芩黄颗粒对靶动物猪的安全性试验

潘贵珍 杨绒娟 李召斌 张晓东 周德刚

摘要：目的：研究芩黄颗粒对猪的安全性。试验方法：共设4个组，每组8头猪，分别为空白对照组、1倍推荐剂量组、3倍推荐剂量组、5倍推荐剂量组。各试验组按试验方案连续给予芩黄颗粒15d，每天观察试验猪的精神状态、被毛、采食、粪便和眼睛状况，并分别于给药前、给药结束后1d、给药结束后7d检查各试验组猪血液学指标、血液生化指标；分别于给药结束后1d、给药结束后7d测定尿液学指标，并于给药结束后7d对脏器进行组织病理学观察。结果：给药前、给药结束后1d和给药结束后7d，血液学指标、血液生化指标均在正常范围内；给药结束后1d和给药结束后7d，尿液学指标均在正常范围内；高剂量组的各脏器组织与空白对照组相比，均未见异常病理变化。结论：芩黄颗粒以推荐剂量5倍使用，未观察到毒副作用，说明芩黄颗粒按推荐剂量使用，对猪的安全性良好。

关键词：芩黄颗粒；血液学指标；血液生化指标；安全性；猪

使用中药对动物机体生理机能进行综合调理，在提高机体免疫力、抗病力和抗病毒等方面具有独到之处，可有效防控和治疗疾病，本试验主要是评价芩黄颗粒对猪的安全性，为进一步临床应用提供参考价值。

1试验动物和材料

1.1受试动物

20日龄健康仔猪32头，雌雄各半。

1.2供试药物

芩黄颗粒（商品名：温呼平）：批号：20170502；规格：1，000g：2，132g生药；生产厂家：洛阳惠中兽药有限公司。

1.3主要仪器与试剂

台式高速冷冻离心机：型号为3-16KL，购自德国sigma公司；XFA6130型全自动血液细胞分析仪，购自南京普朗生物医学有限公司；ANI稀释液（生产批号：PN1701），ANI-3D溶血剂（生产批号：PN2701），HB含酶清洗液（生产批号：PB7707），探头清洗液（生产批号：PB9701）均购自南京普朗生物医学有限公司；EON酶标仪，购自美国BioTek公司；优利特尿液分析仪，型号URIT-180，购自桂林优利特医疗电子有限公司；优利特尿试纸条（URIT11A）（货号：56171012），购自桂林优利特医疗电子有限公司；谷草转氨酶（GOT）检测试剂盒（批号：20171010）、谷丙转氨酶（GPT）检测試剂盒（批号：20171011）、尿素氮（BUN）检测试剂盒（批号：20170928）、肌酐（Cr）检测试剂盒（批号：20170926）、总蛋白检测试剂盒（批号：20171011）、白蛋白检测试剂盒（批号：20171011）、总胆红素试剂盒（批号：20171011）、碱性磷酸酶（AKP）检测试剂盒（批号：20171011）、乳酸脱氢酶（LDH）检测试剂盒（批号：20171010）、钙（Ca）检测试剂盒（批号：20171011）、氯（Cl）检测试剂盒（批号：20171011）、钾（K）检测试剂盒（批号：20171011）均购于南京建成生物工程研究所；葡萄糖（GLU）测试盒（批号：20170302147），购于上海荣盛生物药业有限公司。

2试验方法

2.1试验动物分组与处理

动物适应14d后，随机分为4组[1]，每组8头，分别为空白对照组、1倍推荐剂量组、3倍推荐剂量组、5倍推荐剂量组，饲料经粉碎后制备成半破碎料使用。第1组不给药正常饲喂作为空白对照组，第2、3、4组分别以每1kg饲料添加4g芩黄颗粒、12g芩黄颗粒、20g芩黄颗粒进行饲喂，每天饲喂4次，上下午各2次，分组及具体给药方法见表1所示。试验猪群自由饮水，连续给药15d，每天观察试验猪反应情况（精神状态、被毛、采食、粪便和眼睛状况）等，连续观察至给药结束后7d。

给药前、给药结束后1d、给药结束后7d对各组试验猪采血，每头猪采血4～5mL，分成两份，一份注入抗凝管内制备抗凝血，用于血常规检查，另一份不抗凝，于注射器内放置，用于血清分离，进行血清生化指标检测。

2.2观察指标

2.2.1临床观察试验期间每日观察猪群，记录各组猪群的精神状态、被毛、采食、粪便和眼睛状况。并于给药前、给药结束后1d、给药结束后7d对各组动物进行称重，记录动物的体重。

2.2.2粪便观察每天观察粪便是否有血液或其它出血迹象、颜色和稠度、黏液和其它异常情况。

2.2.3尿液分析分别于给药结束后1d、给药结束后7d用膀胱穿刺方法采取猪尿液[2]，通过肉眼观察尿液颜色，使用尿液分析仪检测尿液比重、pH、亚硝酸盐、葡萄糖、VC、隐血、蛋白质、胆红素、尿胆原、酮体和白细胞。

2.2.4血液学指标测定分别于给药前、给药结束后1d、给药结束后7d对各组试验猪采血，进行血常规检查。

2.2.5血液生化指标检测[3]分别于给药前、给药结束后1d、给药结束后7d对各组试验猪前腔静脉采血，分离血清，按试剂盒说明书要求检测谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、碱性磷酸酶（AKP）、总胆红素、血糖、氯、钾、钙、血清总蛋白、白蛋白、乳酸脱氢酶（LDH）。

2.2.6解剖学观察给药结束后7d对各组试验猪进行剖检，观察其心、肝、脾、肺、肾等实质器官的色泽、质地、肿块等，并观察空腔脏器黏膜的完整性及色泽等。

2.2.7组织病理学观察给药结束7d时取空白对照组和5倍推荐剂量组的猪胃、肠、心、肝、脾、肺、肾、肠系膜淋巴结、卵巢（睾丸）和胰腺制备组织病理切片，进行组织病理学观察。

2.3结果分析

所测数据以平均数±标准差表示，用SPSS 19.0软件进行统计分析，结果用“平均值±标准差”表示，显著性用P值表示，其中P≤0.05表示差异显著，P≤0.01表示差异极显著。组间显著性检验采用Duncans多重比较。