树莓组织培养育苗技术

王 禹

(黑龙江省农科院园艺分院，哈尔滨150060)

树莓(RubusidaeusL.)为悬钩子属多年生落叶小灌木，俗称托盘、覆盆子，分单季品种和双季品种，适应性强，栽培范围广。其果实营养价值高、口感好，除富含丰富的维生素、氨基酸和类黄酮外，还含有糅化酸、花色苷、SOD 酶等有益成份，是当今风靡世界的第三代水果中的佼佼者。

随着树莓种植面积的扩大，优质种苗的需求也随之增长。但树莓传统的根蘖分株、埋土压条和扦插繁殖育苗方式，受气候条件、环境因素影响及母株数量和品种特性限制，致使生育周期长，繁殖系数低，苗木质量参差不齐，难以满足市场对优质苗木的需求。因此，应探索有效的树莓优良种苗繁育途径。从材料选择、组培苗育苗、组培苗驯化及管理等方面阐述树莓组织培养技术繁育种苗，以期提高种苗繁殖数量和质量。

1 材料选择

选择无病虫害、生长健壮、芽体饱满茎粗不超过0.5 cm的嫩枝或半木质化的枝条。田间采集时间为6月中旬～ 9月初。

2 组培准备工作

2.1 培养基的制备及工具准备

所有培养基均采用MS + 植物激素 + 7 g/L琼脂 + 30 g/L白糖，pH 5.4～6.0，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌20 min。无菌水、滤纸及工具，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌30 min。

2.2 材料处理

将采集的枝条剪成带一个芽1 cm长的茎段，用洗洁精清洗干净，流水状态下冲洗1 h，置于超净工作台中无菌水冲洗3次。

嫩枝茎段消毒：酒精40 s，无菌水冲洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒5 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上。

半木质化茎段消毒：酒精1 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上；HgCl2消毒7 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上。

2.3 组培苗培养

2.3.1 生长培养。将消毒好的茎段底部黑色部分切去，接种到MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA生长培养基上。7 d后腋芽陆续萌发，转接增殖培养基时，芽高最好不超过1 cm。

2.3.2 增殖培养。将萌发的腋芽从茎段上切下，接种到MS + 1.5 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA增殖培养基上，每30 d转接一次，增殖系数因品种而异，可达2.8～4.1。

增殖培养可连续进行4次，然后进行复壮培养，复壮培养基可采用MS + 1 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA，培养温度20 ℃，光照时间10 h/d，培养30 d。

2.3.3 生根培养。当组培苗长至1 cm高时，切成单株状，接种到MS+0.2 mg/L IBA生根培养基上。

2.3.4 培养条件。白天温度23 ℃±2 ℃，夜间不低于18 ℃；光照时间14 h/d，光照强度为2500～3000 lx，相对空气湿度40%～60%。

2.4 组培苗驯化

2.4.1 炼苗。当组培苗根系1 cm长时，将组培苗从培养室移至驯化室。继续生长至根系长2 cm、株高3 cm以下，此时进行驯化。驯化前3 d，把瓶盖打开，让组培苗逐步适应外界环境。

2.4.2 移栽。栽基质采用草炭土，拌入30%的百菌清(百菌清∶土1∶100)，喷洒2.5%杀灭菊酯乳油1000倍液，塑料布覆盖7 d。采用72穴，5 cm深的穴盘，使用前穴盘浇透水，放置2 d。

将组培苗根部培养基洗净，用镊子在穴盘上上打孔，根系不要卷曲，栽好后轻轻把空隙填满，不要用手压，以免基部折断，浇透水即可。

2.4.3 驯化管理。缓苗前保持土壤湿润，遮光率20%；相对空气湿度不高于40%；环境温度白天不高于30 ℃，夜晚不低于18 ℃，30 d后成活率可达90%。

移栽后注意预防红蜘蛛，可选用73%炔螨特乳油、阿维菌素等；真菌、细菌性害可采用甲基托布津、使百克等。缓苗后每15 d 喷 1 次0.2%～0.3%磷酸二氢钾溶液。