糖尿病足感染患者足部分泌物微生物培养及耐药性分析

史艳玲

(西平县人民医院 检验科，河南 驻马店 463900)

糖尿病足(diabetic foot，DF)是糖尿病晚期患者最严重的并发症，且近年来发病率逐年升高。DF多由于细菌感染引起，难以控制，迁延不愈，治疗不及时会影响患者的生命安全[1]。目前临床上常采用抗菌药物治疗，但由于病原菌种类繁多，对抗菌药物耐药性不同，盲目实施治疗，会增加双重感染风险。对DF感染患者进行足部分泌物微生物培养，可快速确定致病菌类型，通过耐药性分析有利于准确选择有效抗生素，增强抗感染效果，阻止病情发展[2]。本研究检测足部分泌物致病菌类型并分析其耐药性，具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年3月至2019年3月西平县人民医院收治的83例DF感染患者作为研究对象。其中男45例，女38例；年龄45～72岁，平均(58.63±6.59)岁；糖尿病病程4～16 a，平均(9.52±2.72)a；足部感染时间20 d～2 a，平均(1.03±0.45)a；Wagner分级0级8例，1级22例，2级29例，3级 19例，4级5例。本研究经西平县人民医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 选取标准(1)纳入标准：①符合《中国糖尿病足诊治指南》中的诊断标准[3]；②7 d内未接受过抗菌药物或激素类药物治疗；③签署知情同意书。(2)排除标准：①外伤性溃疡；②心、脑、肾等器官功能障碍；③合并恶性肿瘤；④合并内分泌系统疾病；⑤自身免疫功能障碍；⑥合并全身感染。

1.3 方法(1)足部分泌物取样：使用生理盐水冲洗清除表面坏死组织及表面焦痂，无菌棉拭子擦取分泌物，置于无菌试管中，并于1 h内送至微生物实验室做微生物培养。(2)微生物培养：将病原菌接种于广东环凯微生物科技有限公司生产的巧克力平板及血平板上，置于37 ℃二氧化碳培养箱中孵育1 d后取出，采用法国生物梅里埃公司的VITEK-2型Compact全自动微生物鉴定仪及其配套试剂进行检测。(3)耐药性实验：采用将ATCC25922大肠埃希菌及ATCC27853铜绿假单胞菌作为质控菌株，采用K-B纸片琼脂扩散法进行药敏试验。

1.4 统计学方法采用SPSS 22.0统计软件处理数据，计数资料以频数(n)和构成比(%)表示。

2 结果

2.1 DF感染足部分泌物微生物种类83例DF感染患者足部分泌物中共检出病原菌98株，其中革兰阴性菌47株，革兰阳性菌51株。其中占比较高者有大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、溶血葡萄球菌。见表1。

表1 DF感染足部分泌物微生物种类(n=98)

2.2 DF感染足部分泌物中不同病原菌耐药性分析革兰阴性菌中，大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑林的耐药率为88.24%、48.82%；阴沟肠杆菌对头孢噻肟、头孢他啶的耐药率为80.00%、70.00%；变形杆菌对头孢唑林、头孢噻肟、头孢他啶的耐药率为75.00%、37.50%、37.50%。革兰阳性菌中，金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、红霉素的耐药率为92.00%、92.00%、80.00%；粪肠球菌对左氧氟沙星、青霉素、氨苄西林的耐药率为25.00%、16.67%、16.67%；溶血葡萄球菌对青霉素、苯唑西林的耐药率为50.00%、37.50%。见表2。

表2 主要革兰阴性菌耐药性分析

表3 主要革兰阳性菌耐药性分析

3 讨论

DF感染会引起局部组织溃疡、坏死，诱发急性心脑血管疾病，累及患者肢体可能会导致截肢，扩散至全身可能会诱发脓毒症。目前多采用抗菌药物治疗，但抗菌药物的使用具有盲目性，且病原菌耐药性逐渐增强[4]。

抗菌药物能有效减轻DF患者炎症反应及感染状态，防止病情进一步恶化发展。但临床对于抗菌药物的选择较为困难，对治疗效果影响较大。乐忠宏等[5]研究表明，临床对于DF的治疗，需进行相关药敏试验并根据药敏试验结果合理调整用药，减少耐药发生，有效促进患者足创面愈合，从而降低DF的致残率，改善生活质量及预后。本研究对83例DF感染患者足部分泌物进行微生物培养，共检出病原菌98株，其中革兰阴性菌47株，革兰阳性菌51株，以大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌为主，说明DF感染患者致病菌复杂多样，且以革兰阴性菌为主，需通过多种抗菌药物联合治疗，对合理准确用药具有一定挑战性[6]。由于目前抗生素在临床应用广泛，且使用过程存在一定盲目性，从而导致抗生素耐药性增高，治疗难度提升。临床可进行病原菌耐药性实验，合理分析不同抗菌药物的敏感性及耐药性。本研究结果显示，革兰阴性菌中，大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、变形杆菌对氨苄西林、头孢唑林等药物耐药率均超过30%，说明治疗革兰阴性菌相关性感染时，应尽量避免选择上述抗菌药物，并推荐选择哌拉西林等耐药性较高的抗菌药物；而革兰阳性菌中，金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、溶血葡萄球菌对青霉素、氨苄西林等抗菌药物耐药性较高，表明治疗革兰阳性菌相关感染时，应尽量避免选择上述抗菌药物，防止耐药性进一步提升。耐药性的产生原因多为致病菌能产生水解酶及钝化酶，破坏或修饰抗菌药物，并改变抗菌药物作用位点及靶位结构，使抗菌药物活性减弱或失效[7]。药物外排泵系统mRNA表达增加，可增强主动外排药物作用，减少达到靶细胞抗菌药物药量，减弱抑菌或杀菌作用。另外，细菌细胞内存在双链DNA组成的质粒，可自我复制，稳定遗传，可能会自身携带耐药基因，增强细菌耐药性[8]。因此，DF感染患者需进行微生物培养确定致病菌类型，并根据耐药性结果，选择抗菌药物，有效防止抗菌药物的滥用，同时提高治疗效果，严重感染时考虑抗生素联合应用。

综上所述，DF感染患者足部分泌物微生物培养出的病原菌种类较多，这些病原菌对抗菌药物的耐药性也不尽相同，通过分许其耐药性，可为临床使用抗菌药的选择提供依据，避免药物滥用，提高治疗效果，改善患者预后。