高尔基磷酸化蛋白3与结直肠癌临床病理特征关系的Meta分析

杨自凯 谢长顺 郑继尧 徐欢 邵梦真 郑岳

结直肠癌(CRC)是胃肠道中常见的恶性肿瘤，已成为世界上第四大致命的恶性肿瘤，每年有近90万人死于该病[1]。其早期症状不明显，超过75%的患者确诊时已处于中晚期或发生远处转移，综合治疗难以取得满意的疗效[2]。因此，确定一种代表性的分子标志物及治疗靶标，对结直肠癌早期诊断及治疗具有重要的意义。高尔基磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3，GOLPH3)是一种新的癌基因，可激活丝/苏氨酸蛋白激酶(AKT)，促进癌细胞增殖，抑制细胞凋亡，在高尔基体运输中起决定性作用[3-5]。先前临床研究已证实，GOLPH3与很多肿瘤发生、发展有关[6]。有多项研究表明GOLPH3的高表达与结直肠癌的癌变、临床病理特征密切相关[7-13]。因此，如果将GOLPH3作为判断结直肠癌的临床病理特征的检测指标则具有极大的实用性。目前已发表的研究中结直肠癌患者的临床特征与GOLPH3的表达之间的相关性仍然是有争议的。因此，本研究运用Meta分析的方法，了解GOLPH3水平与结直肠癌患者临床病理特征的相关性，为临床实践提供循证医学依据。

1 资料与方法

1.1 文 献 检 索 在PubMed、Web of Science、Medline、万方数据库和CNKI中进行了系统的综合文献检索，筛选了GOPLH3表达与结直肠癌临床病理特征关系的研究。检索时间从创建数据库之日截止到2020年5月。医学主题词(MeSH)和文献检索中检索词如下：(“Golgi phosphoprotein 3”or“GPP34 protein”or“GOLPH3”)、(“colorectal cancer”or“colorectal tumor”or“colorectal carcinoma”or“CRC”or“colon cancer”or“rectal cancer”)以及对应的中文检索词。

1.2 文献纳入标准 由病理确诊为结直肠癌；有临床病理或组织学数据；应用免疫组织化学方法检测GOLPH3表达；在放疗、化疗和其他治疗前采集肿瘤组织；文献出版语言仅限于中文和英文并可查看全文。

1.3 文献排除标准 存在重复数据的文章；病例报道、综述、会议摘要；动物试验；无法获取所需要的生存资料。

1.4 数据提取及质量评价 两名独立的研究人员按照设定的标准从研究中提取数据，包括：发表年份、作者、GOLPH3的评估方法、患者人数、病例数目、性别、年龄和大小、淋巴结转移[14-15]。质量评估由另外两位研究人员独立进行，使用纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)来评估纳入文献的质量。总分为9分，文章评分在1～3分、4～6分、7～9分的分别被定义为低、中等或高质量的文章。本分析纳入的7篇文献中，中等质量文献2篇，高质量文献5篇。1.5 数据分析 我们计算了纳入文献中的OR和95%CI。采用随机效应和固定效应模型分析两种方法对异质性进行了分析。有统计学意义的异质性定义为卡方检验P＜0.1或I2＞50%[16]。假如观察到异质性，我们利用随机效应模型来减少异质性对结果的影响，反之则使用固定效果模型[17]。使用Egger's检验用于评估发表偏倚[18]。使用STATA 16.0软件进行数据分析。

2 结果

2.1 纳入研究的特点 纳入文献的基本特征见表1，文献筛选流程见图1。纳入文献均于2014—2018年间在亚洲发表，样本量在40～148[7-13]；中位随访时间为36～67个月。所有研究均为回顾性研究，55%～62.22%的患者为男性。每项研究分数均为NOS量表评分得出，分数都大于6分。

表1 纳入文献的基本特征

图1 文献检索流程图

2.2 Meta分析

2.2.1 肿瘤、结直肠组织和正常组织中GOLPH3的表达 共6篇文献[7-9，11-13]报道了GOLPH3在结直肠癌组织和正常组织中的表达。根据随机效应模型分析，总OR为3.15(95%CI＝2.28～4.35%，P＜0.001)。排除异质性相关研究后，总OR值为5.25(95%CI＝3.60～7.64，P＜0.1)。这些结果表明，GOLPH3在结直肠癌组织中的表达水平显著提高。

2.2.2 GOLPH3表达与临床病理特征的关系 从肿瘤不同临床阶段、分化、淋巴结转移、性别、年龄、肿瘤大小几个方面分析GOLPH3表达与结直肠癌临床病理特征之间的关系，见图2。由于在不同临床阶段、肿瘤分化和肿瘤大小中存在分歧结果以及只纳入晚期结直肠癌患者的研究，有显著的异质性。在排除这几项研究后得出结论：GOLPH3高表达与肿瘤不同临床阶段(OR＝3.03，95%CI＝2.04～4.50，P＜0.1)、肿瘤分化(OR＝0.70，95%CI＝0.44～1.10，P＝0.121)有显著相关性，与肿瘤大小无相关性(OR＝1.20，95%CI＝0.76～1.90，P＝0.442)。在GOLPH3与淋巴结转移、性别、年龄相关性分析中，观察到显著的异质性，为了明确异质性来源，按照样本量大小、年龄界限进行亚组分析，亚组分析结果表明，样本量≥100(OR＝0.25，95%CI＝0.14～0.43，P＜0.1)。样本量＜100(OR＝3.90，95%CI＝2.42～6.30，P＜0.1)，GOPLH3表达与淋巴结转移差异有统计学意义。GOLPH3的表达与性别相关具有高异质性，在按照样本分层的亚组分析中得出结论，GOLPH3的高表达与性别无关(OR＝1.112，95%CI＝0.777～1.592，P＝0.561，I2＝0%)。年龄＝60(OR＝0.924，95CI＝0.599～1.426，P＝0.772)，年龄＝65(OR＝0.731，95%CI＝0.382～1.40，P＝0.345)，GOLPH3表达与性别和年龄差异无统计学意义。

图2 GOLPH3表达与结直肠癌临床病理特征关系研究的森林图

2.2.3 敏感性分析和发表偏倚 为了检查OS分析中合并HR的稳定性，我们进行了敏感性分析。结果表明，排除任何单独的研究并不能改变总体结果，本分析所得出的结论是可靠的。我们使用Egger's分析来检测发表偏倚，在该Meta分析中未观察到任何发表偏倚，见图3。

图3 GOLPH3表达与OS关系的(A)偏倚及(B)敏感度分析图

续图3 GOLPH3表达与OS关系的(A)偏倚及(B)敏感度分析图

3 讨论

结直肠癌的发生是基因和环境相互作用后产生的结果，原癌基因的激活被认为是促发结直肠癌的关键机制。在恶性肿瘤的增生过程中，某些原癌基因的激活或抑癌基因的失活导致了肿瘤细胞中特定蛋白的异常表达[19]，因此，探索特定蛋白在肿瘤发生、发展过程中表达变化，对于肿瘤的诊断意义重大。

GOLPH3基因是一种分子量约为34 kD的高尔基体复合物相关蛋白，最初是通过高尔基体的蛋白质组学表征鉴定的，主要发挥蛋白质的转运作用。是高尔基体中一种高度保守的蛋白质和磷脂酰肌醇-4单磷酸酯(PI4P)的效应物[20]。GOLPH3相对应的编码基因位于第5p13号染色体，是肿瘤中一个频繁扩增的区域[21-22]。在细胞分裂、线粒体质量和DNA损伤中起着重要的作用。另外，Scott等人还发现，GOLPH3激活了雷帕霉素的哺乳动物靶标mTOR途径[23]。GOLPH3过表达时细胞内mTOR信号通路的两个关键蛋白核糖体S6K蛋白激酶和蛋白激酶B明显升高，PI3K/Akt/mTOR信号通路的异常活跃在肿瘤的发生、发展中起着重要的作用，所以GOLPH3对mTOR信号通路的调节作用尤为重要[5]。可增强表皮生长因子(EGF)，进一步加速蛋白合成，促进细胞分裂增生。这对于调节生长和细胞增生非常重要。

尽管我们努力进行全面而精确的Meta分析，但必须承认其存在局限性，所纳入的研究均为回顾性研究，样本量有限且只限于亚洲，可能导致潜在的选择偏倚。其次，在纳入的研究中使用了不同的GOLPH3表达临界值，可能对结果也有一定影响。尽管存在一些不可避免的缺陷，但本Meta分析的结论还是有意义的。

综上所述，GOLPH3的高表达与结直肠癌组织临床分期、肿瘤分化、淋巴结转移密切相关，可能促进结直肠细胞的癌变及癌细胞的转移。因此我们推测，GOLPH3有可能成为预测临床中结直肠癌早期癌变的根据。