果最好，且各剂量组对奶牛乳房炎疗效均好于对照药物组，其中对照药公英散治疗效果与于瑞影[21]报道的治愈率97.5%有一定差距，推测可能与生产厂家、给药时间、季节以及奶牛自身状态有关。

3.2 乳黄消口服液对奶牛乳房炎血液生理生化指标的影响 乳房炎是奶牛乳房发生的炎症，而炎症必然会导致机体组织局部的红、肿、热、痛和机能障碍，表现为乳产量的下降、乳汁颜色变黄、产生絮状物、乳房局部的肿胀。为了观察纳入奶牛是否已经产生全身症状或已经引起全身症状而乳黄消口服液对其产生影响，以及药物是否对其肝肾功能产生影响，故测定治疗前、后各组奶牛的血液生理生化指标。从结果来看，患病奶牛均未出现全身症状，且给药治疗后WBC、RBC、PLT、ALB、ALT、AST、LDH、ALP、CK和CRE等与健康组无显著性差异(P>0.05)，同时表明乳黄消口服液不会影响奶牛的健康。

3.3 乳黄消口服液对患病奶牛乳汁中体细胞的影响 近年来，许多国家均已将奶牛乳汁中的体细胞数作为奶牛乳房健康的评价标准[22-24]。从给药前、后奶牛乳汁体细胞统计的结果来看，给药前患病奶牛的体细胞数与健康组差异极显著(P<0.01)，给药后患病奶牛乳汁中的体细胞数与健康组相比差异仍极显著(P<0.01)，但比治疗前有所降低，给药治疗第30天，患病奶牛乳汁中的体细胞数与健康组相比差异不显著(P>0.05)，且均低于20万/mL。说明乳黄消口服液对患病奶牛给药治疗3～5 d后，体细胞数会降低，但不会直接降至20万/mL，需要一定的时间来修复乳腺损伤。