核型多角体病毒对2种夜蛾的室内毒力试验

曾维爱，李昆奇，蔡海林，谭 琳

（1.湖南省烟草公司长沙市公司，湖南长沙 410019；2.浏阳市烤烟生产指导中心，湖南长沙 410300；3.湖南农业大学，湖南长沙 410128）

斜纹夜蛾（Spodoptera litura）、棉铃虫（Helicoverpa armigera）均为鳞翅目夜蛾科昆虫，幼虫食性复杂，取食量大，寄主植物分布广泛［1-2］。烟草是我国重要的经济作物，其收获物为叶片，夜蛾类幼虫为害烟叶后造成叶片缺刻、破损，甚至将整张叶片完全取食光，严重影响烟草产量和质量，给烟农带来直接经济损失。核型多角体病毒属杆状病毒科核型多角体病毒属，对农林害虫的侵染专一化程度较高，且对天敌、环境、人畜无害，国内外在分离鉴定、毒力测定、致病机理、病毒制剂及田间应用等方面开展了大量研究［3-8］。基于此，研究3 种夜蛾科核型多角体病毒对斜纹夜蛾、棉铃虫的室内毒力，旨在进一步明确核型多角体病毒杀虫剂对烟草主要害虫的作用机制，拓展夜蛾类新的生物防治措施，为科学、绿色防控烟草害虫提供参考和依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试昆虫

斜纹夜蛾、棉铃虫卵均采自长沙市烟草公司浏阳烟田，饲养条件为（26±1）℃，相对湿度70%±5%，光照（L）∶暗光（D）周期为12 h ∶12 h，饲料为新鲜烟叶，于实验室饲养5 代以上供试。

1.1.2 供试烟草

品种为云烟87，烟草种植过程中未施用任何农药。

1.1.3 供试药剂

斜纹夜蛾核型多角体病毒SpliNPV 郴州株，湖南郴州烟区分离，保存于长沙市烟草公司实验室，10 亿PIB/mL；200 亿PIB/mL 斜纹夜蛾核型多角体病毒（水分散粒剂）、50 亿PIB/mL 棉铃虫核型多角体病毒（悬浮剂）均购自科云生物。

1.2 试验方法

1.2.1 核型多角体病毒对2 种夜蛾卵的毒力试验

将新鲜饱满的初产卵分别放在浓度为2.0×107PIBs·mL-1的供试药剂溶液中浸渍10 s 后用吸水纸将多余的药液吸干，室温晾干后，将卵刷到培养皿中，并置于温度（26±1）℃、相 对 湿 度70%±5%、光 周 期L ∶D=12 h ∶12 h 的人工气候箱中培养，记录卵的孵化情况，以清水为对照，每处理30 粒卵，重复4 次，共120 粒卵。孵化出来的幼虫及时挑出转移至透明饲养盒，用新鲜烟叶喂饲，记录幼虫死亡情况，直至幼虫进入3 龄期。

1.2.2 核型多角体病毒对2 种夜蛾2 龄幼虫的毒力试验

将烟草叶片剪成4 cm×4 cm 大小的正方形，分别放在浓度为2.0×107PIBs·mL-1的供试药剂溶液中浸渍10 s于室温下晾干后置于塑料盒中，挑选同批孵化的大小一致的2 龄初期幼虫于烟叶上，每盒1 头虫，以清水为对照，每处理30 头幼虫，重复4 次，并置于温度（26±1）℃、相对湿度70%±5%、光周期L ∶D=12 h ∶12 h 的人工气候箱中培养，更换新鲜的浸过病毒液的烟草叶片，感染36 h 后以无毒新鲜烟草叶片继续饲养，每24 h 调查幼虫死亡数，并收集虫尸体，直至96 h，计算死亡率。

1.3 数据处理

死亡率和校正死亡率分别根据公式（1）和公式（2）计算。

2 结果与分析

2.1 核型多角体病毒对2 种夜蛾卵的毒力试验结果

经过核型多角体病毒液处理过的两种夜蛾卵，在24 h 时陆续孵化，在48 h 达到孵化高峰期，72 h 后卵出现干瘪，且不能正常孵化。从表1 可以看出，清水对照组的斜纹夜蛾、棉铃虫卵孵化率最高，分别为95.00%、95.83%，其余经3 种核型多角体病毒处理过的卵，其孵化率 均≥91.67%，低于清水对照，但未达到显著水平，说明核型多角体病毒对斜纹夜蛾、棉铃虫卵的孵化没有明显的抑制作用。

表1 3 种核型多角体病毒对2 种夜蛾卵孵化率的影响（72 h）

经核型多角体病毒处理过的卵孵化成幼虫的校正死亡率如图1 所示，而SpliNPV（科云）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分别为91.41%、76.70%，HaNPV（科云）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分别为79.67%、93.51%，SpliNPV（郴州）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分别为90.70%、76.06%。

图1 不同核型多角体病毒浸卵处理后2 种夜蛾幼虫校正死亡率

2.2 核型多角体病毒对2 种夜蛾2 龄幼虫的毒力试验结果

3 种核型多角体病毒对斜纹夜蛾和棉铃虫2 龄幼虫的毒力存在一定的差异，在取食带毒叶片24 h 后，各处理组幼虫陆续出现死亡现象，随着取食时间的延长，斜纹夜蛾和棉铃虫幼虫的死亡率逐渐上升。由图2 可知，斜纹夜蛾2 龄幼虫喂毒72 h 后，SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）、HaNPV（科云）处理组校正死亡率分别为88.03%、88.89%、75.21%，其中SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）两种病毒对斜纹夜蛾低龄幼虫的致死率相当。棉铃虫2 龄幼虫喂毒72 h 后，HaNPV（科云）、SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）处理组校正死亡率分别为91.00%、72.88%、77.12%，HaNPV（科云）对棉铃虫低龄幼虫的致死率最高。

图2 不同核型多角体病毒处理后2 种夜蛾幼虫校正 死亡率（72 h）

3 结论与讨论

近年的监测数据显示，湖南部分烟区烟田棉铃虫、斜纹夜蛾的发生量呈逐年上升趋势。常规的化学防治虽然见效快，但长期使用易产生抗药性，且可能污染环境，杀伤天敌。目前在烟草害虫防治上，核型多角体病毒杀虫剂占据了比较重要的位置。试验结果表明，经核型多角体病毒处理过的斜纹夜蛾和棉铃虫的卵，因幼虫孵化后会取食卵壳，在这个过程中将卵壳上少量的病毒也摄入体内，导致其死亡。