疾控机构微生物实验室在突发公共卫生事件中的应对策略

冯丽，王静

1.山东省菏泽市牡丹区疾病预防控制中心，山东 菏泽 274000；2.山东省菏泽市疾病预防控制中心，山东 菏泽 274000

一般情况下突发公共卫生事件可以根据事件的不同表现形式分为以下两类：①在一定时间、范围、人群中，当病例数累计达到规定预警值时所形成的事件[1]。例如传染病、不明原因疾病、中毒、预防接种反应、菌种、毒株丢失等，及县级以上卫生行政部门认定的其他突发公共卫生事件。②在一定时间、范围，当环境危害因素达到规定预警值时形成的事件，例如生物、化学、核和辐射事件，包括传染病菌种、毒株丢失；病媒、生物、宿主相关事件；化学物泄漏事件、放射源丢失、受照、核污染辐射及其他严重影响公众健康事件[2]。根据大数据统计发现，目前发生的突发公共卫生事件的数量中，因微生物感染而出现的群体性传播导致的突发公共卫生事件在总数量的占比，相对于其他原因导致的突发公共卫生事件的占比要更多[3]。这类公共卫生事件的处理方法离不开疾控中心的微生物实验室，只有微生物实验室早日明确传播源头才能让整个应对措施更好地展开。该文主要围绕疾控中心微生物室在突发公共卫生事件中的应对措施展开描述，具体内容如下。

1 疾控中心微生物实验室应对突发公共卫生事件的基本方案

预警方案和基本应对流程在疾控中心的各个中心和研究室中都是不可缺少的组成部分。这些基本预警方案和应对流程是疾控中心在面对突发公共卫生事件时的基本保障。能够让疾控中心在面对突发的公共卫生事件时能第一时间对该事件做出反应，配合上级部门完成各项应对任务，为处理公共卫生事件创造支持条件[4]。对于疾控中心的微生物实验室来说，在疾控中心应对突发公共卫生事件中，除了立即响应上级的号召，完成微生物的研究外，还要迅速组建小组，对实验室内的各级成员完成相对应的业务培训，完善实验室内成员对导致该事件源头的知识储备，了解其基本传播途径，减少成员在实验室工作期间的感染；完善自身实验室类仪器的检修和维护，不影响实验室的研究进度，清点实验室的各种相关试剂的储备情况，查缺补漏，保证实验室在缺少外来物资补充时也能正常运营一段周期[5]。对于样本的采集和存储工作来说，派出专业且足够资格的人员负责并做到能对外院学习人员进行指导和教学，以便适应大量采集工作的需要，能够有正确的指导。

1.1 实验室基础工作人员的业务培训工作

实验室内各级人员的业务培训工作开展前，要借由开展基础性观念认知的切入视角，让实验室内的各级人员对目前的形势有一个基本的认知，要让其意识到突发公共卫生事件处理和应对的重要性；扎实做好传染病相关知识的培训工作，一般包括以下传染病的知识和培训：SARS、 获得性缺陷免疫综合征、 甲型H7N9 流感、O157G 出血性肠炎，以及O139 型霍乱等甲类、乙类、乙类甲管等传染病[6]。并根据自身实验室的条件和特点针对性地展开知识培训，并定期检查成员的课时完成度和进度，部分疾控中心实验室会展开相对应的考核。以上目的都是为了强化该项知识培训的意义，避免微生物室的工作人员出现业务不熟或因知识储备不够完善而导致的微生物泄露或实验室内的感染。

1.2 实验室检验仪器设备配置

“科技是第一生产力”，科技的发展离不开科研工作人员这一要素，科研人员开展科学研究的前提是能够熟练掌握和操控实验室各种专业仪器设备，从而获得真实、准确和科学的实验数据与研究结果[7]。加强科研工作人员对实验室各种仪器设备的使用教学成为基础技能中的基础。微生物检测是一门系统工程，需要按照相关标准及步骤进行，这样才能得到较准确的检测结果，促进检验事业的发展[8]。生物检测技术的不断发展，呈现了多样化，新型、先进、简便的微生物检测技术也将逐步代替传统的培养方法，通过对检测技术与标准的不断完善与规范，保障检测的质量，同时操作人员也要不断提高自身的专业水平，提高检测仪器的使用率，将高效的微生物检测技术投入应用[9]。

现临床上微生物检测朝着两个方向发展。①微生物检测在一体化、智能化的道路上飞速前进：各大厂商不再局限于单一自动化产品的研制，而是在此基础上，通过流程优化、信息集成和最新技术对微生物检测的各个项目，推出了一系列整体解决方案。临床检验智能化、一体化的发展，是优化临床微生物实验室及实现真正自动化的必由之路，也是提高细菌耐药监测与防控水平的重要一环[10]。②床旁诊断仪器或试剂的发展同样迅猛。用于筛查重要病原体、识别致病病原体和明确抗微生物药物的敏感性的床旁诊断产品具有快速简便、效率高、成本低、检验周期短、标本用量少等优点[11]。具有代表性的比如MicroScan Walk A way plus96/40 全自动微生物鉴定与药敏分析系统、Sensititre Vizion 系列药敏半自动和全自动设备、Copan 系列产品、产色培养基chromiD 系列产品、全自动血液及体液细菌/分枝杆菌培养监测系统BacT/ALERT、迪尔DL-96 细菌鉴定系统等。对于医疗设备来说，它是硬件，是创造价值的基础，是一切生产的动力源泉，所以其地位非常重要[12]。

1.3 准备消耗性材料

相对于一些突发或不常见的传染病，虽然不在大众认知领域内，但是一旦出现，疾控中心的微生物室在应对时也必须要有相对应的消耗性材料对其进行研究，并要保证能运转一段周期，这样才能保证不耽误研究进展。而且实验本身就是一个反复运算和验证的过程，在应对突发公共卫生事件时，微生物实验室不可能只通过一次简短或单次的验证就得出明确结论并发出报告。以获得性缺陷免疫综合征的检测来说，这个实验结果阳性的报告发出时最少要经历两名检验人员并进行两次检验阳性，才能发出该报告，在实施过程中还要考虑试剂质量问题是否存在误差等情况，因此微生物实验室在运转过程中要根据自身条件和情况去配置一定的消耗性材料以备不时之需。

1.4 样品质量的有效性

在检验过程中，除上述过程中提到的问题，对实验结果直接产生影响的是样品的质量和有效性。样品的代表性、有效性和完整性将直接影响检测结果的准确度[13]。必须对样品的取样、贮存、识别及样品的处置等各个环节实施有效的控制，确保检验结果准确、可靠，并做好样品的保密与安全工作。这是因为在样品处理过程中可能产生溶解、分离、富集不完全，或被测组分挥发、分解而产生负的系统误差；另一方面还会由于器皿、化学试剂、环境和操作者玷污被测组分而产生正的系统误差[14]。对于一些病原体来说，患者本人是否处于发热期间、在取样之前患者是否经过药物治疗都有可能对该样品产生影响，从而影响实验结果。在进行实验时，实验内的温度环境也会对样品质量产生影响，例如夏季样品标本没有及时放入冷藏柜中则有可能导致部分杂菌的过度生长，水分的快速丧失、天气炎热时蚊虫的增多、实验研究人员汗水和毛发的污染都有可能对样品的准确性产生影响。对于冬季来说，则有可能导致实验的反应结果出现延迟等情况，较容易受该因素影响的例如凝集实验；操作过程实验台本身菌落超标， 没有达到要求标准，操作人员在物品转移或实验过程中的操作污染都会让结果产生不确定性。因此在微生物实验室内要保持合理的温度，样本的放置要保证安全和正确，操作过程中遵守无菌原则、有必要时要进行生物安全措施，尽可能地减少样本的误差，让研究结果的准确性更高，对临床的治疗和管理的指导性更高。

2 常见病原微生物的检测方法选取思路

2.1 流感

流感属于上呼吸道感染中一个常见且传染性较强的疾病，该病具有一定的流行性特点，如季节性和地域性等，可在一定时间内出现小流行的情况，流感病毒的快速检测对临床治疗有很大的指导意义。流感病毒检测最直接的办法是进行病原体检测，包括病毒分离、病毒抗原、核酸和抗体检测，病毒分离是临床上最主要的检测方式，病毒抗原可用于流感的早期诊断，核酸和抗体检测可用于回顾性调研[15]。目前在微生物室中是使用甲型流感病毒TaqMan 荧光RT-PCR 检测方法并对其进行检定。方法用DNA Star 和Primer Premier 5.0 软件设计甲型流感病毒荧光PCR 检测所用引物和探针；在GenBank中进行Blast 以及电子对比证明其具有高度的特异性和保守性；和标准RT-PCR 进行比较，检测此方法的灵敏度，结果所设计的引物和探针高度特异和保守，灵敏度比标准RT-PCR 方法高3～27 倍，并且反转录和PCR 可合并为一步，该方法具有特异、灵敏和简便的特点[15]。

2.2 布氏杆菌病

布氏杆菌病是由布氏杆菌感染人，引起的一种人畜共患的传染病，主要通过接触布氏杆菌污染的皮毛或食物感染。该病主要的传染源是牛、羊，多见于牧区，羊毛、牛毛加工厂，乳制品制造厂，上述工作场所中的工人也是发病较高的人群[16]。布鲁氏菌是一种革兰氏阴性短小杆菌，目前分有6 个种19 个生物型，我国已分离到15 个生物型。布鲁氏菌在自然环境中生命力较强，在病畜的分泌物、排泄物及死畜的脏器中能生存4 个月左右，在食品中约生存2 个月。检验方法有血清学检查、 细菌学塑造、骨髓培养试验、ELISA 试验、血球凝结试验、皮下注射试验等。目前临床上最常用的是虎红平板凝集试验技术，为诊断布氏杆菌病，通常需要进行多种类型的协同检查，以作出明确的诊断[17]。

3 与流行病学医生的沟通与合作

虽说检验是一个单独立出的科学研究，但是在对微生物的探究过程中，仍需要与流行病学医生沟通，并且在得出结论后也需要和各领域的专家进行共同探讨。这是因为微生物的多变性和临床疾病的多样性导致的，尤其是部分疾病可能存在潜伏过程， 部分菌株存在交叉，导致两组微生物出现属于同一属，但是会导致不同的临床表现或因各种原因出现实验结果与临床表现不符等情况；这时就需要微生物的研究人员和流行病学的医生进行沟通共同探讨。

4 结语

突发公共卫生事件具有发生突然、传播性强、覆盖面广等特征，结合目前已经存在的研究数据来看，各大疾控中心微生物实验室根据自身等级的高低而在面对突发公共卫生事件时的应对策略有些许不同，但总的大方向一致，即全力为临床提供快速、准确的研究数据。在各项基本方案的指导下，在检验设备的加持下，实验室内人员充分掌握知识技能和检验技术、保证样品的准确性和有效性，并在不脱离临床的情况下完成各项研究，这是疾控中心微生物实验室在面对突发公共卫生事件时作出的应对方式。