食管鳞癌患者肿瘤干细胞标志物CD133、Musashi-1的表达及临床意义

周 虹，钱金锋

（南通市第一人民医院病理科，江苏 南通 226001）

食管癌是一种发病率较高的消化系统恶性肿瘤。全世界每年约有30 万人死于食管癌。我国是食管癌的高发国家之一。有报道称，我国每年新发食管癌患者的数量和死亡食管癌患者的数量占全球一半以上[1]。此病的病理类型有鳞状细胞癌（鳞癌）、腺癌、小细胞癌、大细胞癌、腺鳞癌、未分化癌等，其中鳞癌和腺癌较为多见。近年来的研究表明，恶性肿瘤作为一类异质性疾病，主要是由不同的细胞亚群构成，且不同细胞亚群的成瘤能力、对抗癌药物的敏感性及侵袭能力等差异显著。作为恶性肿瘤发生、发展的基础，肿瘤干细胞具有无限增殖及更新的能力，它也是导致肿瘤细胞耐药、复发及转移的重要因素。CD133 是一种独特的肿瘤干细胞标志物。既往的研究发现，CD133 与血液系统恶性肿瘤、消化系统恶性肿瘤的发生、发展密切相关[2]。Musashi-1 是一种神经RNA 结合蛋白，其在早期的成体神经干细胞中有一定的表达。本文主要是探讨食管鳞癌患者肿瘤干细胞标志物CD133、Musashi-1 的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018 年1 月至2019 年12 月期间我院收治的68例食管鳞癌患者作为研究对象。其纳入标准是：病情经病理学检查得到确诊[3]；了解本研究的方法、目的及相关的注意事项；病历资料完整。其排除标准是：存在严重的心、肝、肾、脑等器官功能障碍；合并有精神疾病或其他恶性肿瘤；存在沟通障碍或认知功能障碍；处于妊娠期或哺乳期。在这68 例患者中，有男性患者53 例，女性患者15 例；其年龄为47 ～84 岁，平均年龄为（67.92±4.85）岁；其中，肿瘤病理分期为Ⅰ期的患者有21 例，为Ⅱ期的患者有23 例，为Ⅲ期的患者有14 例，为Ⅳ期的患者有10 例。

1.2 方法

1.2.1 试剂 抗人CD133 单克隆抗体（由上海抚生实业有限公司生产），鼠抗人Musashi-1 单克隆抗体（由青岛捷世康生物科技有限公司生产），检测试剂盒（由上海瑞楚生物科技有限公司生产）。

1.2.2 检测方法 在这68 例患者入院后，分别采集其食管鳞癌组织、癌旁黏膜增生组织及正常食管黏膜组织，然后采用免疫组织化学二步法检测这三类组织中肿瘤干细胞标志物CD133 和Musashi-1 的表达水平，并计算其阳性表达率。

1.3 观察指标

比较这68 例患者食管鳞癌组织、癌旁黏膜增生组织及正常食管黏膜组织中CD133 和Musashi-1 的阳性表达率。比较这68 例患者中不同病理分期的患者食管鳞癌组织中CD133 和Musashi-1 的阳性表达率。

1.4 统计学方法

用SPSS 20.0 软件处理本研究中的数据，计量资料用均数±标准差（±s）表示，用t检验，计数资料用%表示，用χ²检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 这68 例患者不同组织中CD133 及Musashi-1 的阳性表达率

这68 例患者正常食管黏膜组织中CD133 和Musashi-1的阳性表达率均低于其癌旁黏膜增生组织和食管鳞癌组织中CD133 和Musashi-1 的阳性表达率，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 这68 例患者不同组织中CD133 及Musashi-1 的阳性表达率[%（例）]

2.2 这68 例患者中不同病理分期的患者食管鳞癌组织中CD133及Musashi-1 的阳性表达率

在这68 例患者中，Ⅳ期食管鳞癌患者食管鳞癌组织中CD133 和Musashi-1 的阳性表达率均高于Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期食管鳞癌患者，差异有统计学意义（P＜0.05）；Ⅲ期食管鳞癌患者食管鳞癌组织中CD133 和Musashi-1 的阳性表达率均高于Ⅰ期、Ⅱ期食管鳞癌患者，差异有统计学意义（P＜0.05）；Ⅱ期食管鳞癌患者食管鳞癌组织中CD133 和Musashi-1 的阳性表达率均高于Ⅰ期食管鳞癌患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2。

表2 这68 例患者中不同病理分期的患者食管鳞癌组织中CD133 及Musashi-1 的阳性表达率[%（例）]

3 讨论

食管癌是指发生于食管上皮细胞的恶性肿瘤。早期食管癌患者的症状不明显，诊断其病情的难度较大。多数食管癌患者的病情在得到确诊时已发展至中晚期，对其进行治疗的难度较大，其预后较差。食管癌的病理类型有鳞癌、腺癌、小细胞癌、大细胞癌等，其中鳞癌和腺癌较为多见。临床研究表明，人体的正常干细胞具有反馈调节机制，在细胞的新老更替中起到维持平衡的作用，且其具备基因保护功能，能避免DNA 错误积累、复制现象的发生。与正常干细胞相比，肿瘤干细胞不仅能完成自我更新及增殖，还具备分化成熟能力，具有完整的自我调节、自我更新的信号路径。随着肿瘤干细胞自我更新频率的加快，恶性肿瘤进展的速度会进一步提升。CDl33 是一种分子质量为120 kDa 的跨膜蛋白，属于Prominin 家族成员之一，有两个同源性抗原CDl33.1 和CDl33.2。CDl33 是由865 个氨基酸组成的5 次跨膜糖蛋白，基因定位于4p15.32，它是造血干细胞、血液肿瘤和内皮祖细胞的传统标志物[4]。CDl33.1可选择性地在骨髓和外周血的造血干细胞、内皮祖细胞中表达，但其在成熟的内皮细胞中无表达。近年来的研究发现，CDl33.1 在胎脑及成年人的骨骼肌中有一定的表达。CDl33.2 主要集中于胎肝和胎肾中，成年人的肝肾系统及胰腺中无CD133.1 表达。CDl33+ 细胞具有多向分化的潜能。有研究证实，CDl33+ 细胞在不同的培养条件下可分化为心肌细胞、内皮细胞、神经细胞和成骨细胞等。Musashi-1 是一种RNA 结合蛋白，包括362 个氨基酸，其N 端存在2 个保守的RNA 结合区[5]。Musashi-1 在神经元前体细胞及胶质前体细胞中有一定的表达。有学者研究Musashi-1 在小鼠神经系统中的表达，发现Musashi-1 可作为小鼠神经干细胞的分子标记物。有研究发现，Musashi-1 是正常干细胞累积突变的结果，其在恶性肿瘤的形成中具有一定的促进作用，可将其作为肿瘤干细胞的作用靶点。

本研究的结果显示，食管鳞癌患者癌旁黏膜增生组织和食管鳞癌组织中肿瘤干细胞标志物CD133 和Musashi-1的阳性表达率较高，且此病患者食管鳞癌组织中CD133 和Musashi-1 的阳性表达率与其肿瘤的病理分期呈正相关。