猪脑心肌炎病毒诊断方法及应用

何争福

（福建省平和县安厚镇畜牧兽医站363707）

1 脑心肌炎的临床症状和病理变化

脑心肌炎是一种人畜共患的传染类疾病，脑心肌炎病毒会导致猪和一些啮齿类动物的心肌炎或脑炎。 此病毒能够经由口腔感染，如果仔猪不幸感染上此种病毒，会因为心肌受损死亡。仔猪的易感性特别强， 出生不足20d 的仔猪容易出现致死性感染。成年猪通常是隐匿感染。引发感染的原因可能是为猪提供与病鼠接触过的水和饲料。 病死猪的检验结果表明，心肌中病毒的水平最高，然后是肝脏和脾脏，心肌炎病毒还有可能经由胎盘感染。

若猪感染脑心肌炎病毒，病猪的精神比较萎靡，食欲不佳，共济失调，一些猪还会伴有尖叫和全身震颤，体温在41℃～42℃之间，痢疾、呕吐、呼吸障碍，通常会在吃食或被驱赶后因为过度兴奋而心力衰竭出现突发性死亡。

对病死猪进行剖检，可发现仔猪的胃里面有凝乳块，腹腔和胸腔里面有深黄色样的液体，肺部水肿，被膜处可以观察到出血点，脾脏与肝脏发生萎缩，猪膀胱、胃黏膜和肾淋巴结充血，心脏体积变大，发白，具有黄白色的坏死病灶。

2 猪脑心肌炎病毒诊断方法和应用

2.1 RT-PCR 诊断方法

国外的学者研发出RT-PCR 诊断方法，将其应用在病猪的临床检测工作中，应用效果良好。 猪脑心肌炎是国内外一种比较普遍的流行性疾病，会严重威胁养猪行业的平稳发展，所以，需要建立起特异性强、 敏感度高且快速的病毒诊断方法。 常规的RT-PCR 诊断方法主要可以分成两步，一个是反转录，另一个是扩增CDNA，此种操作比较繁琐，会增大污染的几率[1]。 一步法RT-PCR 诊断是以常规的RT-PCR 诊断方法为基础发展而来的，可以有效节省病毒诊断的时间，简化操作步骤，从RNA 的提取、反转录、PCR 扩增一直到电泳观察，耗费的总时间不超过4h，能够在短时间里迅速实现目的片段的扩增， 适合大范围的推广与应用。

在临床上， 和EMCV 同属的FMDV 诱发的仔猪心肌炎，很容易和EMCV 导致的心肌炎混淆，不仅如此，因为PRV、PRRSV、PPV 以及CDFV 引起的母猪繁殖障碍， 也容易和EMCV 引起的繁殖障碍混淆。 一步法RT-PCR 诊断方法的应用，可以将EMCV与其他病毒进行准确的鉴别，能够将损失降到最低，是疫情监测中的重要方法之一。

2.2 RT-LAMP 诊断方法

猪脑心肌炎在国内外的发病率都比较高， 造成的经济损失数不胜数，国内关于EMCV 的研究并不多，但是此类疾病严重威胁着养猪业的平稳发展， 仔猪的急性心肌炎和口蹄疫疾病间有很多相似之处。 目前，临床上主要采取RT-PCR 的诊断方法，但是此种方式对试验的要求非常高， 不适合在临床大规模检测样本。近几年，MALP 技术得到了迅速发展，在各种传染性疾病中都得到了广泛的应用。

在EMCV 诊断中使用RT-LAMP 诊断方法， 只需要在温度是63℃的水浴锅里面保温50min，就可以技术反转录与扩增的过程，在合成核酸的同时，焦磷酸根离子能够与镁离子相互结合，生成白色的焦磷酸镁沉淀物， 通过肉眼观察就可以判定检测的结果，不用再开展电泳检测，所以，此种诊断方法在疾病的早期诊断中发挥着十分重要的作用。

3 猪脑心肌炎病的预防和治疗

3.1 猪脑心肌炎的预防

此病是传染类疾病的一种，而且是一种人畜共患病，现阶段还没能研发出针对性的预防疫苗，因此，此病的预防主要是远离野生动物，尤其是老鼠等啮齿类动物，不要让猪食用被这类动物污染过的饲料，也不可让猪饮用污染后的水源。

3.2 猪脑心肌炎的治疗

首先，需要减少应激。 如果发现猪出现疑似脑心肌炎，需要将其隔离同时结合消毒，对猪的症状进行及时诊断；减少平时的应激，不可以惊吓、捕捉和驱赶病猪，为减少猪的应激反应，可以用氯丙嗪，每千克体重1～2mL，肌肉注射[2]。 与此同时，还可以结合盐酸苯海拉明、安定以及巴比妥钠等药物。

其次，对症治疗。 应用口蹄保心散，采取喂食或自由饮水的使用方法，按照2∶5 的原则确定药物和水或拌料的用量，以此来预防并治疗心肌炎，避免病毒入侵心肌。 还可以给猪使用复方聚肌胞注射液，按照每千克体重0.05～0.10mL 剂量，采用肌肉注射的方法，每天使用1 次，连续使用3～5d。 此种药物属于一种干扰素诱导剂，可以和猪体内抑制干扰素基因的物质相互结合，令机体在短时间里生成大量的干扰素，抑制病毒的复制，提高猪的免疫力，应用此种方法治疗猪脑心肌炎效果比较理想。