体外受精-胚胎移植中临床妊娠相关因素分析

葛秀云

(临沂市妇幼保健院，山东 临沂 276000)

近年来，辅助生殖技术不断取得进步，体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization- embryo transfer，IVF)、卵胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic sperm injection，ICSI)、冷冻胚胎移植(Frozen embryo transfer，FET)得到广泛开展，但临床妊娠率较低[1]。因此，如何提高临床妊娠率一直是关注的焦点。有研究表明，临床妊娠率可能与女方年龄、不孕年限、多囊卵巢综合征、子宫畸形、超促排卵方案、促性腺激素用量、子宫内膜厚度等相关。本文回顾性分析本院生殖健康科收治的175例行IVF助孕治疗患者的临床资料，分析其临床妊娠相关因素。

1 资料与方法

1.1一般资料 患者175例，均为本院2018年1月—2019年9月行IVF助孕治疗者，年龄(34.07±5.04)岁，均为鲜胚移植。回顾性收集其年龄、糖链抗原-125(CA-125)、血同型半胱氨酸(HCY)、抗苗勒试管激素(AMH)、促甲状腺素(TSH)、促性腺激素(Gn)用量、不孕年限、用药方案、受精方式、移植日E2、P、内膜厚度及获卵数、2PN数、可用胚胎数、囊胚形成率、移植胚胎数等临床资料。排除标准：卵巢储备功能不良者；多囊卵巢综合征者；子宫内膜异位症者；子宫畸形者；输卵管积水者；本取卵周期无可用胚胎者；反复移植失败者；染色体异常者。共纳入175对夫妇，其中CA-125水平为20.92(15.10～21.98) kU/L，血HCY(9.84±3.09)μmol/L，AMH为2.80(2.35～3.74)ng/ml，TSH为(2.30±1.23)mU/L，不孕年限为2.5(2.50～4.00)年，Gn用量为(41.63±12.13)支(每支75 IU)；长方案助孕83例(47.43%)，拮抗剂方案助孕92例(52.57%)；行常规IVF助孕148例(84.57%)，行ICSI 27例(15.43%)。

1.2方法

1.2.1胚胎的获得 根据患者的年龄、基础窦卵泡、AMH、体重、既往促排卵结果以及既往盆腔手术史采用个体化促排卵方案，包括长方案、拮抗剂方案[2]。待优势卵泡直径≥17 mm以上3个后，采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)或人绒毛膜促性腺激素(HCG)进行扳机，具体剂量根据优势卵泡的多少决定。扳机34～36 h后进行取卵，男方取卵当日手淫法取精，采精前禁欲2～7 d。卵子取出后放置于37℃、6% CO2培养箱中，在取卵后3～4 h或注射HCG后39～40 h授精。选用 Vitrolife 培养系统，受精卵在体外培养 24 h(D2)和48 h(D3)，观察胚胎细胞分裂并按照编号进行详细记录，包括观察时间、细胞数、大小是否均匀、碎片多少、空泡、多核等，并给予胚胎评级。可用胚胎包括1～3级，优质胚胎包括1～2级。冷冻D3胚胎2枚，其余行囊胚培养。D5观察，若有可用囊胚形成，则进行移植或冷冻，否则继续培养至D6。

1.2.2胚胎移植 排除鲜胚移植禁忌后，均选择优质胚胎进行移植，嘱患者憋尿，在腹部超声引导下，临床医师将胚胎与培养液缓慢注入宫腔。移植后14～16 d来院查血HCG，升高者提示生化妊娠，继续黄体支持。移植35 d行超声检查判定是否临床妊娠，超声下见孕囊者为临床妊娠，孕囊位置包括宫内、宫外。排除异位妊娠后，继续黄体支持至孕10～12周，后转产科随诊。

2 结果

2.1临床妊娠结局的单因素分析 175例患者中，未妊娠95例、临床妊娠组80例。两组女方年龄比较有统计学意义，其他指标比较无统计学意义。见表1。

表1 临床妊娠结局的单因素分析

2.2临床妊娠结局的多因素分析 以是否妊娠为因变量，其他为自变量，经多因素Logistic回归显示，只有年龄为影响妊娠的独立因素，其他HCY、Gn用量、获卵数等尚不能证实为临床妊娠结局的独立影响因素。见表2。

表2 临床妊娠的多因素分析

3 讨论

影响临床妊娠的因素包括性别因素，男方因素主要包括精子碎片率、活力、浓度、正常形态率等[3]；女方因素更为复杂，包括卵巢功能、子宫内膜、输卵管等。本研究表明，女方年龄是临床妊娠的独立影响因素，随着年龄增加，临床妊娠率随之下降，其主要机制有以下几点[4]：(1)随着年龄增加，卵巢储备功能下降，对常规促排卵药物反应性下降，导致获卵数下降，而受精、卵裂异常增加，导致最后可用胚胎数下降甚至无胚胎可移植；(2)子宫相关器质性病变随着年龄增加而增加，引起子宫内膜容受性下降，这可能和子宫内膜基底细胞的DNA降低、子宫内膜血流减少、雌孕激素水平下降等相关；(3)内科疾病发生率增加，如高血压、糖尿病等影响胚胎着床、发育；(4)卵子异常核型率增加，随着年龄的增加，在卵子完成减数分裂过程中容易发生异常，从而导致异常核型非整倍体卵子的产生。

在本研究中，现有数据尚不能证实HCY、Gn量、取卵数与临床妊娠之间存在相关性。HCY作为一种由硫醇诱导释放的氧化应激物质，在卵子的成熟和受精过程中起到重要的作用，其水平过低或过高均不利于卵子的发育[5]，其对妊娠结局的影响机制需要进一步探讨。有研究表明获卵数与临床妊娠结局相关[6]，若获卵数<5枚，临床妊娠率显著下降，但获卵数不是越多越好，过多的获卵数也会带来负面影响，本研究中获卵数与临床妊娠结局无显著相关性，需进一步扩大样本量探究其对临床妊娠结局的影响。既往的研究表明，Gn用量对胚胎的非整倍体率无影响，不同Gn量之间的妊娠结局也无统计学差异[7]，和本研究结果一致。

综上所述，年龄是影响IVF助孕临床妊娠的重要因素。在对高龄女性进行IVF助孕治疗时，应告知其相关风险，在遵循相关指南的前提下行个体化治疗。