饲喂复合营养性添加剂对蛋鸡禽流感疫苗免疫效果的影响

2021-06-17田江波马杰何俊程光胜彭晓孟怀旺

四川畜牧兽医 2021年6期

田江波，马杰，何俊，程光胜，彭晓，孟怀旺

（1.重庆优宝生物技术股份有限公司，重庆北碚 400711；2.重庆正大蛋业有限公司，重庆江北 400021）

高致病性禽流感具有发病率高和致死率高的特点，目前在我国依然存在着点状暴发。预防和控制禽流感最常用和有效的方法是接种禽流感疫苗。然而有研究表明，在免疫过程中家禽受到强应激，会降低免疫抗体水平，达不到最佳免疫效果［1］。高致病性禽流感疫苗由于其本身对蛋鸡有较大的免疫应激，导致更难达到很好的免疫效果，因此在生产过程中尤其在进行疫苗免疫时应尽量降低对动物的应激影响。有研究表明一些营养素能够起到缓解应激、增强动物免疫功能的作用，例如维生素E 和硒有较强的抗氧化性，能够提高动物体内抗氧化酶的活性，减轻机体的氧化损伤，而一些氨基酸本身是合成免疫因子的原料［2-3］。另外，一些免疫多糖例如黄芪多糖和糖萜素可以促进动物免疫器官的发育，增强免疫功能［4］。

本试验所用复合营养性添加剂富含多种维生素、氨基酸、电解质、有机微量元素、糖萜素及黄芪多糖等，能够在动物受到应激时补充抗应激营养需要，提高动物抵抗力，从而缓解应激对动物的不利影响。本文主要探究复合营养性添加剂对蛋鸡禽流感疫苗免疫效果的影响。

1 材料与方法

1.1 试验时间及地点试验于2019 年6～11 月在重庆正大青年鸡场进行。

1.2 试验材料本试验所用复合营养性添加剂包含多种维生素、氨基酸、有机微量元素、电解质、黄芪多糖、糖萜素，来自重庆优宝生物股份有限公司，批号：19032505，19060302。

重组禽流感病毒（H5＋H7亚型）三价灭活疫苗（H5N1 Re-11＋Re-12株，H7N9 H7-Re2株），批号：190 954900；鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗（La Sota 株＋F 株），批号：191174900。疫苗均来自青岛易邦生物工程有限公司。

1.3 试验设计分为两个试验进行。

1.3.1 试验一（表1）选择540 只56 日龄准备接种疫苗（禽流感）的健康罗曼蛋鸡，随机均分为3 个处理。对照组：饲喂基础日粮；处理1：从免疫前3 d 到免疫后4 d 于基础日粮中添加1 g/kg复合营养性添加剂；处理2：从免疫当天到免疫后7 d 于基础日粮中添加1 g/kg 复合营养性添加剂。

表1 试验一

1.3.2 试验二（表2）选择2 栋50 日龄健康青年蛋鸡作为试验鸡群（梯形笼养，相同日龄，每栋48 000 只）。随机选择一栋作为对照组，另外一栋作为试验组。试验组在免疫前3 d至免疫后4 d，于饮水中添加复合营养性添加剂，稀释后饮用。试验期间，蛋鸡笼养，自由采食和饮水。

表2 试验二

1.4 检测指标

1.4.1 试验一抗体水平检测：每个处理随机选择8只鸡，分别于接种疫苗前3 d和接种疫苗后2、4 周（68 d 和88 d）翅静脉采血测定HI 抗体效价。HI 抗体检测方法参照《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936-2003）标准进行。

1.4.2 试验二抗体水平检测：在免疫前4 d，免疫后第7 d、14 d、35 d，每组随机抽取60 只进行翅静脉采血，分离血清，测定禽流感HI 抗体滴度和均匀度。

1.5 数据统计分析所有数据用Excel作初步整理，试验一使用SPSS 23.0作双因素方差分析，主效应分别是时间点和不同处理；试验二使用SPSS 23.0作单因素方差分析，用Ducan法进行多重比较。

2 试验结果

2.1 试验一

2.1.1 各处理组蛋鸡免疫后的抗体滴度比较由表3可知，随着时间的增加，蛋鸡H5（Re-11）、H5（Re-12）、H9 抗体滴度均显著增加（P＜0.01）。添加复合营养性添加剂有提高H7（Re-2）抗体滴度的趋势（P＜0.01），并且在免疫前3 d～免疫后4 d使用复合营养性添加剂的效果更好。虽然各处理抗体水平差异未达到显著（P＞0.05），但是从数值上看使用添加剂组的抗体水平整体高于对照组。

表3 各处理组蛋鸡免疫后的HI平均抗体滴度（log2）

2.1.2 抗体变异系数如表4 所示，使用复合营养性添加剂后抗体变异系数降低，抗体均匀度有很好的提高。根据不同的抗体来看，在免疫前3 d～免疫后4 d 使用复合营养性添加剂，抗体均匀度更好。

表4 各处理组蛋鸡免疫后的HI抗体变异系数

2.2 试验二

2.2.1 复合营养性添加剂对H5（Re-11）抗体水平的影响由表5可知，复合营养性添加剂对H5（Re-11）抗体水平的影响无显著差异（P＞0.05）。在起始阶段，对照组的抗体效价高于试验组，但是经过处理后第2 周，处理组的抗体效价已经高于对照组。关于变异系数，处理组在开始前远远高于对照组，但是经过两周，对照组的变异系数已经高于处理组（4.7%VS0.0%）。

表5 青年鸡H5（Re-11）抗体检测结果（log2）

2.2.2 复合营养性添加剂对H5（Re-12）抗体水平的影响由表6可知，复合营养性添加剂对H5（Re-12）抗体水平的影响无显著差异（P＞0.05）。开始阶段，对照组的抗体效价高于处理组，但在第1周，处理组抗体效价反超对照组，可见复合营养性添加剂增加了抗体产生的速度。关于变异系数，饲喂复合营养性添加剂后，抗体的变异系数降低。

表6 青年鸡H5（Re-12）抗体检测结果（log2）

2.2.3 复合营养性添加剂对H7（Re-2）抗体水平的影响由表7 可知，复合营养性添加剂对H7（Re-2）抗体水平的影响无显著差异（P＞0.05）。开始阶段，对照组的H7（Re-2）抗体变异系数远远低于处理组（15.2%VS23.0%），但是经过2周后对照组的变异系数已高于处理组（4.8%VS1.7%）。

表7 青年鸡H7（Re-2）抗体检测结果（log2）

2.2.4 复合营养性添加剂对H9 抗体水平的影响由表8可知，复合营养性添加剂对H9抗体水平的影响无显著差异（P＞0.05）。刚开始两个组的变异系数一样，但是两周后，对照组高于处理组（4.1%VS0.0%），同时处理组的抗体效价也更高。

表8 青年鸡H9抗体检测结果（log2）

3 讨论

3.1 试验一结果表明在饲料中添加复合营养性添加剂对蛋鸡注射禽流感疫苗后的抗体滴度没有显著影响，但降低了变异系数，提高了抗体均匀度，有利于缩小蛋鸡群体免疫空白期。马渝等［5］研究发现，在饲料中添加0.05%复合营养性添加剂，可以显著提高42 日龄花边鸭的禽流感H5 和H9 抗体滴度。本试验结果与其不一致，其原因可能是复合营养性添加剂的添加方式以及试验动物不同所致。本试验结果也表明，不同添加方式对免疫效果的影响也存在差异，从免疫前3 d到免疫后4 d使用比从免疫当天开始使用的效果更好。钟佳佑等［6］在猪上的研究结果表明，复合营养性添加剂在疫苗注射前后均使用的效果更佳。

3.2 复合营养性添加剂可以在饲料和饮水中添加，而通过饮水的方式应用，不但可以使其更容易被吸收，还能避免产品摄入受到采食量的制约。试验二结果表明，在饮水中添加复合营养性添加剂对抗体滴度没有显著影响，但能够提高抗体均匀度，加快抗体产生的速度，使抗体水平更快达到高峰。李伟等［7］研究发现，在肉鸡免疫前后5 d 通过饮水使用复合营养性添加剂，能够延长抗体水平的高峰期，使抗体水平下降较慢。本试验结果与其一致。在猪上的研究结果也表明，使用复合营养性添加剂后，断奶仔猪的免疫应激反应很小，且能够提高采食量［8］。

3.3 复合营养性添加剂对动物的免疫功能有改善作用是因为其中包含了丰富的复合维生素、复合氨基酸、有机微量元素、电解质和免疫多糖。维生素对免疫功能的影响主要依靠维生素的抗氧化作用，稳定和清除体内自由基；维生素也是动物体内生化反应中许多酶的辅酶或辅基，间接参与免疫细胞增殖、分化及其DNA 和RNA 的合成［9］。黄芪多糖和糖萜素等免疫多糖能够促进免疫器官的发育，激活免疫细胞，提高免疫细胞的增殖能力，通过激发抗氧化酶的活性来改善动物的抗氧化能力，从而增强动物免疫力［10-11］。