饲料中添加复方中草药制剂对三黄鸡生长性能和肠道健康的影响
2021-06-09李姣清余史婷陈作劲郑可娴肖洋帆黄勋和
李姣清, 余史婷, 况 伟, 陈作劲, 郑可娴, 肖洋帆, 黄勋和*
(1.广东省山区特色农业资源保护与精准利用重点实验室,广东梅州514015;2.广东省五华三黄鸡科技创新中心,广东梅州514015;3.嘉应学院生命科学学院,广东梅州514015)
肠道是鸡最大和最复杂的器官之一,其健康对病原体的防御及饲料的消化吸收起着非常关键的作用,一旦肠道健康状况出现问题,鸡的生命与生产活动都会受到影响,大部分疾病也都跟肠道问题有直接或间接的关系(郑慧等,2020)。在鸡养殖中,对于刚出壳的鸡群,如果马上注射抗生素,虽然能在短时间内杀死一些有害细菌,但是会造成大量有益细菌受损,菌群失衡,肠道很容易受到刺激,最终会影响雏鸡的正常生长发育(陈合强,2020;张艳阳,2020)。中草药是天然绿色植物,兼有营养和药用两种属性,已经证明其对于增强机体免疫力、提高生产性能、防治疾病均有较好的效果,被认为是畜禽生产上比较合适的抗生素替代者(孙秀红,2015),据此,本研究利用我国丰富的天然中草药,依据中兽医学理论,选配出具有“清热解毒、补中益气、扶正固本”的复方中草药制剂,通过对三黄鸡饲喂试验,研究在基础日粮中添加不同比例中草药复方制剂对三黄鸡生长性能和肠道健康的影响,为中草药在家禽生产中的应用提供参考。
1 材料与方法
1.1 中草药制剂的制备 试验用的复方中草药按抗菌消炎、理气消食、益脾健胃及增强免疫为组方原则配制。中草药添加剂主要组成为黄芪、人参、土炒白术、当归、陈皮、山楂、甘草、柴胡、熟地、玄参、生地等购于梅州市中医院医院。采用水煎法提取中草药的有效成分,称取药材10.0 g,加10倍量蒸馏水浸泡30 min,加热至沸腾文火保持30 min,用六层纱布过滤,药渣再加8倍量蒸馏水,加热至沸腾文火保持30 min,六层纱布过滤,合并2次滤液,滤液经80℃恒温水浴浓缩至原生药量1.0 g/mL,115℃高压灭菌20 min,4℃保存备用。
1.2 试验动物分组及管理 健康的1日龄五华三黄鸡150只,由广东客家黄畜牧有限公司提供。基础日粮适应性饲喂至7 d后随机分成5组,每组3个重复,每个重复10只。试验期共42 d。Ⅰ组为空白对照组,饲喂基础日粮;Ⅱ组为抗生素组,按阿莫西林粉剂使用说明添加,以0.06%(按体重计)添加于饮用水中,阿莫西林可溶性粉购自河南健恒动物药业有限公司;Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别在饮用水中添加复方中草原生药0.7、1.0、1.3 g/kg(按体重计),分别在第7、18、28日龄开始连续给药4 d,然后停止喂药;舍内笼养,自由采食、饮水,自然通风光照,防疫程序按常规进行。基础日粮组成分两阶段:1~21日龄和22~42日龄,试验基础日粮参照我国肉鸡营养需求标准配制(于雷等,2017),基础日粮组成及营养水平见表1。
表1 基础日粮组成及营养水平
1.3 样品采集和指标测定
1.3.1 生长指标的测定 试验期间每天早上8:30将空腹鸡称重一次,然后据此计算每组试验鸡的平均增重。同时每天准确称取投料量及剩料量。试验结束后,统计各组出栏鸡所消耗的饲料与该组鸡体重比,即为饲料转化比。
1.3.2 肠道形态结构 42日龄试验鸡屠宰后分别取十二指肠、空肠和回肠各1 cm,小心去除肠道内食糜后,用生理盐水冲洗干净后固定于4%多聚甲醛溶液中,用苏木精-伊红(HE)染色制成组织切片,在显微镜下测量绒毛高度和隐窝深度,并计算绒毛高度/隐窝深度。
1.3.3 肠道中SIgA的测定 42日龄时,每重复组选取3只接近平均体重的三黄鸡屠宰后,取出肠道,用生理盐水清洗干净,分别称取1 g十二指肠道、空肠道、回肠道、盲肠道样于5 mL冰PBS缓冲液中匀浆5 min,离心取上清。采用间接酶联试剂盒检测各肠道匀浆提取液中免疫球蛋白SIgA含量,SIgA试剂盒购于南京建成生物公司。
1.3.4 盲肠中微生物的测定 于试验鸡42日龄时,每重复取3只鸡屠宰,取盲肠中食糜,用生理盐水冲食糜于铝盒中,再将处理好的样品放置于-20℃冰箱保存。采用平板涂布法测定盲肠食糜中微生物数量,大肠杆菌采用麦康凯培养基有氧培养24 h进行计数,乳酸杆菌、双歧杆菌和沙门菌分别用乳酸细菌培养基、双歧杆菌肉汤培养基和亚硫酸铋培养基,厌氧培养48 h进行计数。
1.4 数据处理与统计分析 本试验所有数据采用统计软件SPSS 22.0进行单因素方差分析和Duncan’s法进行多重比较,结果用“平均值±标准误”表示,以P<0.05为差异显著判断标准。
2 结果与分析
2.1 饲料中添加复方中草药对三黄鸡生长性能的影响 由表2可知,在第42天试验期结束时,中草药添加处理组三黄鸡的平均日增重较对照组均有不同程度的提高,其中试验Ⅳ组22~42日龄平均日增重最高,为(15.56±0.53)g,比对照组(试验Ⅰ组)提高了13.91%,差异显著(P<0.05),但与抗生素组(试验Ⅱ组)比差异不显著(P>0.05);在饲料转化比方面,中草药试验Ⅳ组与对照组相比降低了7.37%(P<0.05),但与抗生素组差异不显著(P>0.05);中草药试验Ⅲ和Ⅴ组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。
表2 饲料中添加复方中草药对三黄鸡生长性能的影响
2.2 饲料中添加复方中草药对不同肠道形态结构的影响 由表3可知,中草药处理组的三黄鸡十二指肠、空肠和回肠中绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度的比值均高于对照组,对肠道绒毛发育起到较好的促进作用;其中中草药Ⅳ组与对照组相比,空肠的绒毛高度提高了15.62%,绒毛高度与隐窝深度比升高了31.28%,差异显著(P<0.05);中草药Ⅳ组绒毛高度与抗生素组比无显著差异(P>0.05),但中草药Ⅳ组空肠绒毛高度与隐窝深度比较抗生素组显著提高了13.42%(P<0.05),其他中草药剂量组与抗生素相比差异不显著(P>0.05)。
表3 饲料中添加复方中草药对不同肠道黏膜结构的影响
2.3 饲料中添加复方中草药对不同肠道黏膜SIgA分泌的影响 由表4可知,复方中草药处理组的各肠道黏膜中SIgA含量均高于对照组和抗生素组,尤其是试验Ⅳ和Ⅴ组,十二指肠、空肠、回肠和盲肠中SIgA含量显著高于对照组(P<0.05),其中各肠段中以空肠含量最高,试验Ⅳ和Ⅴ组与对照组相比分别增加了30.95%、21.43%。而抗生素组各肠段黏膜中SIgA含量与对照组相比无显著差异(P>0.05)。
表4 饲料中添加复方中草药对不同肠道黏膜SIgA分泌的影响mg/L
2.4 饲料中添加复方中草药对三黄鸡盲肠中微生物数量的影响 由表5可知,复方中草药组大肠杆菌和沙门菌数量均有所下降,但大肠杆菌数量与对照对相比差异不显著(P>0.05),试验Ⅳ组沙门菌数量与对照组相比降低了8.59%,差异显著(P<0.05);复方中草药有利于盲肠中乳酸菌和双歧杆菌繁殖,尤其是中草药试验Ⅳ组与对照组和抗生素组相比乳酸菌数量差异显著,分别增加了5.72%、12.45%;双歧杆菌数量增加明显,分别增加了7.15%、13.11%。由此可知,本试验添加复方中草药制剂可以有效促进双歧杆菌和乳酸菌在盲肠中的定植和生长。
表5 饲料中添加复方中草药对三黄鸡盲肠中微生物数量的影响lg cfu/g
3 讨论
3.1 饲料中添加复方中草药对三黄鸡生长的影响 中草药来源于植物、动物、矿物及其产品,是天然的外源有机物质,大量研究表明,中草药含有多种营养成分和生物活性物质,在畜牧业生产中可提升饲料转化率,增强机体对营养物质的吸收,促进动物的生长发育(贾玉刚,2018;于雷等,2017)。方磊涵等(2018)研究显示,在日粮中添加由黄芪、党参、白术等40味中草药组成的复方添加剂可以有效提高肉鸡的平均日增重。本试验选用的中草药黄芪、党参、白术等含有生物碱、黄酮类、蛋白质、糖类等生物活性成分,具有和胃健脾、补中益气、消食导滞的作用,能较好地调节三黄鸡胃肠功能,促进机体对营养物质的消化吸收,改善动物的生长性能,试验结果显示,饲喂复方中草药制剂后的三黄鸡与对照组相比平均日增重提高了13.91%,料重比降低了7.37%,效果显著。
3.2 饲料中添加复方中草药对三黄鸡肠道健康的影响
3.2.1 饲料中添加复方中草药对三黄鸡肠道绒毛高度和微绒毛结构的影响 小肠是动物消化食物和吸收营养的主要器官,小肠绒毛是小肠吸收消化功能实现的主要结构,绒毛高度与隐窝深度可以作为衡量肠道消化高低的重要指标。绒毛高度大,表明肠上皮细胞增多,与营养物质接触面积增大,养分吸收能力增强;隐窝深度变浅,表明隐窝基部生成细胞的速度变慢,肠上皮细胞的成熟率提高,分泌能力加强,可提高养分的消化吸收能力(靳双星等,2019;韩菲菲等,2018;苏家宜等,2016;吴娟娟等,2015)。张子理等(2002)研究表明,党参、黄芪、白术和甘草提取物对小肠上皮细胞的增殖和黏膜修复有明显促进作用。本研究结果显示,在饲料中添加黄芪、党参等复方中草药能够显著提高空肠的绒毛高度,降低空肠隐窝深度,显著提高绒毛高度与隐窝深度的比值,说明本试验的复方中草药制剂可以缓解三黄鸡肠道绒毛的萎缩,提高黏膜细胞增殖能力,加快肠道修复,从而增强三黄鸡对饲料养分的消化和吸收能力。
3.2.2 饲料中添加复方中草药对三黄鸡肠道分泌型SIgA的影响 分泌型的SIgA是在肠道黏膜免疫当中起到关键作用的分泌型免疫球蛋白,是黏膜免疫的主要抗体,对抵抗病原微生物的入侵起重要作用(段智璇等,2016)。白术、黄芪、党参、等中草药中均含有大量的多糖、生物碱、皂苷、黄酮类等生物有效成分,这些成分通过合理组方后具有扶正祛邪,调理动物机体阴阳平衡状态,提高畜禽免疫功能等作用,石轶男等(2016)研究发现,党参多糖可溶性粉剂可以提高肉仔鸡肠道SIgA的含量。本试验结果显示,饲喂复方中草药制剂可显著促进肠道黏膜中SIgA的分泌,尤其是在十二指肠和空肠中含量升高尤为显著,由此可知,此复方中草药制剂可增强三黄鸡肠黏膜免疫功能,有利于维持三黄鸡的肠道健康。
3.2.3 饲料中添加复方中草药对三黄鸡盲肠微生物菌群的影响 幼龄动物机体各个器官均处于快速发育阶段,其结构与功能尚未完善,肠道消化吸收功能较弱,菌群结构易受营养条件等各方面因素影响而导致菌群不平衡,影响鸡的健康状态,大肠黏膜能源的7%来自肠细菌的发酵产物,当动物机体处于健康状态时,双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌群占优势,当大肠杆菌和沙门菌等有害菌群大量繁殖占据优势时,肠道正常的菌群结构被破坏,影响肠道能源物质的产生,导致绒毛细胞脱落和绒毛萎缩,造成肠道损伤,影响肠道的消化和吸收,同时有害菌比例增加会导致肠道内毒素增加,从而危害动物健康。中草药含抑菌成分黄酮、有机酸等,可调节肠道微生物菌群平衡,抑制有害菌生长,促进益生菌的定植和繁殖,使动物机体肠道生态系统处于健康状态(金海林等,2017;Jun,2016;祖先鹏等,2016;高杨,2011)。李树鹏等(2005)研究表明,益生菌和黄芪多糖均能使肠道中的有益菌增加,抑制有害菌的生长,两者同时添加作用增强。本试验结果表明,复方中草药制剂可显著增加双歧杆菌与乳酸杆菌的数量,减少盲肠内容物沙门菌和大肠杆菌数量,可以维持肠道微生态的平衡,促进鸡的健康生长。
4 结论
复方中草药按一定比例添加到日粮饲喂三黄鸡可以促进其快速生长,提高饲料利用率;促进有益菌的定植和生长,增强肠道免疫能力;改善肠绒毛结构,增强消化吸收功能,本试验中尤其以1.0 g/kg比例添加饲喂后效果最佳,可以有效提高生产效益。[1]陈合强.鸡群肠道健康的观察与应对[J].家禽科学,2020,4:20~26.