30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂高效液相色谱分析方法

朱 峰，吴 琼，廖国会，陈湘燕，秦立新，于宁波，陈明贵，陈才俊*

（1.贵州省农业科学院植物保护研究所，贵阳550009；2.贵州省农药检定管理所，贵阳550001）

甲酰胺基嘧磺隆通用名称为foramsulfuron，化学名称为1-(4,6-二甲氧基嘧啶-2基)-3-[2-(二甲基氨基甲酰基)-5-甲酰胺基苯基磺酰基]脲，由拜耳公司于2002年开发的磺酰脲类除草剂[1]，主要用于玉米等谷物杂草防除，对一年生或多年生禾本科和阔叶杂草的防治效果显著[2-3]。甲酰胺基嘧磺隆登记的产品总共有2个，其中包括1个可分散油悬浮剂及1个原药，当前没有公开发表的分析方法。新研发的30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂也没有相应的分析方法。此外，目前尚无相应的国家标准或行业标准，各地药检机构不能进行有效的监管，检测机构没有相应的方法来进行检测。因此，开展甲酰胺基嘧磺隆农药产品中分析方法的研究，可为标准的制定提供数据参考。

当前，有文献报道了采用高效液相色谱-质谱联用的方法对甲酰胺基嘧磺隆的残留进行分析[4]，尚无甲酰胺基嘧磺隆产品中有效成分分析方法的报道。高效液相色谱法广泛用于农药产品质量的检测分析，具有良好的分离和定量效果[5]。因此，本文采用高效液相色谱法对甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂的含量进行分析，所建立的分析方法具有较好的分离效果，同时具有较好的准确度和精密度，能够满足甲酰胺基嘧磺隆定量分析的要求，可为甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂质量控制和该产品分析方法标准的建立提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器设备

Agilent HPLC 1260高效液相色谱仪（可变波长检测器），安捷伦科技（中国）有限公司；AS5150A超声波清洗器，天津奥特赛恩斯仪器有限公司；XSR105十万分之一电子天平，梅特勒-托利多国际贸易（上海）有限公司；0.45μm滤膜。

1.2 试剂

甲醇（色谱纯）；超纯水；磷酸（分析纯）；磷酸溶液：Ψ（磷酸∶水）＝5∶1 000；甲酰胺基嘧磺隆标样：已知质量分数，ω≥98.0%；甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂。以上试剂均由国家农药质量监督检验中心提供。

1.3 色谱操作条件

色谱柱：250 mm×4.6 mm（i.d.）不锈钢柱，内装Agilent 5 TC C18、5μm填充物（或具有同等效果的色谱柱）；流动相：Ψ（甲醇∶磷酸溶液）＝50∶50，经滤膜过滤，并进行脱气；柱温：30℃（±2℃）；检测波长：232 nm；流速：1.0 mL/min；进样体积：5μL。

在上述色谱操作条件下，甲酰胺基嘧磺隆保留时间约13.0 min（图1、2）。

图1 甲酰胺基嘧磺隆标准品高效液相色谱图

图2 甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂高效液相色谱图

1.4 溶液配制

1.4.1 标准品溶液的配制

称取0.02 g（精确至0.000 01 g）甲酰胺基嘧磺隆标准品于100 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇，超声波振荡5 min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀。

1.4.2 试样溶液的配制

称取含0.02 g（精确至0.000 01 g）甲酰胺基嘧磺隆的试样于100 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇，超声波振荡5 min，冷却至室温，用甲醇稀释定容至刻度，摇匀，过膜。

1.5 测定方法

等待仪器稳定之后，在所建立的色谱分析条件下，待相邻2针样品的峰面积变化小于1.2%后，按照标准品、样品、标准品、样品的顺序进样检测。

1.6 计算方法

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中甲酰胺基嘧磺隆峰面积分别进行平均。试样中甲酰胺基嘧磺隆的质量分数按公式（1）计算。

式中：A1为甲酰胺基嘧磺隆标准品峰面积的平均值，mAU·s；A2为试样溶液中甲酰胺基嘧磺隆峰面积的平均值，mAU·s；m1为甲酰胺基嘧磺隆标准品的质量，g；m2为甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂质量，g；P为试样中甲酰胺基嘧磺隆的质量分数，%；ω为甲酰胺基嘧磺隆标准品质量分数，%。

2 结果与分析

2.1 试验条件的选择

甲酰胺基嘧磺隆的紫外光谱图如图3所示，从图中可以看到甲酰胺基嘧磺隆在波长约210～260 nm都有较好的吸收，在波长232 nm处灵敏度较高，杂质干扰较少，能够满足分析的要求，故将检测波长确定为232 nm。

图3 甲酰胺基嘧磺隆的紫外吸收光谱图

方法选择常用的C18反相色谱柱，选择甲醇作为溶剂，并以甲醇和磷酸溶液（甲醇∶磷酸溶液=1 000∶5）作为流动相，所得的分离效果和峰形较好。将流动相按不同比例在色谱柱上进行试验，随着甲醇比例的增加，保留时间减小，当甲醇与磷酸溶液比例达到50∶50时，杂质分离效果比较好，最终选择Ψ（甲醇∶磷酸溶液）=50∶50作为流动相，流速1.0 mL/min。该条件下，甲酰胺基嘧磺隆色谱峰峰形较好，与杂质能完全分离，具有良好的精密度和准确度，并且分析时间较短，提高了工作效率。

2.2 线性关系试验

按1.4.1标样溶液的制备方法，秤取0.05 g（精确至0.000 1g）标准品，用甲醇溶解定容50 mL作为母液，将甲醇稀释配制5个不同浓度的有效成分线性相关溶液，分别标记为STD1至STD5。在上述操作条件下，待仪器稳定后，按照STD1至STD5的顺序测定每个溶液中甲酰胺基嘧磺隆的峰面积，取2次测定的平均结果。以甲酰胺基嘧磺隆质量浓度和峰面积结果分别为横坐标和纵坐标绘制标准曲线，结果见表1、图4。

由表1和图4可见，当甲酰胺基嘧磺隆质量浓度在51.2～614.6 mg/L（进样体积为5μL），与相应的甲酰胺基嘧磺隆峰面积之间呈现良好的线性关系，计算得回归方程为y=14.688x＋7.586 9，r=0.999 9，完全可以满足定量分析要求。本方法中，甲酰胺基嘧磺隆标样质量浓度为204.9 mg/L（进样体积为5μL）。

表1 甲酰胺基嘧磺隆线性范围的测定

图4 甲酰胺基嘧磺隆峰面积与质量浓度关系图

2.3 方法精密度试验

按1.4.2试样溶液的制备方法配制5个30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂的精密度溶液，含量分别为：33.39%、33.72%、33.60%、33.06%、34.04%。5个重复样品的平均值为33.56%，标准偏差为0.36%，变异系数为1.09%。

2.4 方法准确度试验

称取含0.01 g（精确至0.000 01 g）甲酰胺基嘧磺隆的30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂于100 mL容量瓶中，再加入甲酰胺基嘧磺隆标样0.01 g（精确至0.000 01 g），采用以上分析方法得到的甲酰胺基嘧磺隆的平均回收率为102.11%（表2）。

表2 分析方法准确度试验结果

3 结 论

试验结果表明，利用所建立高效液相色谱分析方法对30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂进行定量分析，该方法的平均回收率为102.11%，具有较高的准确度和精密度，线性关系良好，符合NY/T 2887—2016《农药产品质量分析方法确认指南》[6]要求，并且操作简便、快速，是甲酰胺基嘧磺隆水分散粒剂产品进行质量检测的理想方法。