藏药七味螃蟹甲颗粒制剂工艺实验研究

益西拉姆 杨春艳 罗珍

（西藏藏医药大学，西藏 拉萨 850000）

呼吸道感染是日常生活中的常见病、多发病，有多发性、普遍性、易感性的发病特征。上呼吸道感染有70%～80%由病毒引起，另有20%～30%的上感由细菌引起。目前治疗上呼吸道感染主要有抗菌药物、抗病毒药物。七味螃蟹甲由高山螃蟹甲、高山辣根菜、诃子、天竺黄、甘草、檀香、丁香七味药材组成。具有抗菌，抗炎、抗病毒、解热、镇咳祛痰等药理作用，对上呼吸道感染也有一定疗效。临床用药效果显著，但由于儿童用药不便，用药剂量大等缺陷，应用范围存在一定的局限性。故本课题针对藏药七味螃蟹甲在临床经验方基础上不断完善提取工艺和剂型改进进行研究。

高山螃蟹甲中含有氨基酸、蛋白质、多糖、鞣质、酚类有机酸、黄酮、香豆素、蒽醌、三萜、甾体、皂苷等成分［1］。早期药理研究表明，高山螃蟹甲中皂苷可能是镇咳祛痰的有效成分。赵斌对藏药螃蟹甲的镇咳祛痰平喘作用的有效成分进行研究后发现，藏药螃蟹甲的乙酸乙酯部位、正丁醇部位均有较好的镇咳祛痰平喘作用。也有研究表明螃蟹甲的乙酸乙酯部位和正丁醇部位均有较好的镇痛抗炎作用。螃蟹甲的块根进行水提和醇提后的提取物对耐亚胺培南铜绿假单胞菌、葡萄球菌都有明显的抗菌作用［2］。因此采用水提法提取螃蟹甲中的主要有效成分。

高山辣根菜是藏药治疗咳嗽的主要药材之一。《藏医卷》记载高山辣根菜具有清热、养肺、止咳、退烧、滋补元气的功效，主要用于肺热及肺病引起的咳嗽、咳血、肺水肿、气管炎、发热等的治疗［3］。高山辣根菜用水提取后提取物对浓氨水、二氧化硫刺激引起的小鼠咳嗽有抑制作用，对枸橼酸引起的豚鼠咳嗽也有抑制作用，也能抑制二甲苯、角叉菜胶诱发的急性炎症［4］。说明高山辣根菜水提物对止咳及抗炎具有一定的作用。

诃子在我国传统医药及少数名族药用史中具有很高的药用价值，享有“藏药之王”之美誉。现代天然药物化学及药理学研究表明，诃子主要药效组分为鞣质酚酸类、三萜类、黄酮类及多糖等，具有抗氧化、抗糖尿病、抗病原微生物、抗炎、镇痛、抗肿瘤、治疗阿尔兹海默病及镇咳等多种药理作用［5］。其中鞣质酚酸类是其最重要的一大类成分。根据成分分析可采用水提法取其有效成分。

甘草属于三萜类化合物，其通过分离可以得到生物碱以及多糖等成分，具有较强的抗炎、抗病毒。抗菌等作用［6］。甘草次酸对中枢镇咳具有显著的作用，通过水提法提取甘草中的主要有效成分总皂苷及总黄酮，提高药效。

天竺黄具有清热豁痰，凉心定惊的功效。用于热病神昏，中风痰迷，小儿痰热惊痫、抽搐、夜啼。檀香挥发油具有抑菌作用。丁香中含有丁香酚、丁香酚乙酸乙酯、石竹烯等挥发性成分以及山奈酚、鼠李素等黄酮类成分，具有抗氧化、抗菌、抗炎、解热、抗病毒等广泛的药理活性，丁香乙醇提取液具有良好的体外抗菌作用，毒副作用低。此次天竺黄、丁香、檀香打粉，过100目筛，粉末直接入药。

天竺黄具有清热豁痰，凉心定惊的功效。用于热病神昏，中风痰迷，小儿痰热惊痫、抽搐、夜啼。檀香挥发油具有抑菌作用。丁香中含有丁香酚、丁香酚乙酸乙酯、石竹烯等挥发性成分以及山奈酚、鼠李素等黄酮类成分，具有抗氧化、抗菌、抗炎、解热、抗病毒等广泛的药理活性，丁香乙醇提取液具有良好的体外抗菌作用，毒副作用低。此次天竺黄、丁香、檀香打粉，过100目筛，粉末直接入药。

1 仪器与材料

1.1 实验仪器

DK-8D 电热恒温水浴锅（上海齐欣科学仪器有限公司）；AL204-lC 电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；DZF-6053 真空干燥箱（上海齐欣科学仪器有限公司）；药筛（上虞市银河测试仪器厂）。

1.2 实验材料

高山螃蟹甲、高山辣根、诃子、天竺黄、甘草、檀香、丁香七味药材；矫味剂；糊精(成都市科隆化学品有限公司，批号:2020041301)；可溶性淀粉（成都市科隆化学品有限公司，批号:2020030501）；无水乙醇(成都市科隆化学品有限公司，批号:2020022102)均为药用规格。

2 实验方法

2.1 方法

按照制剂组方配比，称取高山螃蟹甲20g、高山辣根菜10g、诃子10g、甘草10g 四味药材为1 剂，共9 剂，按表1 和表2 进行正交实验提取，滤过，滤液合并，浓缩至一定体积（相对密度1.1～1.2,），置于干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，在80℃干燥2h，置干燥器中冷却2h，称重，计算浸膏得率。

四种藏药材有效组分提取工艺以L9(33)正交试验的筛选，以溶剂量及煎煮次数和煎煮时间三因素为考察因素，用来确定制剂组方中有效药用成分最佳提取工艺。考察指标为提取率。

正交试验优选煎煮提取工艺。表1 为试验因素，表2 为正交试验设计与结果，表3 为正交试验结果方差分析。

表1 正交实验因素水平表

表2 正交实验设计方案表

表3 正交实验结果进行方差分析表

2.2 制粒工艺

2.2.1 处方

处方1：高山螃蟹甲、高山辣根菜、诃子、甘草提取物5g，檀香6g，丁香10g,天竺黄10g细粉。

处方2：高山螃蟹甲细粉20g、高山辣根菜细粉10g、诃子细粉10g、甘草细粉10g、檀香6g、丁香10g、天竺黄10g细粉。

2.2.2 制备。将四味药材提取液浓缩至流浸膏（相对密度1.1～1.2），加人檀香6g，丁香10g,天竺黄10g 和适量可溶性淀粉、淀粉浆，16目不锈钢筛制粒，65℃干燥。将草莓味香精溶于乙醇喷洒在干燥颗粒表面。整粒，包装。

将七味药材按处方比例粉碎，过100目筛，加入不同浓度的乙醇制软材，过，16目不锈钢筛制粒，65℃干燥。将草莓味香精溶于乙醇喷洒在干燥颗粒表面。整粒，包装。

对颗粒的粒度、水分、溶化性、成型率、松紧程度、口感等指标，确定最适的配比。实验结果见表4。

表4 七位螃蟹甲颗粒制粒工艺试验结果

3 结果分析

正交试验设计是研究多因素多水平试验的科学方法。本次试验是采用3 因素、3 水平正交试验的方法优化提取工艺条件，采用多重试验的方法制定颗粒剂的制粒工艺。因此，本次实验我们试采用正交设计方法进行七味螃蟹甲颗粒剂提取工艺的筛选。经方差分析，对四味药材的提取率，煎煮次数具有显著性影响；煎煮时间的影响不具备统计学意义；溶剂量具有显著性影响。煎煮次数的影响大于溶剂量大于煎煮时间。煎煮次数为三次时，效果最好。可见最佳提取工艺为：A3B2C3，即煎煮次数3 次，时间1 小时，溶剂量为8。

图1 方差分析过程

在制粒工艺的实验中，通过6 次实验对比，处方1辅料中可溶性淀粉10g，10%淀粉浆8ml，所得颗粒各方面指标良好，故选用该比例制粒。处方2 选用60%乙醇做为润湿剂，所得颗粒各方面指标良好。质量检验均符合规定，说明所制定的制粒工艺稳定可靠。本处方由于药材本身含糖量较高，不需要加入矫味剂口感适宜。

采用原药材粉末按照组方制剂配方湿法制粒与四味药材提取加三味药材粉末直接入药进行湿法制粒两种方式获得七味螃蟹甲颗粒剂，为进一步研究药效奠定基础。