海南地区白木香南方根结线虫防控药剂筛选

孙衍汤，连春枝，王科明，凌家如

海南省林业科学研究院（海南省红树林研究院），海南海口571100

南方根结线虫（Meloidogyneincognita）是喜温性植物根系定居性内寄生生物，是根结线虫属中4大优势种群之一，其寄主范围很广，超过3000种，分属114科，尤以茄科、葫芦科、十字花科等植物受害严重[1]。

白木香（Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg）又称土沉香、香树、女儿香等，是瑞香科沉香属常绿乔木，喜温暖，耐干旱，对土壤要求不严，在酸性的砂质壤土、黄壤土和红壤土均能生长，为中国生产中药沉香的唯一植物来源，是国家二级重点保护野生植物[2-3]。近年来，随着海南白木香种植面积不断增大，种植后带来的病虫害问题越来越严重，影响和制约了白木香产业的健康发展，产量减少、质量降低较为突出，其中一个最主要的原因是南方根结线虫的不断累积、传播、蔓延和危害[4]。该线虫寄生在苗期发生非常普遍，如果不进行处理栽种后枯死率较高。目前对南方根结线虫主要依靠药剂防治，但防治南方根结线虫的药剂种类不多，大部分防效不高。因此，了解杀虫剂对南方根结线虫的防治效果并筛选出综合防治效果较好的药剂对白木香种植产业具有重要现实意义。

该研究使用7种药剂，通过室内试验初步筛选出毒杀效果较好的药剂，再进行田间试验，根据田间试验结果统计综合评价，筛选出防治效果较好的防控药剂，为海南白木香根结线虫的防治工作提供参考依据。

1 田间试验地概况

试验地位于乐东县尖峰镇苗圃园内，属于热带海洋季风气候地区，年平均气温23℃，年降雨量1200mm左右，试验地地势平坦，土壤质地为沙土，pH6.5，有机质含量1.61，南方根结线虫病常年发生较重。试验前后未施用其他农药，肥水管理照常规进行。

2 材料和方法

2.1 供试药剂

41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂；20%的噻唑膦水乳剂；1.8%的阿维菌素乳油；50%的辛硫磷乳油；48%的毒死蜱乳油；淡紫拟青霉粉剂，2亿个孢子/g；厚孢轮枝菌微粒剂，25亿个孢子/g。

2.2 室内毒力测定方法

（1）药剂的配制

将1.8%的阿维菌素乳油按有效成分配制浓度分别为0.45mg/mL、0.23mg/mL、0.11mg/mL、0.056mg/mL和0.028mg/mL；41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂按有效成分配制浓度分别为0.42mg/mL、0.21mg/mL、0.11mg/mL、0.053mg/mL和0.026mg/mL；20%的噻唑膦水乳剂和50%的辛硫磷乳油按有效成分配制浓度分别为10mg/mL、5mg/mL、2.50mg/mL、1.25mg/mL和0.63mg/mL。

（2）线虫悬浮液的制备

从培养于大棚中的袋装白木香幼苗根部分离南方根结线虫卵粒，置于培养皿中的灭菌水中，于28℃孵化48h～72h，然后用贝曼漏斗法分离根结线虫2龄幼虫，24h后收集线虫于培养皿中，加灭菌水配制成浓度为40头/mL的线虫悬浮液。

（3）室内药剂毒力测定

往培养皿中分别加入线虫悬浮液1mL，再分别加入对应的处理药剂1mL；1.8%的阿维菌素乳油按有效成分配制浓度分别为0.45mg/mL、0.23mg/mL、0.11mg/mL、0.056mg/mL和0.028mg/mL；41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂按有效成分配制浓度分别为0.42mg/mL、0.21mg/mL、0.11mg/mL、0.053mg/mL和0.026mg/mL；20%的噻唑膦水乳剂和50%的辛硫磷乳油按有效成分配制浓度分别为10mg/mL、5mg/mL、2.50mg/mL、1.25mg/mL和0.63mg/mL。毒力测定实验于直径为3.5cm的培养中进行，24h后，统计死亡虫数。1个培养皿为1个处理，每个处理分别设4次重复。

2.3 田间试验

2.3.1 试验材料

（1）试验作物：白木香

（2）防治对象：南方根结线虫病

（3）供试药剂见表1

表1 供试药剂及施药剂量Tab.1 The Test Insecticides and The Dosage of Application

2.3.2 试验及调查方法

（1）施药方法

量取各药剂，用苗圃园内贮藏的地下水稀释，稀释倍数1000倍，水温为22℃，天气阴，气温23℃～27℃。施药器械为10kg带喷头的不锈钢铁桶，均匀浇灌到白木香苗内。

（2）调查时间和次数

试验共进行3次调查，施药前进行线虫基数调查，施药后15d调查线虫减退情况；定植后植株生长45d，挖取植株调查根结情况。

（3）小区面积与调查方法

小区面积：每小区面积20m2，每处理设4次重复。

土壤线虫采样方法：基数调查，在施药前，通过土壤采样确定侵染程度，每小区用取土器从白木香苗的根周围（0cm～20cm）随机采集5个点的土样，采集后用贝曼漏斗法分离，测定2龄线虫侵染期的数量。鉴别线虫死活采用0.3%龙胆紫染色法。

病情调查方法：采用随机取样调查法，每小区取样30株检查根系虫瘿情况。病株分级标准：

0级：根系无虫瘿；

1级：根系有少量小虫瘿；

3级：2/3根系布满小虫瘿；

5级：根系布满小虫瘿并且次生虫瘿；

7级：根系形成须根团；

（4）药效计算方法

根据线虫数和病情指数按下列指数公式计算出防治效果：

式中：

CK0、PT0：施药前空白对照区和药剂处理区活线虫数；CK1、PT1：施药后空白对照区和药剂处理区活线虫数。

式中：CK1为空白对照区施药后病情指数；PT1为药剂处理区施药后病情指数。

2.4 统计分析

通过SPSS 22.0软件，求出每种药剂的毒力回归方程Y=a+bx、相关系数R2、95%置信限及致死中浓度LC50。用邓肯新复极差法（DMRT）对试验结果进行统计分析。

3 结果与分析

3.1 毒力测定结果

根据每种药剂不同浓度测试皿内南方根结线虫2龄线虫的毒杀活性，结果见表2。由表2可知，1.8%的阿维菌素乳油对南方根结线虫2龄幼虫的毒杀活性最好，LC50为0.53mg/mL；其次是41.7%的氟吡菌酰胺悬乳剂，LC50为1.28mg/mL；20%的噻唑膦水乳剂的LC50为18.56mg/mL，50%的辛硫磷乳油的LC50为41.51mg/mL。

表2 4种农药制剂对白木香南方根结线虫2龄幼虫的毒杀活性（24h）Tab.2 The Toxicidal Activity of 4 Insecticides Control Efficacy of The Second Instar larvae of The Aquilaria Sinensis Meloidogyne Incognita（24h）

除上述4种药剂外，余下3种药剂测试时没有显示线性关系，由此，在固定浓度下，测试余下3种药剂的致死率，结果如下：

40%的毒死蜱乳油在200μg a.i./mL下对南方根结线虫2龄幼虫的致死率为34.9%；厚孢轮枝菌微粒剂（2.5×106个孢子/mL）对南方根结线虫2龄幼虫的致死率为15.6%；淡紫拟青霉粉剂（2.0×106个孢子/mL）对南方根结线虫2龄幼虫的致死率为19.4%。其中后2种药剂为微生物杀线虫剂，在实验室测试皿内毒杀活性没有显示出较好的致死率，可能是由于微生物药剂的滞后性，而测试的时间是药后24h，因此，出现上述结果。

3.2 田间试验结果

根据皿内实验结果，选择毒杀活性较好的3种农药，1.8%的阿维菌素乳油、41.7%的氟吡菌酰胺悬乳剂和20%的噻唑膦水乳剂为田间试验药剂。每种药剂按照高中低3个浓度布置试验，空白对照用清水替代。实验结果见表3、表4。

由表3可知，根据土壤中统计的南方根结线虫数目可以计算施药后虫口减退率及其防效。药后15d，41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂的效果整体较好，其次是20%的噻唑膦水乳剂，1.8%的阿维菌素乳油的防效稍差。有效成分用量为312.75mL/hm2时，41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂对线虫的虫口减退率为83.58%，防效为84.85%，防治效果最好；有效成分用量为135mL/hm2时，药后15d，1.8%的阿维菌素乳油的虫口减退率为63.15%，防效为65.99%，效果较差。有效成分用量为3000mL/hm2时，20%的噻唑膦水乳剂的防效与41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂最低浓度的防效相当。

表3 3种药剂防治白木香南方根部线虫田间试验结果（15d）Tab.3 The Field Control Efficacy of 3 Insecticides to Meloidogyne Incognita of Aquilaria Sinensis（15d）

根结防效：药后45d，拔出幼苗统计根结发病情况，结果见表4。有效成分用量为312.75mL/hm2时，41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂对线虫根结的平均病情指数为7.26，防效为85.41%，防治效果最好；有效成分用量为135mL/hm2时，1.8%的阿维菌素乳油对线虫根结的平均病情指数为17.02，防效仅为65.79%，效果较差。有效成分用量为3000mL/hm2时，20%的噻唑膦水乳剂对线虫根结的防效与41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂最低浓度的防效相当，分别为78.71%和78.47%。整体防效表现为41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂的效果较好，其次是20%的噻唑膦水乳剂，1.8%的阿维菌素乳油的防效稍差。

表4 3种药剂防治白木香根部南方根结线虫田间试验结果（45d）Tab.4 The Field Control Efficacy of 3 Insecticides to Meloidogyne Incognita of Aquilaria Sinensis（45d）

4 结论与讨论

4.1 结论

该研究结果表明，室内毒力试验1.8%的阿维菌素乳油对南方根结线虫2龄幼虫的毒杀活性最好，LC50为0.53mg/mL；其次是41.7%的氟吡菌酰胺悬乳剂，LC50为1.28mg/mL；20%的噻唑膦水乳剂的LC50为18.56mg/mL，50%的 辛 硫 磷 乳 油 的LC50为41.51mg/mL；40%毒死蜱乳油、厚孢轮枝菌微粒剂（2.5×106个孢子/mL）和淡紫拟青霉粉剂（2.0×106个孢子/mL）这3种药剂测试时没有显示线性关系。

田间药效试验41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂的效果整体较好，其次是20%的噻唑膦水乳剂，1.8%的阿维菌素乳油的防效稍差。有效成分用量为312.75mL/hm2时，41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂对线虫的虫口减退率为83.58%，防效为84.85%，防治效果最好；有效成分用量为135mL/hm2时，药后15d 1.8%的阿维菌素乳油的虫口减退率为63.15%，防效为65.99%，效果较差。有效成分用量为3000mL/hm2时，20%的噻唑膦水乳剂的防效与41.7%的氟吡菌酰胺悬浮剂最低浓度的防效相当。

4.2 讨论

根据试验结果统计发现41.7%的氟吡菌酰胺悬乳剂整体效果最好，20%的噻唑膦水剂其次，1.8%的阿维菌素乳油效果一般，田间试验结果与室内筛选结果不一致，可能原因是室内主要以培养皿的生测为主，乳油的吸收和渗透效果较好，对线虫有较好的毒杀作用，而在田间，受到土壤因素的影响，乳油被吸附等原因，导致阿维菌素效果难以发挥，因而结果不一致。淡紫拟青霉粉剂药剂测试时没有显示线性关系，这与许天委等研究的结果不一致[5]，这可能是由于施药后受土壤和环境对生物农药的影响，从而导致药效发挥不好。

从价格因素考虑，41.7%的氟吡菌酰胺悬乳剂的价格比较贵，20%的噻唑膦水剂的价格相对便宜，因而仅仅单一防治线虫，建议选择20%的噻唑膦水剂进行灌根防治；由于41.7%的氟吡菌酰胺悬乳剂对白粉病也有良好的防治，一旦白粉病和线虫同时发生，可以使用该药兼顾两种病害。

尽管阿维菌素乳油的效果稍差，但是由于没有使用阿维菌素颗粒剂等其他剂型进行防治，因而暂时不能说阿维菌素的效果欠佳。