宫颈上皮内瘤样病变与阴道微生态 HPV TRAIL及IL-32的关系研究

闫晓华，董 立，彭宝相，张纪云，程振娜，刘瑞磊

(1山东医学高等专科学校，山东 临沂 276000；2临沂市人民医院；3临沂市肿瘤医院)

宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia，CIN)是宫颈癌前病变的统称，是发展为宫颈癌的必经阶段。HPV是一种嗜上皮性病毒，其持续感染是导致宫颈癌的重要原因[1-3]。而有关CIN与阴道微生态的关系还不是很明确，与TRAIL、IL-32表达的研究还未见报道。为此，本研究对CIN、阴道微生态、HPV及阴道TRAIL、IL-32的水平进行分析，旨在揭示它们之间的关系，为宫颈癌的防治提供实验依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年9月—2020年9月在临沂市人民医院就诊的172例患者，年龄25～55岁。纳入标准：性生活规律；月经规律；近1个月无阴道病治疗史；无宫颈锥切术史；对本研究知情同意书。排除标准：宫颈腺细胞异常者；妊娠期或哺乳期；生殖器官其他感染性疾病者；免疫功能低下或免疫性疾病患者；恶性肿瘤患者；合并心肺肝等重要脏器功能异常者。

1.2方法 于月经结束后5～7 d内采集标本；样本采集前3 d不同房、坐浴或行阴道冲洗。先行液基薄层细胞(TCT)检查，并在阴道镜下采集宫颈组织进行病理学检查，根据TCT和病理学诊断，诊断为CIN的87例女性作为观察组；TCT结果为无明确诊断意义的鳞状细胞病变，但病理结果为正常的85例作为对照组。

1.2.1阴道微生态检测 常规采集受试者阴道侧壁中上方1/3部位分泌物，0.5 h内于阴道自动检测工作站(江苏硕世生物)检测，人工显微镜(10×40)复核清洁度、菌群密集度、菌群多样性等，判断标准参照《全国临床检验操作规程》第4版。

1.2.2HPV检测常规方法采集宫颈口分泌物标本，采用HPV分型检测试剂盒(凯普生物有限公司)，PCR扩增、杂交法显示高危型HPV亚型14种，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68型。

1.2.3阴道冲洗液细胞因子检测 用0.9%无菌生理盐水5 ml，冲洗宫颈口及阴道，自后穹窿吸出灌洗液，混匀后，3000 r/min、4℃离心5 min，取上清液，ELISA法检测上清液TRAIL浓度(上海森雄科技实业有限公司)及IL-32 浓度(北京万泰德瑞诊断技术有限公司)，严格按照试剂盒说明书进行操作。

2 结果

2.1阴道微生态及HPV检测结果比较 两组阴道微生态各指标及HPV感染率比较均有统计学意义。见表1。

表1 两组阴道微生态及HPV检测结果比较[n(%)]

表2 两组TRAIL和IL-32的表达情况比较

2.2阴道灌洗液细胞因子比较 两组TRAIL、IL-32浓度比较有统计学意义。见表2。

3 讨论

阴道微生态是个非常敏感的系统，正常情况下以乳酸杆菌为主，其他多种微生物并存。在受到内源性和外源性因素的影响下，容易发生改变，从而引起疾病的发生[4-5]。本研究显示，观察组微生态各指标均明显高于对照组，提示其菌群紊乱，乳酸杆菌减少，杂菌增多，阴道有炎症。

HPV是一种人乳头瘤病毒，有上百个亚型，据统计，80%左右的女性一生中会感染HPV病毒，很多感染者在2年内通过机体自身免疫，病毒能够被清除，仅有少部分持续感染，高危亚型HPV的持续感染与CIN及宫颈癌有密切关系[1-3]。本研究显示观察组HPV感染率明显增高。

TRAIL属于肿瘤坏死因子超家族成员，在机体各种组织中广泛存在，其特点是能够诱导病理细胞或病毒感染细胞凋亡，而对正常细胞不诱导凋亡，参与机体的免疫防御功能。IL-32是近年发现的一种细胞因子，在炎症发生过程中起到放大作用，其可能通过放大多核细胞对病原微生物的吞噬和杀伤功能，从而促进释放炎性介质诱导单核细胞向吞噬细胞分化[6]，所以在炎症反应中起正向调节作用。本研究结果表明，观察组TRAIL浓度明显低于对照组，IL-32浓度明显高于对照组。提示CIN改变时，对局部的免疫监控能力下降，炎性变促进了细胞的瘤样改变。

总之，阴道微生态异常导致局部免疫力下降，易致HPV感染，而HPV感染可导致局部上皮发生变化，易引起炎性因子及免疫调控因子改变，这些因素共同促进CIN的发生。因此，可以通过检测阴道微生态、HPV、TRAIL及IL-32水平，进行早期预防及指导治疗。