接骨木药材质量标准研究∗

师庆媛，马鹏文，朱昱澜，邓月婷，2△

1 甘肃省中药固体分散制剂重点实验室/甘肃陇神戎发药业股份有限公司，甘肃 兰州 730102；2 甘肃省中药质量与标准研究重点实验室

接骨木为忍冬科植物接骨木SambucuswilliamsiiHance 的干燥带叶茎枝、根或根皮。接骨木植物在我国分布广泛，主要在东北、华北、华中、云南、甘肃等地。在民间应用较多，又名续骨木、公道老、马尿骚等［1］。接骨木药用价值高，化学成分复杂，具有预防骨质疏松、抗病毒、抗炎、抗癌、抗氧化、抗艾滋病等多种功效。近年国内外对接骨木化学成分和药理活性成分的研究成果不断涌现，但对于质量标准的研究较少，《中华人民共和国药典》（2015 年版）［2］中未收载接骨木药材的检验标准，在《黑龙江省中药材标准》（2001 年版）［3］中涉及了性状、显微鉴别等检验项目。本研究在此基础上增加了齐墩果酸的TLC 鉴别，另将水分、灰分一并纳入考察范围，为接骨木药材的质量控制提供参考。

1 材料

1.1 仪器WD-9403A 型荧光-紫外分析仪（北京沃德生物医学仪器公司）；HH-6 型数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司）；AX204 型电子天平（上海梅特勒公司）；DHG-9030A 型电热恒温干燥箱（上海鸿都电子科技有限公司）；KQ-400KDE 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试剂齐墩果酸对照品（批号：110709-201607）购于中国食品药品检定研究院；其他试剂均为分析纯。

1.3 药材试验所用10 个批次药材产地分别为安徽、湖北、湖南、河南、云南。

2 方法与结果

2.1 溶剂的筛选取本品粉末3 g，分别加入20 mL的乙醇、甲醇和乙酸乙酯，超声处理30 min（功率500 W，频率40 KHz），滤过，滤液蒸干，残渣加相应的溶剂2 mL，使溶解，作为供试品溶液。吸取供试品溶液4 μL、齐墩果酸对照品溶液6 μL，点于同一硅胶G 薄层板上，以环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，置105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察，然后在365 nm下检视。乙酸乙酯为溶剂时，日光下斑点最明显，365 nm 荧光下最清晰，故选乙酸乙酯为提取溶剂。见图1—2。

图1 不同提取溶剂薄层色谱（日光）

图2 不同提取溶剂薄层色谱（365 nm荧光）

2.2 展开剂的选择取本品粉末3 g，加入乙酸乙酯20 mL，超声处理30 min（功率500 W，频率40 KHz），滤过，滤液蒸干，残渣加相应的溶剂2 mL，使溶解，作为供试品溶液。吸取供试品溶液4 μL、齐墩果酸对照品溶液6 μL，点于同一硅胶G 薄层板上，分别以环己烷-丙酮-乙酸乙酯-冰醋酸（65∶25∶10∶1）、环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（10∶3∶0.5）、环己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸（9∶2∶1∶0.2）、环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，置105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察，然后在365 nm 下检视。结果显示，当以环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）为展开剂时，斑点清晰，分离度较好，因此选择环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）作为齐墩果酸鉴别的展开剂。

2.3 点样量的选择依次吸取2、4、6 μL 齐墩果酸对照品和2、4、6 μL 接骨木供试品溶液，点于同一硅胶G 薄层板上，以环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，置105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察，然后在365 nm下检视。齐墩果酸对照品6 μL、供试品4 μL颜色斑点和分离度最佳。见图3—4。

图3 不同点样量薄层色谱（日光）

图4 不同点样量薄层色谱（365 nm荧光）

2.4 薄层鉴别系统验证按照《中华人民共和国药典》（2015 版）薄层色谱法实验［4-5］，依次吸取齐墩果酸对照品6 μL、不同产地接骨木溶液4 μL，点于同一硅胶G 板上，展开剂为环己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1），展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰，分别在可见光、365 nm 下检视，接骨木供试品与齐墩果酸对照品在相应位置显示相同颜色的斑点，见图5—6。

图5 不同产地接骨木薄层（日光）

图6 不同产地接骨木薄层（365 nm荧光）

2.5 水分及总灰分按照（《中华人民共和国药典》（2015 年版）通则0831 项下第二法及2302 第一法测定接骨木药材水分及总灰分。接骨木药材的水分最低为2.8%，最高为5.2%，以最高测定值的120%设限，为6.2%，故建议将标准定为水分不得超过6.0%；接骨木药材灰分最低值为0.8%，最高值为2.3%，以最高测定值的120%设限，为2.8%，故建议将标准定为总灰分不得超过3.0%，见表1。

表1 接骨木药材水分及总灰分 %

3 讨论

接骨木作为常用中药材，具有接骨续筋、祛风利湿、活血止痛等药理作用［6］。但由于产地不同，接骨木药材所含成分有区别。有文献选取芦丁作为接骨木定性定量的目标化合物［7］，但笔者选取芦丁、盐酸小檗碱成分进行TLC 检查，特征斑点不明显，故不选择芦丁及盐酸小檗碱作为定性指标。而在本研究中，接骨木样品中齐墩果酸成分通过薄层鉴别可以很好分离，提取方法简单、快捷，斑点清晰明显，所用试剂普及，易于操作，故将齐墩果酸鉴别纳入质量标准中［8］。

在浸出物检查中，虽然相对水、95%乙醇，将稀乙醇作为溶剂浸出物含量稍高，但最高值为5.82%，最低值为3.10%，整体偏低，故不作为参考指标。含量测定中笔者根据文献资料考察熊果酸含量［6］，结果显示10 批接骨木药材中熊果酸含量在0.02～0.06%之间，含量较低，故不做参考。