骨髓细胞形态、细胞化学染色及骨髓活检切片联合检测在低原始细胞骨髓增生异常综合征与溶血性贫血鉴别诊断中的价值

农树红

（中国人民解放军联勤保障部队第926 医院 云南红河 661600）

前言

骨髓增生异常综合症是一种骨髓造血干细胞恶性克隆性疾病，若不能及早进行干预和治疗，极易恶化成白血病，给患者带来巨大的痛苦甚至夺取患者的生命[1]，因此，对其进行准确的诊断是非常有必要的。临床用以诊断骨髓增生异常综合症的方法主要依靠骨髓细胞形态学及核型异常检测，不过若低原始细胞发生骨髓增生异常综合症时，其细胞形态及核型与溶血性贫血类似，诊断结果极容易造成混淆[2]，本次研究中，综合使用骨髓细胞形态、细胞化学染色及骨髓活检切片对低原始细胞骨髓增生异常综合征与溶血性贫血进行区分性检测研究，取得了显著的效果，现作如下报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性选择2019 年5 月到2019 年12 月我院诊断出的低原始细胞骨髓增生异常综合征（m yelodysplastic syndrom es，下称M D S）患者118 例，归为观察甲组，组内男性74 例，女性44 例，年龄最小16 岁，最大85 岁，平均年龄（49.2±0.2）岁，另选取同一时段入院确诊为溶血性贫血的患者118 例，归入观察乙组，组内男性68 例，女性50 例，年龄最小10 岁，最大85 岁，平均年龄（43.8±0.3）岁。经过统计分析，两组患者间的性别和年龄差异，对研究结果均不会产生影响，不具备统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 骨髓细胞形态。骨髓细胞形态主要是利用油镜对骨髓细胞涂片样本进行观察，观察的内容为粒系、红系或巨核系细胞病态的情况。共取250 个标本，当超过10%的标本中该类型的细胞存在病态造血形态，则认为该样本存在该细胞的病态造血情况。

1.2.2 细胞化学染色。利用该方法判断骨髓片中的环核铁粒幼红细胞阳性率及阳性水平、幼红细胞的阳性率及阳性水平，对环核铁粒幼红细胞进行染色，主要染色对象是铁元素，其作用原理是将骨髓片在甲醛蒸汽中放3 分钟后置入40g/L的亚铁氰化钾与4%浓度稀盐酸混合溶液中30 分钟，清洗后在碱性环境复红，再次利用蒸馏水和无水乙醇冲洗，干燥后骨髓片中的铁可呈蓝色颗粒或珠状。

对幼红细胞进行染色，将骨髓片置于浓度为95%的乙醇10 分钟，之后置于浓度为10g/L 的过碘酸液中20 分钟，以蒸馏水冲洗干净后自然晾干。此后将骨髓片置于席夫碱染液中一小时，用蒸馏水冲洗干净，晾干后置于苏木素染液中10 分钟，最后冲洗并晾干，进行观察[3]。

1.2.3 骨髓活检切片。局部麻醉后取活材，经布安氏液固定后，用苏木素- 吉姆萨酸性品红染液染色，油镜下观察有无前体细胞异常定位的情况发生[4]。

1.3 观察指标

1.3.1 病态造血。通过骨髓细胞形态学观察两组患者的骨髓样本是否存在粒系细胞病态造血、红系细胞病态造血以及巨核系细胞病态造血的情况并进行对比。

1.3.2 环核铁粒幼红细胞与幼红细胞的阳性率及阳性水平。环核铁粒幼红细胞经过细胞化学染色后会呈现为蓝色颗粒或珠状物，观察其分布的情况。

幼红细胞经染色后，阳性时细胞浆呈红色，阴性则细胞浆为无色，观察红色的占比情况。

1.3.3 前体细胞异常定位。通过骨髓活检切片的染色观察前体细胞异常定位的发生率，并对两组患者进行比较。

1.4 统计学方法

本次研究中使用SSPS21.0 统计学软件对实验数据进行统计分析，计数资料以百分数表示，用卡方检验独立性，计量资料以（平均数±标准差）标注，用t检验其独立性，组间差异用P 检验，当P＞0.05 时，认为组间差异不足以对研究结果产生影响，没有统计学意义。

2 结果

2.1 骨髓细胞形态学观察结果

通过骨髓细胞形态学对两组患者的骨髓标本进行观察分析，其病态造血情况如下表1 所示。

如上表所示，两组患者的粒系细胞病态造血率、红系细胞病态造血率及巨核系细胞病态造血率都存在一定的差别，但是根据P 值来看，两组患者在巨核系细胞病态造血率存在差异时具有统计学意义，且观察甲组的巨核系细胞病态造血率显著高于观察乙组。而粒系细胞病态造血以及红系细胞病态造血两组没有明显差异，不能通过该项特征进行判别（P＞0.05）。

表1 骨髓细胞形态学观察结果[n(%)]

2.2 两组患者骨髓片细胞化学染色结果对比

通过细胞化学染色对两组患者的骨髓片进行处理，观察结果如下表2 所示。

表2 两组患者骨髓片细胞化学染色结果对比[n(%)]

如上表所示，观察甲组患者的环核铁粒幼红细胞阳性率显著高于观察乙组（P＜0.05），且观察甲组患者的幼红细胞阳性率显著高于观察乙组（P＜0.05），可以通过环核铁粒幼红细胞阳性水平和幼红细胞阳性水平来区分两组患者。

2.3 两组患者活检骨髓细胞ALIP 现象的发生情况对比

通过骨髓活检切片染色观察A LIP 情况的发生，结果如下表3 所示。

表3 两组患者活检骨髓细胞ALIP 现象的发生情况对比[n(%)]

如上表所示，观察甲组患者的A LIP 发生率显著高于观察乙组（P＜0.05）。可以通过骨髓细胞的A LIP 现象来对两组患者进行区分，并且效果显著。

3 讨论

通过上述的三个表格发现，单独使用骨髓细胞形态学对病症进行鉴别，虽然在巨核系细胞病态造血形态上有一定的特异性，但是仅有21.19%的M D S 患者具有这样的特性，也就是说，单纯使用骨髓细胞形态学，有78.81%的M D S 无法被检测出。同理，借助细胞化学染色手段，检查患者的环核铁粒幼红细胞阳性率，43.22%的M D S 患者被检出，检查患者的幼红细胞阳性率，有53.39%的患者被检出，但是溶血性贫血患者的该项指标数据也很高，容易产生混淆，而利用骨髓活检切片观察前体细胞异常定位的方式，检测特异性高达73.73%，不过本着对患者负责，减少误诊率，避免病情因为误诊而错过最佳治疗时机的原则，将三种方式联合使用，其检出率高达90.67%，符合临床鉴别M D S 和溶血性贫血的要求，值得进行推广使用。