不同临床特征乳腺癌患者血清中VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平表达及临床意义

施静　周春龙　张海霞　欧雪峰　曾锦婷　张燕　孔秀平

【摘要】 目的：了解不同臨床特征乳腺癌患者血清中血管内皮细胞生长因子（VEGF）、VitD、铁蛋白（SF）、趋化因子20（CCL20）及结缔组织生长因子（CTGF）水平表达情况，并探讨其临床意义。方法：选择2018年7月-2020年4月在深圳市宝安区福永人民医院和龙华区人民医院妇产科确诊为乳腺癌的103例患者作为乳腺癌组，89例乳腺良性肿瘤患者作为乳腺良性肿瘤组，同时选取120名健康体检者作为对照组。分别比较三组血清中VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平;比较乳腺癌组中不同临床特征者VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平，并分析各指标间的相关性。结果：乳腺癌组血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平均高于乳腺良性肿瘤组和对照组，而VitD水平明显低于乳腺良性肿瘤组和对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。乳腺良性肿瘤组SF和CTGF水平均高于对照组（P<0.05）;Ⅲ、Ⅳ期和癌瘤长径>5 cm、有淋巴结转移及中、低度组织分化的乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平明显更高，而VitD水平更低（P<0.05）。乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平两两之间均呈正相关，而VitD水平与各指标均呈负相关（P<0.05）。结论：乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平明显升高，而VitD水平明显降低，且与乳腺癌的临床分期、癌瘤长径、是否有淋巴结转移及组织分化严重程度有关。因此，加强VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平检测对乳腺癌的早期诊断及不同临床特征分析具有一定的参考价值。

【关键词】 乳腺癌 血管内皮细胞生长因子 VitD 铁蛋白 趋化因子20 结缔组织生长因子

[Abstract] Objective： To investigate the expression levels of vascular endothelial cell growth factor （VEGF）， VitD， ferritin （SF）， chemokine 20 （CCL20） and connective tissue growth factor （CTGF） in serum of breast cancer patients with different clinical characteristics， and to explore their clinical significance. Method： A total of 103 patients diagnosed with breast cancer in the department of obstetrics and gynecology of Shenzhen Baoan District Fuyong Peoples Hospital and Longhua District Peoples Hospital from July 2018 to April 2020 were selected as the breast cancer group， and 89 patients with benign breast tumor were selected as the breast cancer group. Meanwhile， 120 healthy subjects were selected as the control group. The levels of VEGF， VitD， SF， CCL20 and CTGF in serum of the three groups were compared. The levels of VEGF， VitD， SF， CCL20 and CTGF in breast cancer group with different clinical characteristics were compared， and the correlation among the indicators was analyzed. Result： The serum levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF in breast cancer group were higher than those in benign breast tumor group and control group， while the level of VitD was significantly lower than those in benign breast tumor group and control group， with statistical significance （P<0.05）. The levels of SF and CTGF in benign breast tumor group were higher than those in control group （P<0.05）. The serum levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF were significantly higher and the level of VitD was lower in the breast cancer patients with Ⅲ and Ⅳ stage， >5 cm tumor length and diameter， lymph node metastasis and moderate and low tissue differentiation （P<0.05）. The serum levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF in breast cancer patients were positively correlated with each other， while the level of VitD was negatively correlated with each index （P<0.05）. Conclusion： The levels of VEGF， SF， CCL20 and CTGF in serum of breast cancer patients are significantly increased， while the level of VitD is significantly decreased， which are related to the clinical stage of breast cancer， tumor length and diameter， lymph node metastasis and the severity of tissue differentiation. Therefore， strengthening the detection of VEGF， VitD， SF， CCL20 and CTGF levels have certain reference value for the early diagnosis of breast cancer and the analysis of different clinical characteristics.

[Key words] Breast cancer VEGF VitD SF CCL20 CTGF

First-authors address： Shenzhen Baoan District Fuyong Peoples Hospital， Shenzhen 518103， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.19.002

乳腺癌是临床上目前最为常见的一种女性恶性肿瘤之一，其发病率呈逐年上升趋势，且不断年轻化，严重影响女性身心健康和生活质量[1-3]。乳腺癌发病病因及机制目前尚未完全明确，有研究表明，乳腺癌发病可能与种族、年龄、遗传、饮食结构及激素水平等多种因素[4-5]。乳腺癌患者致死的主要原因是癌细胞的浸润和转移，而癌细胞的浸润和转移与肿瘤细胞的恶性增生、组织新生血管的形成、黏附、迁移及分泌蛋白降解基质等多种因素的调控有关[6-8]。为此，本研究对与癌细胞的增殖、分化、新生血管生成、慢性炎症及组织纤维化等有关的血管内皮细胞生长因子（VEGF）、VitD、铁蛋白（SF）、趋化因子20（CCL20）及结缔组织生长因子（CTGF）水平在乳腺癌患者中的表达情况及临床意义进行了探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年7月-2020年4月在深圳市宝安区福永人民医院和龙华区人民医院妇产科确诊为乳腺癌的103例患者作为乳腺癌组，89例确诊为乳腺良性肿瘤患者作为乳腺良性肿瘤组，另选取120名健康体检者为对照组。纳入标准：女性;临床资料完整;乳腺癌组与乳腺良性肿瘤组均经临床体征、影像学检查及术后组织学活检确诊[9]，均为初次确诊;未进行放、化疗及相关性治疗;未服用VitD补充剂及钙调节剂。排除标准：伴有心、脑、肝及肾等严重疾病者;出血性疾病者;伴有其他肿瘤者;精神疾病及不配合研究患者。所有患者及家属均知情同意并签署知情同意书，本研究已经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 标本采集及处理 清晨空腹抽取2份静脉血，每份3～5 mL，室温静置30 min后离心分离血清及时检测，不能及时检测者置-20 ℃保存。冰冻标本取出后须室温放置30 min，待其完全复溶后才能再行检测。

1.2.2 VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平检

测 VEGF、CCL20及CTGF水平采用酶联免疫吸附法（ELISA法）进行检测，VitD和SF水平分别采用电化学发光免疫法和免疫比浊法对进行检测。所有操作均严格按仪器及试剂说明书进行，确保检测结果的准确性和一致性。

1.3 观察指标 （1）比较三组VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平。（2）比较乳腺癌组中不同临床分期、不同癌瘤长径、是否有淋巴结转移及不同组织分化程度者的VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平。（3）分析乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF各水平之间的相关性及VitD与各指标的相关性。

1.4 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用方差分析;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。相关性采用Pearson相关系数分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较 乳腺癌组年龄29～62岁，平均（43.85±12.54）岁。临床分期：Ⅰ、Ⅱ期72例，Ⅲ、Ⅳ期31例;癌瘤长径：>5 cm 27例，2～5 cm 37例，<2 cm 29例;有淋巴结转移38例，无淋巴结转移65例;高组织分化77例，中、低度组织分化26例。乳腺良性肿瘤组年龄28～60岁，平均（42.37±11.93）歲，对照组年龄27～63岁，平均（41.86±14.62）岁。三组年龄比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 三组VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平比较 乳腺癌组VEGF、SF、CCL20及CTGF水平均高于乳腺良性肿瘤组和对照组，而VitD水平明显低于乳腺良性肿瘤组和对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。乳腺良性肿瘤组SF和CTGF水平均高于对照组，差异均有统计学意义（t=3.915 3、5.354 7，P<0.05），而VEGF、VitD、CCL20两组间比较，差异均无统计学意义（t=1.884 4、1.206 4、0.526 1，P>0.05）。见表1。

2.3 乳腺癌组中不同临床特征者VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平比较 Ⅲ、Ⅳ期和癌瘤长径>5 cm、有淋巴结转移及中、低度组织分化的乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF水平均明显更高，而VitD水平更低，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.4 乳腺癌患者VEGF、SF、CCL20、CTGF及VitD水平之间的相关性分析 乳腺癌患者血清中VEGF、SF、CCL20及CTGF各水平之间均呈正相关，而VitD水平与各指标水平之间均呈负相关（P<0.05），见表3。

3 讨论

乳腺癌是女性高发、高度异质的一种全身性恶性肿瘤，发病率高，居女性妇科恶性肿瘤的首位，严重威胁妇女身心健康甚至危及生命，是导致女性死亡的主要原因之一[10-11]。及早发现和早期确诊乳腺癌患者，并及时采用有效的治疗措施，是提高乳腺癌患者疗效和术后生活质量的关键。因此，探索乳腺癌、乳腺良性肿瘤及健康人群中某些生化指标和/或免疫标记物水平表达情况，对乳腺癌患者早发现、早确诊和及时治疗具有重要的临床意义。

VEGF是由肿瘤细胞所分泌的一种分泌性二聚体糖蛋白，常高表达于各种肿瘤细胞中，与其受体结合后可刺激血管内皮增生，从而导致新生血管不断形成，为肿瘤细胞提供足够的营养，促进肿瘤细胞增殖和转移。有研究表明，乳腺癌患者VEGF水平升高，且临床分期越差，VEGF升高越明显[11-13]。本研究结果显示，乳腺癌患者VEGF水平明显升高，且临床分期越差、癌瘤长径>5 cm、有淋巴结转移及组织中、低度分化的乳腺癌患者VEGF水平更高（P<0.05），与有关研究报道基本一致[11，13]，这表明VEGF可能与乳腺癌发生、发展、侵袭及转移有密切相关。

VitD是一种脂溶性的类固醇衍生物，其除了具有调节血清钙、磷水平相对稳定和骨代谢生物活性外，还具有维持免疫、神经及肌肉的正常功能。另外，VitD还可诱导细胞凋亡、刺激细胞分化、抑制肿瘤增殖、调节免疫系统、抑制炎症、侵袭、转移及抗血管生成[14-15]。近年研究发现，25-（OH）D3与VitD受体（VDR）结合相互作用具有抗癌功能[16-17]。本研究结果显示，乳腺癌患者血清中VitD水平明显降低，且Ⅲ、Ⅳ期、癌瘤长径>5 cm、有淋巴结转移及中、低度组织分化的乳腺癌患者VitD水平更低（P<0.05），这说明乳腺癌的发生、发展可能与体内VitD水平降低有关，可能与VitD的缺乏导致T淋巴细胞细胞亚群数目及功能紊乱，使得机体的免疫功能下降，促进乳腺癌的发生和发展有关，具体作用机制有待进一步深入研究[17-18]。

SF是人体内贮存铁的一种可溶组织蛋白，主要参与机体的铁代谢。有研究表明，恶性肿瘤能促进SF异构体的合成和分泌，从而导致血清SF水平显著升高[6，10，19]。本研究结果显示，乳腺癌患者血清中SF水平明显升高（P<0.05），且升高幅度与乳腺癌患者临床分期、淋巴结转移情况、癌瘤长径及组织分化程度等密切相关，乳腺良性肿瘤组SF高于对照组（P<0.05），与文献[6，10，19]报道一致，这表明高水平的SF可能与乳腺癌有关，轻度升高时要注意排除乳腺良性肿瘤。

趋化因子是一种分泌性小分子蛋白，可通过聚集内皮细胞、促进血管发生及促进肿瘤细胞侵袭性等方式促进肿瘤细胞的增殖及转移，与炎症和肿瘤疾病的发生、发展有着密切联系。其中CCL20是趋化因子大家族中的一员，可趋化淋巴和中性粒细胞，与多种恶性肿瘤的侵袭和转移有密切相关[20-21]。本研究结果显示，乳腺癌组血清中CCL20水平明显高于乳腺良性肿瘤和对照组（P<0.05），且与乳腺癌患者高风险的临床特征有关，临床特征越差，CCL20水平升高越明显，表明乳腺癌患者可能容易造成炎症反应，促进肿瘤细胞增殖及迁移，加速乳腺癌的发展进程。

CTGF是一种细胞间基质蛋白，具有刺激成纤维细胞增殖与分化、介导多种肿瘤细胞黏附、迁移及凋亡，促进新生血管的生成及组织纤维化，有研究结果表明，CTGF与多种恶性肿瘤的发生和发展有密切关系[22-23]。本研究結果显示，乳腺癌患者血清中CTGF水平明显高于乳腺良性肿瘤组和对照组，且乳腺良性肿瘤组高于对照组（P<0.05），这表明CTGF可能与乳腺癌的发生、发展及组织纤维化有关，但轻度升高时要结合其他指标进行综合性判断，注意与乳腺良性肿瘤进行鉴别。

综上所述，乳腺癌患者容易新生成肿瘤血管，引发炎症，出现纤维化，为肿瘤细胞的增殖及迁移创造条件。因此，加强乳腺癌患者血清中VEGF、VitD、SF、CCL20及CTGF水平检测，对及时筛查、早期诊断、判断病情和组织分化程度及有无淋巴结转移具有一定的临床意义，值得临床推广应用。

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（收稿日期：2020-08-27） （本文编辑：田婧）