鸡支气管堵塞研究进展

2021-03-28蔡亚玮王子璇陈立功王学静戴美丽张晓云孙会兴

今日畜牧兽医 2021年1期

蔡亚玮，王子璇，陈立功,2，王学静，戴美丽，张晓云，孙会兴

（1.河北农业大学动物医学院 071001；2.农业部动物疫病病原生物学华北科学观测实验站 071001；3.河北省畜牧兽医研究所 071000；4.大厂回族自治县农业农村局 065300；5.迁西县农业农村局 064300；6.威县农业农村局 054700）

鸡支气管堵塞是一种多病因引起的呼吸道传染性疾病，该病前期主要表现为气管啰音、打喷嚏、咳嗽等，并伴有轻微腹泻；中期呼吸困难、伸颈张口呼吸、偶有怪叫，并出现食欲不振、腹泻、呆滞；后期食量减少、粪便稀黄，最后仰面朝天猝死。鸡支气管堵塞仅为鸡的症候表现，并非单一疾病，其形成有多方面原因，剖检病变以二级支气管、三级支气管有严重的堵塞为主要特征[1]。通过调查，近年来该病影响范围较广，死亡率较高，且无有效防治方法，严重影响养禽业生产效益。

1 病原学

鸡支气管堵塞的病原学方面，2006 年古飞霞等通过荧光RT-PCR 方法鉴定了一例由新城疫病毒（NDV）引起的支气管堵塞案例。2012 年王正东等[2]从安徽发生的支气管堵塞麻鸡中分离出了传染性支气管炎病毒（IBV）。 2012 年Qing Pan 等[3]报道，从东北地区支气管堵塞病例分离出6 株鼻气管鸟杆菌(ORT) 和3株兽疫链球菌，并表明ORT 和链球菌的联合感染是造成目前致鸡群高死亡率的原因。2014 年齐茜[4]从潍坊地区肉鸡支气管堵塞病料分离到了大肠杆菌与H9 亚型禽流感病毒（AIV）。2015 年王守荣[5]从山东聊城地区肉鸡支气管堵塞的病鸡分离出了H9 亚型AIV、NDV、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌。 2020 年苏战强等[6]从接诊病例中分离到了烟曲霉、黄曲霉和米根霉3 种真菌，这表明真菌与鸡支气管堵塞这一病理变化的形成有关。 2020 年张梦琳等[7]在河北省某养鸡场发生支气管阻塞肉鸡中分离到了H9 亚型AIV、铜绿假单胞菌、大肠杆菌。 2015 年韩文格等曾报道，我国商品肉鸡气囊炎和支气管堵塞病例中的60%是由ORT、温和型AIV、支原体混合感染引起；30%由ORT、温和型AIV、链球菌、支原体混合感染引导；10%由ORT、链球菌混合感染引起。大肠杆菌不是引起气囊炎和支气管堵塞的主要原因，而是ORT 发挥了重要作用，并且混合感染是加重病情的真正原因[8]。由以上得出，引起鸡支气管堵塞的病原有多种，包括NDV、IBV、温和型AIV、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌、ORT、金黄色葡萄球菌等，大多数情况为多重病原混合感染。

呼吸道感染是目前全世界家禽死亡率上升的一个重要原因[9]。呼吸道损伤是食用动物中最常见的病理状况之一，是由病原体和环境因素协同引起的。从国外参考文献中未查到鸡支气管堵塞疾病，但根据支气管堵塞为多病因引起的呼吸道疾病，查找出国外相关呼吸道病的发生及研究进展等情况。低致病性AIV、禽偏肺病毒（aMPV）、IBV、传染性喉气管炎病毒（ILTV）、支原体、大肠杆菌和/或ORT，在家禽中被认为是呼吸道疾病的主要共感染因子；曲霉属、多杀性巴氏杆菌、副鸟杆菌或鹦鹉衣原体也可能与呼吸道疾病暴发有关[10]。AIV、IBV、NDV、禽肺病毒（APV）和鸡毒支原体(MG) 已被认为是家禽中最重要的致病微生物[10，11]。Sid, H.等[9]研究证实MG、MS、IBV、AIV 和aMPV 在阿尔及利亚家禽中有传播，MG 和滑膜支原体（MS）在阿尔及利亚仍然是两种重要的病原体。MG 与aMPV 或AIV 的实验性联合感染加重了临床症状，鸡只体重减轻。

2 流行与分布

相关文献报道发现，支气管堵塞在新疆[6]、河北[7]、山东[12]、吉林[13]等地均有发生，多发于秋末、冬春季节，多种日龄肉鸡均可发生，主要发病阶段为10～30 日龄[4]。国外文献报道多为IBV、ND、AIV、ILTV、MG、大肠杆菌、曲霉菌、链球菌等病原联合感染；非洲[9]、约旦[11]、法国和摩洛哥[10]等地均有发生。多发性呼吸道感染可能与不良卫生或预防措施有关，多重感染可能是家禽高死亡率的原因[9]，提示只要有多种病原体以及不良环境的存在，各地养鸡场均可能发生。

3 发病机理

呼吸道病原体可独立致病，或细菌与病毒共同致病。腺病毒和呼肠孤病毒，通常被认为是鸡上呼吸道的继发入侵者。 aMPV和ILTV 存在于呼吸道组织中，而IBV、ND 和AIV 也侵入其他组织，如肾脏和生殖系统（IBV）、胃肠道（ND，AIV）和中枢神经系统（NDV，AIV）[14]。在发病机理方面，目前国外没有发现相关报道，国内仅王守荣[5]对肉鸡气管阻塞的发病机理进行了相关研究；王守荣研究表明阻塞物为脱落的上皮细胞、血细胞以及渗出的纤维和蛋白。通过病原体的分离鉴定，确定所研究病例为H9N2 亚型AIV、NDV、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的联合感染，第二代Miseq 高通量测序表明不同样品之间存在一定的物种差异，地域对样品中的细菌组成影响较大，引发肉鸡气管阻塞的细菌病原体也有不同，也进一步解释了国内不同地区引起支气管堵塞的病原体不一。齐茜[4]对潍坊市不同地区肉仔鸡支气管栓塞病例进行研究表明，24 个典型病例共分离到20 株致病性大肠杆菌和18株H9 亚型AIV，两种病原体联合感染试验结果表明H9 亚型AIV 可以与多种血清型的大肠杆菌分离株在致病方面具有不同程度的协同作用。Pan 等[3]调查ORT 与链球菌联合感染对SPF 鸡和肉鸡模型均出现典型的支气管栓塞。在商品家禽生产中，家禽对气溶胶传播疾病的易感性可能是由于过度拥挤、强迫喂食以及为快速增重和产蛋而进行的系列操作等，而不是相对较弱的肺细胞防御[15]。另外有报道称[16]，禽肺内游离的呼吸道巨噬细胞数量虽少，但不一定意味着肺防御的第一道防线就薄弱。

4 诊断方法

根据病鸡的临床症状、剖检病理变化可以对鸡支气管堵塞进行初步诊断，通过PCR（或RT-PCR）或荧光PCR（或RT-PCR）检测病毒、细菌等病原体、以及经动物回归试验等进行病原确定。为更快速、准确的对多病原进行检测，许多科研工作者不断创新检测方法。2016 年Laamiri, N.等[17]报道建立了一种新型的低聚核苷酸悬浮微阵列（Luminex 微球系统）多重DNA 悬浮芯片，用于快速检测具有重要临床意义的禽呼吸道病毒，包括AIV、NDV、IBV 和ILTV 的单病毒和混合病毒感染。 2018 年报道建立了一种可同时检测AIV、IBV、NDV 和ILTV4 种禽类呼吸道病毒的一步式多重实时逆转录- PCR（rRT-PCR）方法，该多重检测方法可作为一种常规的实验室检测方法，用于快速、特异地检测和定量现场感染样本[18]。Croville G 等[10]建立了一种基于纳米流体技术的创新定量PCR 方法，能够在一次实时定量PCR 中同时筛选96 个带有96 个病原体特异性PCR 引物的样品，可用于禽呼吸道疾病病原体的筛选，针对与禽类呼吸道感染相关的病毒、细菌和真菌等15 种呼吸道病原体进行筛选。

5 防控措施

支气管堵塞发生的外部原因主要是病毒病的流行、环境刺激、疫苗应激等，内部主要原因为肉鸡自身的生理结构[19]。黄鹏[20]通过中医辩证支气管堵塞发生的原因，即为外感与内伤兼致，外感为六淫外邪侵袭肺系；内伤为五脏六腑功能失调。风为六淫之首，外感呼吸道常以风为先导；脏腑功能失调，主要是脏腑病变涉及于肺，致肺卫不固，外邪易侵袭，内外合邪为病，常见的有霉菌毒素致胃肠功能失调。由此可见，本病的病因是与六淫（寒、湿、燥、暑、风、火）、饮食有关，病位主要在肺，可涉及脾、胃等。据此，防控措施主要采取以下几种方式：

5.1 提高饲养水平，营造良好环境

鸡呼吸道堵塞性疾病的外感影响因素主要为环境因素，包括环境温度、湿度、通风以及饲养密度等；天气突然变化或贼风入侵，舍内温差过大，导致鸡群受凉感冒，引起呼吸道疾病；气候干燥，舍内湿度较低，气管流失过多的水分，造成气管纤毛发生脱落，导致病原菌更容易感染气管粘膜而引起发病；粉尘过多与痰液相互混合，导致气管、支气管堵塞。所以要保持环境卫生，防寒保温，减少温差、降氨降尘。饲养密度适宜，营养均衡，防止应激，增强抵抗力，尽可能避免不良因素刺激[21]。

5.2 加强生物安全，控制病原传播

加强外部与内部生物安全管理，外部生物安全通常以堵为主，内部生物安全以净化为主[22]。外防通过养殖场的建设、外部车辆及人员入场的管理、生态及水等环境评价、种源及外来投入品的质量把控等防止外界或新的病原微生物侵入鸡只体内。另外，内部生物安全管理应抓好基础免疫、检测净化、环境消毒、人员及物品管理等细节，还有加强病死家禽、带毒（菌）家禽、鼠类和蚊、蝇、蜱、虻等媒介昆虫的管理，正确处理、杀灭并防止其繁殖，有效防止疾病传播和蔓延等[23]。另外，养殖场建设要避开候鸟和野鸟的迁徙路线，避免接触未受保护的病鸟或死鸟，以尽量减少潜在疫情传播风险[24]。

5.3 强化疫病监测，严防大规模流行

从鸡支气管堵塞病原来看，AIV、NDV 等传染性较强的疫病病原体常并发呼吸道感染，Musa, W.I.等[25]研究确定了尼日利亚两个州鸟类中AIV 和NDV 的合并感染状况，并预见这些病毒交换遗传物质以增加毒性而复活的可能性。因此，常规的AIV 和ND 控制措施应包括病毒监测，并对饲养的家禽和野生鸟类采取适当预防措施。 Huang, Q.等[26]研究结果表明，与AIV、IBV 分别感染鸡相比，AIV+IBV 联合感染组表面活性剂蛋白A（SP-A）表达水平显著降低。提示在防治该病过程中，尽可能减少多病原互作，可一定程度减少病症程度。

5.4 活禽市场管理，预防公共卫生事件

Young, S.G.等[27]利用生态位模型确定了H5N1 和H9N2 亚型AI 在埃及的生态位的环境、行为和种群特征。不同亚型的生态位显著不同。利用单亚型流感暴发和公开可用的生态数据，以较高的精度确定了可能发生合并感染的区域。并证明距离活禽市场的距离是联合感染的一个强有力的预测因子。 Su, S. 等[28]2013 年首次从活禽交易市场分离H7N9 亚型AIV，表明了中国现有的家禽贸易和活禽市场体系对人类所构成的持续威胁，病毒的不断进化对公共卫生和家禽业构成了长期威胁，因此必须加强活禽交易市场的防控管理。 2016-2017 年，铁岭市城乡活禽市场外环境中存在致病性禽流感传播风险，AIV 主要为H5 和H9 亚型，应加强城乡活禽市场的管控[29]。农贸市场和活禽市场AIV 阳性率分别为36.1%和47.0%，明显高于其他场所[30]。

5.5 加快药物及疫苗研发，进行有效防治

以AIV 为例，一般来说，高致病性疾病因其高死亡率和典型病变很容易做出临床诊断，而低致病性毒株引起的疾病通常不易识别，且低致病性毒株可变成高致病性毒株。 AIV 的控制是在根除疾病来消灭病毒的基础上，建立一个使用灭活疫苗来降低病毒增殖速度的疫苗接种计划，最终实现消灭病毒[14]。 AIV 疫苗包括灭活疫苗、基因工程疫苗、减毒活疫苗等。由于流感病毒亚型较多，基因重组等问题，虽已经研发出各种流感病毒疫苗，但疫苗在临床应用中仍然有较多缺点[31]，另外，随着疫苗的使用，基因重组的倾向性可能使病毒在野外的进化和多样性增加，疫苗可能并非是解决病毒感染的最优办法。

中药在治疗病毒性疾病方面具有治愈率高、耐药性低、预后良好的特点。大多数中药在抗病毒的同时，还具有调节免疫功能、解热镇痛、抗菌消炎等综合疗效。中药抗病毒研究已经取得了较大进展，但仍有许多问题需要解决[32]。