ELISA检测抗-HCV灰区、弱反应标本与FQ-PCR检测结果比较研究

王真真

(南阳市中心医院,河南 南阳 473000)

丙型肝炎是一种传染性疾病，传播途径主要有血液传播、血液制品及静脉吸毒等，该病的病发较为隐匿，临床症状极不典型，若不及时的进行诊断及治疗，将会引发肝硬化、肝脏的慢性炎性变化，对生命健康造成极为严重的威胁。目前，诊治丙型肝炎最常用的指标是抗-HCV，检测方式主要为酶联免疫吸附试验(ELISA)，ELISA检测法虽具有快速、低成本、操作简单、高灵敏度及高特异性等特点，但其易出现误诊及漏诊情况，特别是检测某些变异病毒、免疫静默期的感染病毒及“窗口期”的感染病毒，误诊、漏检情况时有发生。对此，本研究采取荧光定量PCR法(FQ-PCR)复测LISA检测抗-HCV灰区、弱反应标本情况，对比两种检测方法的结果，分析其在HCV感染检测中的意义，现报告如下。

1 资料与方法

1 一般资料

选取2018年4月～2019年4月在南阳市中心医院进行无偿献血者的450例血样标本作为研究对象，根据ELISA检测抗-HCV检测结果，将血液标本分为三组，即甲组：阴性(S/C0<0.3)200例；乙组：灰区(0.7≦S/CO<1)240例，其中双试剂灰区64例，单试剂灰区176例；丙组:弱反应标本〈1≦S/C0<3.0)210例。将所有血样标本进行分离，并将分离后的血清标本置于-20℃以下的冰箱内进行冷冻保存，备用。

1.2 方法

采取ELISA法检测三组研究对象的抗-HCV灰区、弱反应标本，若标本的S/CO的检测值均在0.7～3.8之内，则采用同一种试剂检测，若标本的检测结果显示为灰区、弱反应性，则采取FQ-PCR法进行检测。ELISA检测所用是试剂、质控物来源于上海润裕生物科技有限公司，抗-HCV的质控物一般含量有200 IU/mL；HCV-DNA FQ-PCR检测的试剂盒来源于上海酶联生物科技有限公司，试剂检测的限度为100 IU/mL[1]。检测设备：济南光耀医疗设备有限公司提供的TL988型实时荧光定量PCR仪，上海京工实业有限公司提供的PHOTO全自动酶标仪，深圳市盛信康科技有限公司提供的ADACLIA400全自动洗板机。

1.3 统计学方法

采取SPSS18.0统计学软件对数据进行分析处理，计数资料采取%表示，组间对比检验采取χ2表示，P<0.05时表明数据间比较具有统计学意义。

2 结果

2.1 ELISA检测抗-HCV和FQ-PCR检测结果对比(见表1)

表1 血液样本ELISA检测弱反应性与阴性标本FQ-PCR检测结果对比

2.2 ELIsA检测抗-HCV灰区、弱反应性与FQ-PCR检测结果对比(见表2、3)

表2 不同灰区与HBV-DNA FQ-PCR复测结果对比

表3 不同弱反应性标本与HBV-DNA FQ-PCR复测结果对比

3 讨论

目前，临床一般采取ELISA法检测抗-HCV来诊断HCV感染。但ELISA法具有较大的局限性，加之不同厂家的试剂的特异性、灵敏度存在差异，在检测过程中往往出现一些数值在临界点时无法正确的判断结果[2]。因此，如何准确判断、诊治HCV感染，避免发生医患纠纷一直深受临床的重视。FQ-PCR检测技术是一种核酸定量检测法，高灵敏性是其一项重要的特点，当检测HCV感染时，能有效检测HCV感染的水平含量，且该方式还能检测出病毒突变株，其结果能显示出病毒具有多高强度是传染性，还能显示病毒的复制水平[3]。 本文结果显示，在650例抗-HCV灰区标本中，共有23例(3.534%)HBV-DNA的浓度大于100 IU/mL，这表明，采取ELISA法对抗-HCV进行检测时，其结果显示S/CO<1时，仍不能全部排除HCV感染。有关研究认为，当检测的试剂盒的灵敏度弱、HCV感染处于“窗口期”、HCV变异株感染等情况下，ELISA检测时并不可以产生相应的免疫应答，这就会导致抗-HCV的漏检、误诊情况发生[1，3]。而本研究结果显示，采取ELISA检测抗-HCV时，呈现弱反应性(1≤S/C0<3.0)的210例研究对象中，有188例(89.52%)检出HBV-DNA。当抗-HCV呈现弱反应性时，则表明已有HCV感染，但这时并不能明确感染是现症感染还是以往感染，而HBV-DNA却是明确为现症感染的一个特异性指标。因此，应用FQ-PCR检测标本灰区及弱反应性对检测丙型肝炎具有十分重要的意义。

综上所述，采取ELISA法联合FQ-PCR法检测抗-HCV结果灰区、弱反应样标本，能降低感染HCV误诊、漏诊情况发生，利于疾病的早期诊治，避免医患纠纷发生。