一例保育猪呼吸道病综合征的诊断报告

段倩倩，陈万杰，程家园，陆 阔，李 国，陈鹏飞，李泽伟，李 郁

（安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036）

猪呼吸道病综合征（Porcine respiratory disease complex,PRDC）是一种多因素引起的猪呼吸道疾病，常以混合感染或继发感染形式存在。该病多发于春季和冬季，5～12周龄保育猪易感。PRDC病因复杂，猪舍饲养密度过大、通风不良、猪群免疫水平低下和猪只应激等均是诱发该病的重要原因[1]。引起PRDC的病原多样，病毒性病原包括猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）、猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）、猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）等，细菌性病原包括猪链球菌（Streptococcus suis,SS）、多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）、支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica,Bb）、副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis,HPS）、猪胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacilluspleuropneumoniae,APP）等[2]。PRDC可引起猪群生长缓慢，料重比升高，死淘率上升，是影响养猪业经济效益的重要疾病之一[3]。本文对安徽某猪场的一例PRDC病例进行总结报告，以期为PRDC的诊断及防控提供参考。

1 发病情况和临床症状

安徽省某猪场有存栏母猪2 000头，保育猪3 000头。2021年2月下旬，2 000头40～70日龄保育猪陆续出现咳嗽、气喘、呼吸障碍等症状，发病率66.7%（2 000/3 000），死亡率11.0%（220/2 000）。该场母猪曾免疫过猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病和猪支原体肺炎疫苗，保育猪曾免疫过猪瘟疫苗。对发病保育猪使用替米考星、氟苯尼考和泰乐菌素治疗无明显效果，仍有猪只陆续发病并死亡。

2 病理变化

挑选临床症状典型的3头保育猪（分别编为1号、2号和3号；1号猪为40日龄，2号猪和3号猪均为70日龄）进行剖检，可见肺脏和肝脏均有充血，脾脏均充血、肿大，肾脏均无明显病变。此外，1号猪心脏有纤维素性沉着，2号猪和3号猪心脏均无明显病变。见图1。

图1 病猪病理变化

3 实验室检查

3.1 细菌分离培养

无菌操作采集3头病猪肺、肝、脾、肾、心脏深层组织，划线接种于含1.5% NAD和5%小牛血清的TSA平板，37 ℃恒温培养24 h，均未分离到可疑菌。

3.2 细菌和病毒核酸检测

将病猪肺、肝、脾、肾、心脏组织混合后研磨取上清液，分别用OMEGA微量DNA提取试剂盒和天隆科技病毒DNA/RNA提取试剂盒提取上清液中核酸作为模板。通过PCR方法检测6种细菌核酸和2种病毒核酸，包括SS、猪丹毒丝菌（Erysipelothrixrhusiopathiae,ER）、HPS、APP、Pm、沙门氏菌（Salmonella）、PCV2、PRV。所用引物序列见表1，由通用生物系统（安徽）有限公司合成。按照世纪元亨CSFV通用型实时荧光RT-PCR检测试剂盒和PRRSV通用型实时荧光RTPCR检测试剂盒说明书操作，检测CSFV和PRRSV核酸。

表1 SS、ER、HPS、APP、Pm、Salmonella、PCV2、PRV鉴定引物序列

结果显示，1号猪检测为SS、HPS、PRRSV核酸阳性，2号猪检测为PCV2、PRRSV核酸阳性，3号猪检测为SS、HPS、PCV2、PRRSV核酸阳性，其余病原核酸检测均为阴性。见图2。

图2 病原核酸检测结果

4 诊断

综合该猪场发病情况、发病猪临床症状、病理变化以及实验室检查结果，判定该猪场保育猪发生由PRRSV、PCV2、SS和HPS引起的PRDC。

5 讨论

当前，猪群中多种病原混合感染现象普遍存在，监测原发性病原对PRDC防控意义重大。在本病例中，发病猪群近期使用过抗生素，但猪群仍持续发病并死亡，表明SS、HPS等细菌性病原并非引起PRDC的原发性病原。病原核酸检测结果显示，PRRSV阳性率为100.0%（3/3），而PCV2、SS和HPS阳性率均为66.7%（2/3），提示PRRSV是引起该猪群发病的主要病原。PRRSV作为免疫抑制性病原，可通过削弱猪肺泡巨噬细胞功能，破坏黏膜纤毛转运系统及诱导免疫细胞凋亡来抑制机体的局部免疫反应，提高机体对其他病原的易感性，如PCV2、PRV、SS、HPS、APP、Pm、Bb等[4-5]。

细菌性病原，如SS、HPS等，虽然不是PRDC发生的主要原因，但是在与PRRSV、PCV2等免疫抑制性病原混合感染时，可加剧宿主炎症反应，使猪群死亡率上升[6-7]。这是造成该猪场保育猪发病急、病程短、死亡率高的重要原因。因此，当发生PRDC时，需及时确诊细菌性病原，并使用敏感药物治疗，才能有效降低损失。临床上常将病原学技术和分子生物学技术结合用于猪细菌病诊断。细菌分离培养耗时长，某些对营养条件要求高的病原菌不易被分离到，但是通过该方法可获得细菌培养物，继续开展菌株的种属、耐药表型和血清型鉴定，可为临床用药和疫苗选择提供依据；PCR方法敏感度高、特异性强、检测效率高，适用于猪群突然暴发疫病时的快速准确诊断，以争取时间采取各种防控措施。在本病例中，3头病猪组织中均未分离到可疑病原菌，但是1号、3号病猪组织中SS和HPS核酸为阳性。究其原因，一方面可能是因为病猪曾使用过替米考星、氟苯尼考、泰乐菌素等抗生素，将SS和HPS有效杀灭，另一方面可能是因为病猪组织保存、运输条件不当，致使多数病原菌死亡，无法成功分离。因此，在临床上应根据猪群发病、用药情况选择合适的诊断方法。

疫苗接种是预防PRDC暴发的重要途径，只要从源头上控制住原发性病原，就能有效杜绝疾病发生。通常仔猪血液中母源抗体水平在30日龄左右会消退完全[8-9]。在本病例中，虽然母猪曾免疫过猪蓝耳病疫苗，但是3头保育猪已达40～70日龄，基本不再携带母源抗体，因此对PRRSV攻击无保护作用。CSFV同样作为PRDC原发性病原之一，在本病例中检测结果均为阴性，这可能与保育猪均免疫过猪瘟疫苗相关。表明按照科学的免疫程序对猪只进行免疫接种十分必要。

对于该猪场PPRSV、PCV2、SS、HPS多病原混合感染情况，建议采取以下措施：将病死猪和污染物品焚烧、深埋、无害化处理，发病猪紧急隔离饲养，严格控制病毒感染和蔓延；对发病猪综合使用干扰素和抗生素进行治疗，降低损失；对所有受威胁猪群补免猪蓝耳病、猪圆环病毒病、猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病疫苗；制定科学免疫程序，做好其他重要疫病的全群免疫工作，定期监测抗体水平；在饲料中添加保健药物，提高猪群免疫力和抗应激能力；加强饲养管理，降低饲养密度，保持猪舍干燥、通风、卫生；对进入猪场的人员、车辆、物品进行消毒处理，避免引入外来病原。