酵母硒对豆粕替代鱼粉的作用效果研究——以大口黑鲈饲料为例

周绍红, 方怀义, 尹艳镇, 杨正宽, 张艳秋

(1.广西大学 动物科学技术学院， 广西 南宁 530000； 2.北部湾大学 海洋学院， 广西 钦州 535011；3.北部湾富硒产业研究院， 广西 钦州 535011; 4.钦州市生物废弃物资源富硒功能化利用重点实验室， 广西 钦州 535011)

大口黑鲈(Micropterussalmoides)，俗称加州鲈，隶属于鲈形目，太阳鱼科，黑鲈属，是典型肉食性淡水鱼类。大口黑鲈原产于美国加利福尼亚州，因其生长速度快、抗病力强、耐活体运输、肉质鲜美、营养丰富，现已成为我国淡水养殖的重要经济鱼类[1-2]。豆粕是优质廉价的饲料原料，作为鱼粉的替代品已广泛应用于水产饲料中。然而，豆粕含有多种抗营养因子，硒含量低，会影响动物对营养物质的消化和吸收[3-4]。酵母硒(Selenium yeast)是一种高品质有机硒，其毒副作用小、生物利用率高[5-6]，能够提高水产动物生长性能和饲料转化率[7]、提高机体抗氧化能力[8]和增强免疫力[9-10]。饲料中硒缺乏或过量都会抑制鱼类的生长[11-12]。本试验在大口黑鲈幼鱼饲料中添加酵母硒，以《中华人民共和国农业部公告第1224号》中饲料硒含量最高推荐剂量(0.5 mg/kg)的约10倍添加量(4.8 mg/kg)作为试验最高添加量，探究其在大口黑鲈幼鱼饲料中的作用效果。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用大口黑鲈幼鱼鱼苗购自佛山市三水白金水产种苗有限公司；酵母硒购自安琪酵母股份有限公司，酵母硒中硒的质量分数为2 400 mg/kg；鱼粉、菜粕、豆粕和血粉等饲料原料购自广西澳华农牧科技有限公司。

1.2 试验设计与分组

试验以饲料中鱼粉的质量分数为32%作对照组，以饲料中鱼粉的质量分数为16%，并分别添加0、100、200、400、600、800、1 000、2 000 mg/kg酵母硒作试验组，分别命名为C、Se0、Se0.24、Se0.48、Se0.96、Se1.44、Se1.92、Se2.4和Se4.8组。各组饲料中硒的质量分数分别为0、0、0.24、0.48、0.96、1.44、1.92、2.4、4.8 mg/kg，各组饲料等氮、等能。将原料粉碎、过40目筛，饲料加工配制参考文献[13]的做法，饲料贮存在-20 ℃冰箱中备用。饲料配方及风干后质量见表1，营养组成见表2。

表1 实验饲料配方及风干后质量

表2 每100 g实验饲料的营养组分

1.3 试验方法与饲养管理

养殖试验在北部湾大学海洋学院水产养殖室进行。共设置9个实验组，每组3个平行。实验开始前，鱼苗停喂1 d，挑选规格相近的健康鱼苗并随机分组，每组25尾鱼，共计675尾，分别放入27个养殖桶内，鱼苗初始体质量为(8.35±0.05)g，养殖桶为玻璃钢材质，容积为0.3 m3。

试验期间，每天的8:00和16:00饱食投喂，投喂量为各组鱼体质量的3%左右，每天根据天气、水温、鱼苗的摄食情况和生长情况适当调整。每天记录各实验组摄食量、水温和鱼体活动的情况，发现死鱼及时称重记录。试验期间保持自然光照，养殖系统保持水温在27.0～30.0 ℃、溶氧为6.0～6.5 mg/L、pH为7.5～8.0。养殖持续28 d。

1.4 样品处理与测定方法

试验结束前，停止喂食24 h，将每个养殖桶的鱼苗全部捞出，计数并称质量。从各组随机抽取3尾鱼，测量其体重、体长、内脏团质量和肝脏质量，另取5尾鱼，称重后装进样品袋密封，置于-20 ℃的冰箱中保存，用于后期测定全鱼成分。全鱼经在高压灭菌锅125 ℃下蒸煮20 min后在烘箱中105 ℃下烘干，粉碎后过40目样品筛，充分拌匀后装进样品袋密封保存，分别测定全鱼水分(AOAC法)、粗蛋白质(凯氏定氮法)、粗脂肪(石油醚抽提法)和灰分(550 ℃灼烧法)。各组另取肝胰脏和背侧肌肉冷冻干燥后保存，用于测定肝胰脏和肌肉中的硒含量，测定时称取均匀的样品置于50 mL聚四氟乙烯消化管中，加入10 mL的优级纯浓硝酸，于微波消解仪(CEM-MARS-5 XPRESS)中180 ℃时消化30 min。冷却后取出，移到50 mL比色管中，用20 mL的超纯水分两次洗涤消化管，合并溶液，用5%的优级纯硝酸定容至50 mL，于ICPMS(Agilent 7 900)中进行检测。

1.5 计算方法与数据分析

实验样品鱼的增重(WG,g/fish)、成活率(SR,%)、摄食率(FI，%/day)、饲料转化率(FCR，g/g)、特定生长率(SGR，%/day)、肥满度(CF，g/cm3)、肝体比(HSI，%)、脏体比(VSI，%)、饲料氮沉积率(NRE，%)、饲料氮废物排放[TNW，g·N/(kg·fish·gain)]按如下公式计算：

m=Wt/Nt-W0/N0

(1)

SR=100×(Nt/N0)

(2)

FI=100×I/[(W0+Wt+Wd)/2×t]

(3)

FCR=I/(Wt-W0+Wd)

(4)

SGR=100×[ln(Wt/Nt)-ln(W0/N0)]/t

(5)

(6)

HSI=100×Wl/Ws

(7)

VSI=100×Wv/Ws

(8)

NRE=100×(Wt×CNt-W0×CN0+Wd×CN0)/(I×CNf)

(9)

TNW=1 000×(I×CNf)×(1-NRE/100/(Wt-W0+Wd)

(10)

式中，I为每个养殖桶投喂饲料的质量(g)，W0和Wt分别为实验开始和结束时每个养殖桶内实验鱼的总质量(g)，Wd为每个养殖桶生长养殖实验过程中死鱼的重量(g)，t为实验持续的时间(d)，Ws、Ls、Wv和Wl分别为实验取样鱼的体质量(g)、体长(cm)、肝质量(g)和内脏质量(g)，N0和Nt为实验开始和结束时每个养殖桶内鱼的数量(尾)，CN0和CNt分别为实验开始和结束时鱼体的氮含量(g)，CNf为饲料氮质量(g)。

实验数据采用Excel2013软件进行处理，通过SPSS22.0软件进行单因素方差分析，所有以百分数表示的数据先经反正弦转换后再进行方差分析。所得数据用平均值±标准误差表示，若组间差异显著，采用Duncan test法进行多重比较，差异显著水平为P<0.05。

2 结果与分析

2.1 大口黑鲈幼鱼的生长性能

由表3可知，各组大口黑鲈幼鱼成活率差异不显著(P>0.05)，C组的末均重、增重和特定生长率与Se0.48组差异不显著(P>0.05)，但明显低于其余各组(P<0.05)；随着饲料中酵母硒含量的增加，各试验组的末均重、增重和特定生长率呈先升高后降低趋势；除对照组外，各组间的末均重、增重和特定生长率均无显著差异(P>0.05)。

表3 大口黑鲈幼鱼的初均重、末均重、增重、成活率和特定生长率状况

2.2 大口黑鲈幼鱼的饲料利用率和饲料氮废物排放

由表4可知， C组的摄食率与Se0.48和Se0.96两组的差异不显著，但显著低于其余各组(P<0.05)；C组的饲料转化率与Se0.48组的差异不显著，但显著高于其他各组(P<0.05)；Se0.48组的饲料转化率显著高于Se0.24、Se1.44和Se1.92组(P<0.05)，其余各组间的饲料转化率无显著差异(P>0.05)。各组间的饲料氮沉积效率无显著差异(P>0.05)。豆粕替代50%鱼粉对大口黑鲈幼鱼饲料氮废物排放无显著影响；随着饲料中酵母硒含量的增加，饲料氮废物排放无规律性变化，Se1.92组的饲料氮废物排放最高，Se1.44组的最低，最高组是最低组的1.21倍，各组间无显著性差异(P>0.05)。

表4 大口黑鲈幼鱼的摄食率、饲料利用率和饲料氮废物排放情况

2.3 大口黑鲈幼鱼的形体指数

由表5可知，豆粕替代饲料中50%的鱼粉后，大口黑鲈幼鱼的肥满度、脏体比和肝体比均有所降低，且肝体比降低显著(P<0.05)；随着酵母硒含量的增加，各组大口黑鲈幼鱼的肥满度和脏体比均无显著差异(P>0.05)，Se0.48组的肝体比明显高于其余各组(P<0.05)。

表5 大口黑鲈幼鱼的肥满度、脏体比和肝体比状况

2.4 大口黑鲈幼鱼的全鱼组成

由表6可知，用豆粕替代饲料中50%的鱼粉后，各组大口黑鲈幼鱼的全鱼水分、粗蛋白质和灰分质量含量均无显著影响，粗脂肪质量含量显著升高(P<0.05)；随着酵母硒质量含量的增加，各组的粗蛋白质和粗脂肪的质量含量无显著差异；Se0.24组的水分质量含量显著低于Se0.48和Se1.92组(P<0.05)；Se0和Se0.48组的灰分显著低于Se0.24、Se0.96、Se1.44、Se1.92、Se2.44和Se4.8组(P<0.05)，其余各组间的差异不显著。

表6 大口黑鲈幼鱼的全鱼组成情况单位：%

2.5 大口黑鲈幼鱼的肌肉和肝胰脏硒含量

如表7所示，用豆粕替代饲料中50%的鱼粉后，大口黑鲈幼鱼肌肉和肝脏中硒的质量含量无显著差异；随着酵母硒质量含量的增加，Se0.48组肌肉中硒的质量含量显著低于Se1.92、Se2.4、Se4.8组(P<0.05)，Se4.8组肌肉中的硒质量含量与Se1.92和Se2.4无显著差异，但显著高于其余各组(P<0.05)；Se4.8组的肝胰脏中硒质量含量显著高于其余各组(P<0.05)。

表7 大口黑鲈幼鱼的肌肉和肝胰脏硒含量单位：mg·kg-1

3 讨论

3.1 酵母硒和豆粕对大口黑鲈幼鱼的生长性能和饲料利用率的影响

豆粕替代鱼粉水平因豆粕类型不同而有所差异，骆军宁[14]用脱脂豆粕替代鱼粉，当比例超过13%时，随着替代比例的升高，大口黑鲈的生长性能逐渐下降。王新霞[15]在加州鲈饲料中添加10%的发酵豆粕，能显著地提高加州鲈的生长性能。在本试验中用豆粕替代加州鲈饲料中的鱼粉，将鱼粉含量降低至16%，对大口黑鲈幼鱼的生长性能未产生不良影响。在此基础上添加酵母硒对其增重无明显促进作用。随着饲料中豆粕含量的增加，大口黑鲈幼鱼的摄食率逐渐升高，饲料转化率变低，与陈乃松等[16]的研究结果一致。郭正富等[17]的研究表明，鲈鱼的增重率、特定生长率随着饲料中硒质量含量的升高呈先升高后降低的趋势。在本试验中，随着饲料中酵母硒质量含量的增加，各组大口黑鲈幼鱼的生长性能、增重、特定生长率和饲料氮废物排放量均无显著差异。这与龙萌[6]和许友卿[18]的研究结果一致。但最高组的饲料氮废物排放量比最低组的高约21%，表明在一定范围内，高含量的酵母硒会降低大口黑鲈幼鱼对饲料中蛋白质的吸收和利用，从而增加饲料氮废物的排放量，加重对养殖水环境的污染。

3.2 酵母硒和豆粕对大口黑鲈幼鱼全鱼组成的影响

饲料中不同硒的质量含量对不同鱼类全鱼体组成的影响存在差异[19]，添加酵母硒对大口黑鲈具有一定的脂肪代谢促进作用[20]、对鲫鱼全鱼体组成无显著影响[21]。本试验中，用豆粕替代50%的鱼粉后，对大口黑鲈幼鱼全鱼体水分、粗蛋白质和灰分的含量均无显著影响，但粗脂肪的含量显著升高；随着酵母硒质量含量的增加，全鱼体粗蛋白质和粗脂肪的含量无显著差异。该试验结果与酵母硒对团头鲂[6]、鳡鱼[18]的影响结果基本一致。

3.3 酵母硒和豆粕对大口黑鲈幼鱼肌肉和肝胰脏中硒含量的影响

硒作为机体所必需的微量元素，是多种酶的活性中心，对生物体免疫系统的调节和生理生化代谢过程起着重要作用[2,22]。肝胰脏作为鱼类重要的免疫和代谢器官，肝胰脏中的硒含量间接反映鱼类的免疫能力和代谢水平。本试验中，随着饲料中酵母硒含量的增加，各试验组的加州鲈肝体比呈先增加后降低的趋势，表明酵母硒会影响大口黑鲈幼鱼肝胰脏的发育，且肝胰脏中硒的含量随着硒剂量的增加而逐渐增加，与郭正富等[17]的研究结果相似。本试验中，大口黑鲈幼鱼肝胰脏硒的含量明显高于肌肉中硒的含量，表明大口黑鲈幼鱼体内硒累积的主要部位在肝胰脏。这与陈春秀等人[23]对半滑舌鳎的研究结果一致。

4 结论

综上所述，豆粕替代部分鱼粉可将大口黑鲈幼鱼饲料中鱼粉的质量含量降至16%，添加酵母硒不能显著地提高在大口黑鲈幼鱼饲料中以豆粕替代鱼粉的效果。