手术建立食蟹猴遥测动物模型的体会

蔡勇强

（浙江大学医学院附属第二医院科研部，浙江 杭州310009）

食蟹猴为猴科，猕猴属，主要分布与泰国、老挝、越南、马来西亚等国。食蟹猴体形较小，在生理上与人类比较相近，是医学和生命科学研究中广泛采用的理想实验动物。我院大动物实验中心长期选择使用食蟹猴做实验动物模型，特别是在心血管疾病方面的研究需要长时间的心电的监测，所以食蟹猴手术皮下埋入植入子遥测数据就是一种长期选择使用的方式。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取我院大动物实验中心2016年6月～2020年12月实施手术造模的28只食蟹猴的临床资料，全部为普通级雄性食蟹猴，6～8岁，体重7～9kg，来源于苏州西山中科实验动物有限公司和广西防城港常春生物技术开发有限公司。

1.2 主要仪器与设备GENIX-1010遥测植入子、GENIX-2010五通道接收器、ADI数据记录仪，恩识医疗科技(上海)有限公司生产；威利高频电刀；猴专用马甲。

1.3 饲养环境 浙江大学医学院附属第二医院大动物实验中心饲养室普通环境单笼饲养，温度18～24℃，湿度40%～70%，换气次数8～12次/h,照明时间每天12h（7：00开灯，19：00关灯自动循环控制），动物笼具为特制不锈钢网笼：宽×深×高95cm×80cm×85cm,动物可用底面积为0.76m2。

2 食蟹猴遥测模型建立和使用过程中出现的临床异常情况

本文对我院大动物实验中心28例食蟹猴遥测动物模型的建立和应用过程中曾出现的切口感染、自助拆线、手术切口线头排异反应等所致感染的临床异常资料进行回顾和分析，报告记录显示切口感染3例，术后动物自助拆线1例，手术切口线头排异反应所致感染1例。

3 食蟹猴遥测模型建立和使用过程中的关注点

3.1 动物手术个体的选择 手术前期应加强观察准备手术的食蟹猴近期体重的变化，有无脱毛、皮肤瘙痒的情况，有无腹泻或致笼内不清洁行为的食蟹猴。加强饲养管理对发现的异常情况及时处理，选择体格健壮、毛发光亮、个体卫生良好、精神状态活跃的食蟹猴。

3.2 动物手术方法的改进和注意事项

3.2.1 植入子预处理 感染是人工材料植入手术的严重并发症，不但治疗困难，而且还可能导致手术失败，植入子埋入食蟹猴皮下肌肉后与机体形成一个纤维化组织界面，是一个免疫功能不完善的纤维炎症反应区域，病原菌吸附过多会附着在植入子表面或这个囊形纤维化包膜内逃避机体的免疫防御，再加上一些细菌耐药菌株出现使后续的治疗变得困难，因此预防感染就显得十分重要。植入子在埋入食蟹猴体内前都会在医院先进行环氧乙烷消毒，使用时打开，根据齐卫红等人的经验，使用前应在加有抗生素的生理盐水中浸泡植入子20min。

3.2.2 无菌操作 食蟹猴遥测动物模型造模手术成功的关键是无菌操作，避免创口污染所致的感染。导致创口感染的因素很多，有空气污染，更主要的还是接触性污染，包括手术器材、缝线、缝针、创巾与手术人员和动物皮肤不小心接触等。故手术参与人员要加强无菌观念，严格执行各项无菌技术操作是预防动物术后感染的关键。动物手术前手术室必须清洁、彻底消毒，手术用品高压灭菌，手术人员与助手严格遵守洗手、手消毒、穿一次性无菌手术衣、戴一次性无菌橡胶手套等无菌操作规程，每个环节都应严格遵循无菌原则。

3.2.3 动物手术 术前手术室用75%酒精喷洒，人员退出时紫外线灯照射2h严格消毒灭菌。食蟹猴禁水禁食8～12h,手术部位剃毛、清洁，手术进行前按20mg/kg注射盐酸氯胺酮注射液进行麻醉，麻醉后将其仰卧、十字形固定在手术台上对手术部位用聚维酮碘溶液消毒，并用75%的酒精脱碘，显露出手术部位。用心电图机测试电极安放位置，选取合适的电极放置位置，并用记号笔标记（电极一端留置在左肋腹部皮下，另一端心电电极放置在胸骨右侧第一肋间皮下）。手术时，根据实验需求在左侧肋腹部切开皮肤，制作2cm×4cm的皮下囊袋，埋入动物遥测植入子。心电记录电极按选择并标记的安放位置埋入，一端在左肋腹部皮下，一端心电电极通过皮下隧道引至胸骨右侧第一肋间皮下，模拟体表Ⅱ导联心电图，使用遥测软件检查心电信号确认信号接收正常后皮下电极缝合固定，缝合切口。创口全部缝合后再用聚维酮碘溶液消毒，肌肉注射抗生素，给食蟹猴穿好专用的防咬马甲，移回笼舍观察苏醒。

4 术后护理

食蟹猴遥测模型成功建立后，兽医和饲养人员的护理是很关键的。每日要给动物肌肉注射80万IU青霉素钠，连续注射5d，早晚给动物手术部位创口擦拭碘伏消毒预防感染，提供品种多样、品质新鲜的水果补充维生素，促进创口愈合，但是在创口愈合过程中也还是有很多因素影响模型动物的正常使用。

4.1 切口感染 食蟹猴手术造模成功后切口感染是术后最多见的临床异常，因为在伤口基本愈合时，局部会瘙痒，食蟹猴经常用口去舔舐伤口，用手脚去挠手术部位，虽然动物术后穿有专用马甲可以起一定的保护作用，但实际情况中有些食蟹猴的切口还是被污染、感染，造成伤口愈合时间延长，给护理增加困难。所以每天要用碘伏擦拭伤口2次，可以起到消毒伤口、止痒的作用。

4.2 自助拆线 术后自助拆线的食蟹猴笔者遇见过一例，发现时腹肋部的马甲已经破损严重，并且切口周围红肿、有脓性感染性分泌物，已经可以看见埋入的植入子，电极导线，此时必须及时处理。在食蟹猴被麻醉后从猴笼内移出至治疗室，伤口清创，检查植入子及导线、埋植入子的皮下囊袋用双氧水反复清洗，重新缝合创口，周围皮肤再消毒，重新换上新的马甲，肌注抗生素，最后将动物放回原笼位。

4.3 手术切口线头排异反应 手术切口线头排异反应是术后拆线后一段时间内总发现切口一端不时有白色或呈粉红色的液性物体。在麻醉动物后清洗、消毒创口后仔细观察才发现皮下有个瘘孔一个黑头留在里面，用止血钳夹起后不能完全夹出来，后分析应该是皮下肌肉层缝合后留下的线头长了一点，导致一部分扎到皮肤表面长期刺激造成的排异反应，所以把线头拉起用无菌止血钳夹住线头，再用无菌手术剪拆除，剪掉后表面皮肤消毒处理，连续处理几日后这个问题也解决了。