临床免疫检验质量的影响因素及控制对策

张琛，李晶晶

（甘肃省张掖市甘州区人民医院，甘肃 张掖 734000）

0 引言

临床免疫检验是检测技术的一种，通过抗体、抗原的特异性来体现检测的过程，在一些临床诊断过程中对部分疾病的诊断具有重大作用。对准确判断患者疾病表现特征，合理使用药物治疗，提高治疗效果具有积极意义，可为医生制定治疗方案提供有效参考资料。因此保证临床免疫质量对确保检验结果准确性、可靠性及为临床工作提供正确参考借鉴意义重大[1]。临床免疫检验涉及范围广泛[2-4]，包括放射免疫、化学发光免疫及免疫原制备等，是诊断免疫性疾病的多用方式，得到多数患者、医生的认可[5-6]。本研究从我院选取适量质控品为调查研究对象，调查研究内容如下文所描述。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从我院检验科选取2020年6 月至2020年9 月酶联免疫吸附试验中适量质控品，运用即刻法、改良即刻法展开质量控制，分析质控效果。

1.2 方法

实验设备选用AEAK2404 全自动酶联免疫分析仪，实验试剂选用英科新创酶联免疫检测试剂盒（注册证编号：国械注准20173400652 英科新创（厦门）科技有限公司），定性检测质控品中人血清、血浆中人类免疫缺陷病毒抗体（HIV）、丙型肝炎病毒抗体抗HCV。通过HIV、抗HCV 实验检测吸光度（A）值，计算样本OD（A/CO）值，使用即刻法、改良即刻法统计得到的实验数据（CO 为临界值）。

即刻法统计：在控：质控值SI 上限、SI 下限值＜SI 表n2s；警告：n2s＜SI 上限、SI 下限值＜n3s；失控：SI 上限、SI 下限值二者中有一个比n3s 大，当质控值指示为警告、失控状态时，需删除，并对当次结果展开重新检测，累计数据达到20 个，可制作质控图。

改良即刻法统计：计算质控值平均数（χ2）、吸光度（A）、方法学变异系数（CV）等，按照具体地区酶联免疫吸附试验室内质量控制要求，分为在控、失控。在控：CV 值在允许范围内。失控：超出允许范围。在失控状态时，需删除此组离散度最大的一个质控值，质控图制作需求同即刻法。

1.3 临床评价

对比酶联免疫吸附试验室内质量控制使用即刻法、改良即刻法实验数据。

2 结果

2.1 即刻法统计1～3 个质控值不同CV 值和第4 个质控状态、CV

经研究发现1～3 个质控值CV＜5%，第4 个质控值的CV 值若为16.5%，则质控状态为警告，需将此数据删除，且若1～3 个质控值CV 值越小，则第4 个质控值被允许的CV 值也会发生对应减小。在目前3个质控值CV=25%时，第4 个质控值CV=60%，质控状态依然显示为在控，且在CV＞97%时，质控状态仍然显示为在控，表明即刻法对目前3 个质控值CV 大的结果无控制意义。

2.2 即刻法统计1～3 个质控值不同CV 值时允许第4 个在控质控值最大CV 范围

研究发现1～3 个质控值CV 值＜5，第4 个 在控质控值允许最大CV 范围＜16；1～3 个质控值CV值5～10，第4 个在控质控值允许最大CV 范围在16～30；1～3 个质控值CV 值在10～15，第4 个在控质控值允许最大CV 范围在31～41；1～3 个质控值CV 值15～20，第4 个在控质控值允许最大CV 范围在42～51；1～3 个质控值CV 值20～25，第4 个在控质控值允许最大CV 范围在52～61；1～3 个质控值CV值超出25，第4 个在控质控值允许最大CV 范围在61～100，如表1。

表1 即刻法统计1-3 个质控值不同CV 值时允许第4 个在控质控值最大CV 范围

2.3 使用即刻法、改良即刻法统计20 个质控数据结果

使用即刻法、改良即刻法统计20 个质控数据，发现即刻法目前1-3 个质控值CV＜10%时，随后CV值会越来越大，结果显示质控状态均为在控，即刻改良方式以CV＜25%为控制限，质控状态显示为失控较多。

2.4 CO 值不变恒定=0.14，A 值换算为S/CO，统计CV 值

经研究发现，检验项目临界值恒定，可使用A值测定统计室内质量控制；若检验项目的结果判断值不恒定，则必须使用S/CO 统计室内质控。

3 讨论

我国临床使用免疫检测的概率较高，现如今进行免疫检测的项目数量较多[7]。较为多见的有放射免疫、抗原抗体反应等[8-9]。临床免疫检测与一般的生化检测对比，内容更加复杂，受到其他因素的影响更大[10]。

本研究即刻法对目前3 个质控值CV 大的结果无控制意义；1～3 个质控值CV 值越小，则第4 个质控值被允许的CV 值也会发生对应减小；使用即刻法、改良即刻法统计20 个质控数据，发现即刻法目前1～3 个质控值CV＜10%时，随后CV 值会越来越大，结果显示质控状态均为在控，即刻改良方式以CV＜25%为控制限，质控状态显示为失控较多；检验项目临界值恒定，可使用A 值测定统计室内质量控制；若检验项目的结果判断值不恒定，则必须使用S/CO 统计室内质控。提示即刻法统计一开始阶段质控数据，1～3 个质控数值的CV 值对随后质控数值CV 值具有较大影响，两种质控方式均无法显示连续趋势性上升、下降失控倾向。酶联免疫吸附试验多为手工操作，步骤繁多，自动洗板、酶标扫描仪器中携带的污染、稳定性均可对检验结果产生一定影响[11]。酶联免疫吸附试验定性测定通过S/CO 值判断，与生化比色定量测定对比，仅为相对比值，非绝对浓度[12]。阳性判断值（CUT-OFF）需依据每板次测定的阴性对照组确定，若实验步骤出错、使用不同厂家试剂、同产家批号不同试剂等均会对检验结果产生一定影响[13]。因此需通过提高检验人员综合素质，明确使用试剂、选用合适室内质量控制法等方式消除实验步骤、试剂等因素对检验结果的影响。

易家非[14]通过1434例献血者血液样品的资料分析酶联免疫吸附实验室内质量控制方式，经研究发现仪器设备维护保养、检测环境、使用的试剂及检验人员操作为影响检验质量的因素，指出使用酶联免疫吸附试验筛选血液标本中HBsAg结果具有较高可靠性，质控物样品稳定性良好。徐畅等[15]在酶联免疫吸附试验中应用弱阳性质控品构建室内质控图，并使用即刻法进行HBsAg20次试验，展开研究后发现即刻法用于室内质控数据值较少时，可迅速展开室内质控，该质控方式操作简便、适用于试剂变化频率高、检测频率低的项目。即刻法不适用于数据较多的检验项目，对检验结果会产生一定影响，本研究结果与之一致。本研究中还发现建立全质量管理体系、增强检验人员业务能力、提高检验人员质量意识对提高临床免疫检验质量具有积极意义。

综上所述，实验步骤繁多、使用不同厂家试剂、使用同产家批号不同试剂等为临床免疫检验质量影响因素；使用即刻法统计一开始阶段质控数据，1～3 个质控数值的CV 值对随后质控数值CV 值具有较大影响，尤其是第4 个质控值受到影响最大，改良即刻法适合正态分布质控数据使用，选择质控方式需结合自身实际需求，选择合适方式提高免疫检验质量。