柳州地区2 863例成年女性抗核抗体谱的分析研究*

杨金玲，黄 诚，陆碧玉，黄李霜，黄丽华，陈大宇

柳州市妇幼保健院医学遗传科/柳州市出生缺陷预防与控制重点实验室，广西柳州 545001

抗核抗体谱(ANAs)包括最常见的自身免疫性抗体，ANAs中的抗体与细胞核中的大分子物质，如核糖体、DNA、RNA、组蛋白或这些物质的分子复合物结合，对机体造成损伤。有研究认为，ANAs中的各种自身抗体可与核成分结合，从而影响受精卵细胞的分裂，导致妊娠失败；多种妊娠不良事件，如反复自然流产、不孕、胚胎植入失败与ANAs密切相关[1-3]。ANAs是诊断和评价自身免疫性疾病预后的重要指标，而自身免疫性疾病常见于女性，因此，对成年女性进行ANAs检测具有重要意义。本文通过流式荧光免疫法检测柳州地区成年女性ANAs，并进行结果分析，以期为临床诊断治疗提供依据[4]。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2017年8月至2020年2月在柳州市妇幼保健院就诊的2 863例成年女性的血清。按年龄分为3个组：19～30岁组、>30～40岁组和>40岁组。按疾病类型分为9个组：可疑自身免疫性疾病组、易栓症组、其他不良妊娠疾病组、复发性流产/习惯性流产组、不孕症组、月经失调/痛经组、其他妇科疾病组、孕期其他疾病组、其他类型流产组。

1.2仪器与试剂 流式荧光免疫法采用宙斯公司AtheNA Multi-Lyte抗核抗体检测试剂盒，检测仪器为美国Luminex公司生产的Luminex200TM流式点阵仪。

1.3方法 受检者空腹采血后分离血清，进行流式荧光免疫法检测。ANAs包括的项目有：抗SSA、SSB、Sm、RNP、Scl 70、Jo-1、Cent B、Histone、dsDNA共9种不同抗原IgG类抗体及其他抗核抗体[5]。

1.4检测步骤 标本处理后进入Luminex200TM流式点阵仪检测和数据处理。正常值为0～<100 U/mL，≥100～<120 U/mL为灰区，≥120 U/mL为异常。临床上ANAs项目检测值达到灰区值时，就需要密切观察随访，因此，以≥100 U/mL为筛查阳性切值[4]。

1.5统计学处理 采用SPSS24.0统计学软件进行数据处理及统计分析，计数资料用频数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1不同年龄组间ANAs阳性率分析 柳州地区成年女性ANAs阳性率为15.75%，随着年龄增长，ANAs阳性率呈逐渐升高趋势，ANAs阳性率在24岁与46～47岁女性中出现升高趋势，见图1。3个年龄组ANAs阳性率比较，差异无统计学意义(χ2=1.723，P=0.423)，见表1。

注:虚线表示群体平均筛查阳性率，实线表示各年龄筛查阳性率；短横线表示各年龄筛查阳性率趋势线。

表1 不同年龄组间ANAs阳性率比较

2.2各种抗核抗体阳性率及异常率分析 各种抗核抗体的阳性率有差异，其中抗SSA、RNP和dsDNA抗体阳性率分别为3.18%、3.07%和3.63%；其他ANAs抗体阳性率均<3.00%，抗Sm抗体阳性率最低，为0.07%。抗SSA、SSB、RNP抗体异常率均>80.00%，抗Scl-70、Cent B抗体异常率均>70.00%，其余ANAs抗体异常率<70.00%，其中抗Sm抗体异常率最低，为0.00%。见表2。

表2 各种抗核抗体阳性率及异常率

2.3ANAs在疾病中的阳性分布 可疑自身免疫性疾病组的ANAs阳性率最高，为24.23%，与其他组阳性率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。其他类型流产组ANAs阳性率(7.80%)最低，与可疑自身免疫性疾病、易栓症、其他不良妊娠疾病、复发性流产/习惯性流产、不孕症、月经失调/痛经组的阳性率差异有统计学意义(P>0.05)。易栓症、其他不良妊娠疾病、复发性流产/习惯性流产、不孕症、月经失调/痛经组各组间的ANAs阳性率比较，差异无统计学意义(P>0.05)；其他妇科疾病、孕期其他疾病和其他类型流产组各组间ANAs阳性率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。其他妇科疾病组与可疑自身免疫性疾病、易栓症、其他不良妊娠疾病组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。孕期其他疾病组与可疑自身免疫性疾病、易栓症、其他不良妊娠疾病、复发性流产/习惯性流产、不孕症组比较，ANAs阳性率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 ANAs在疾病中的阳性分布

续表3 ANAs在疾病中的阳性分布

3 讨 论

研究表明，与健康女性相比，患有自身免疫性疾病的女性生殖能力下降，新生儿的出生率下降12%～16%[6]。导致不孕症和不良妊娠结局常见的原因是自身免疫抗体异常。自身免疫性疾病与不孕、反复流产和体外受精失败密切相关。本研究对成年女性ANAs结果进行分析，为临床诊断治疗提供依据。

本研究结果显示，ANAs的阳性率随年龄增加而逐渐升高，在>40岁组最高，但各年龄组ANAs阳性率差异不明显，与LI等[7]研究结果相同。有研究者认为，ANAs阳性率与年龄有关[8]，但这与本研究结果不一致。本研究结果显示，柳州地区成年女性ANAs阳性率为15.75%，这与之前报道的中国人(5.92%)[9]、日本人(9.50%)[10]和印度人(2.30%)[11]的ANAs阳性率差异较大，这些差异可能与研究的人群及检测方式等相关。本研究结果提示，各年龄阶段的成年女性均应行ANAs检测，其有助于早期诊断并判断疾病的严重程度，早期积极采取治疗措施，对降低并发症及改善预后、提高患者生存质量具有重要意义。

本研究结果显示，成年女性各种抗核抗体阳性率及异常率均不相同，抗SSA、RNP、dsDNA抗体检出率均>3.00%，异常率均>50.00%；大部分ANAs异常率均达到50.00%以上；可疑自身免疫性疾病组的ANAs阳性率最高，为24.23%。临床医生根据抗核抗体阳性的类型，结合其他诊断指标和临床症状综合判断，可有针对性地进行治疗。对于达到灰区值但无典型临床症状的病例，要进行定期复查，并随访观察。不同自身免疫性疾病中抗核抗体阳性率情况不同，即不同的抗核抗体阳性可能提示不同的自身免疫性疾病。如系统性红斑狼中抗Sm、dsDNA抗体阳性率均较高；抗SSA、SSB抗体阳性多见于干燥综合征；抗RNP抗体阳性多提示混合型结缔组织疾病；抗Scl-70抗体阳性提示硬皮病的可能等。ANAs检测是目前临床常用的自身免疫性疾病辅助诊断指标，不同种类自身免疫性疾病可形成特征性的ANAs[12-13]。ANAs检测应用于成年女性人群是非常必要的，因为抗核抗体阳性对自身免疫性疾病具有重要的预警作用，各种抗核抗体阳性率及异常率对自身免疫性疾病的早期诊断、控制、预后有重要意义。

复发性流产指孕妇两次或多次的自发性流产，约3%的孕妇在妊娠前28周可能发生复发性流产[14]。ANAs导致妊娠失败的机制仍不清楚，但有研究表明一些流产中涉及患者的免疫机制[15-16]。在本研究中，不明原因复发性流产女性ANAs阳性率为14.71%。我国有研究报道，自身免疫型复发性流产女性ANAs的阳性率为8%～50%，对照组则为5%[17]，与本文结果相近。 近年来，越来越多的研究开始关注抗核抗体对不良妊娠结局的影响。在TICCONI等[2]的研究中，反复自然流产女性ANAs阳性率达50%；KIKUCHI等[18]报道的反复自然流产女性ANAs阳性率为28.7%。本研究提示易栓症、其他不良妊娠疾病、复发性流产/习惯性流产、不孕症、月经失调/痛经组ANAs阳性率较高，均高于其他妇科疾病、孕期其他疾病、其他类型流产组的ANAs阳性率，可见血清ANAs检测可评估免疫因素女性生殖方面的影响。目前有研究结果表明，免疫性不孕、卵巢早衰和移植失败可能与ANAs阳性有关，但很少有研究报告体外受精-胚胎移植群体的ANAs阳性率[19-20]。TANIGUCHI等[21]研究表明，在进行体外受精-胚胎移植出现不良妊娠结局的人群中，血清ANAs阳性率为25.1%；体外受精-胚胎移植人群中，血清ANAs阳性组临床妊娠率低于ANAs阴性组，早期流产率高于ANAs阴性组，可见ANAs阳性可能是体外受精-胚胎移植的负性因素。李颖等[22]研究指出，因不明原因不孕、子宫内膜异位症、多次人工授精失败、排卵期障碍等原因而进行外受精-胚胎移植的人群中，ANAs阳性率较对照组高，提示有可能是因为免疫因素导致其不孕。本研究结果显示，其他妇科疾病及孕期其他疾病组中，ANAs阳性率也大于5.00%，说明ANAs检测对于女性生殖生育评估预测具有重要意义，对这一部分成年女性人群进行ANAs筛查也非常必要，可早诊断和早治疗自身免疫性疾病，在一定程度上亦可防治自身免疫性疾病。

综上所述，ANAs检测可为成年女性自身免疫性疾病的早期诊断和治疗及自身抗体谱检验信息咨询提供可靠的参考依据，对自身免疫性疾病的早期诊断、控制、预后有重要意义；同时血清ANAs检测可评估免疫因素在女性生殖方面的影响，根据不同的抗核抗体类型进行针对性治疗，以期提高临床妊娠率，降低流产率，进而改善妊娠结局。