四川省金堂县兔病毒性出血症2型的流行病学调查

梁璐琪，李敏，杨曦，陈冬，丁梦蝶，陈斌*

（1.四川省动物疫病预防控制中心，四川成都 610041；2.成都市动物疫病预防控制中心，四川成都 610041；3.四川省金堂县动物疫病预防控制中心，四川金堂 610400）

兔病毒性出血症2型又名兔瘟2型，是由杯状病毒科兔病毒属的兔病毒性出血症2型病毒（RHDV2）引起的一种急性、热性、高度致死性传染病。较兔瘟（RHDV）的死亡率低，约为5%～70%［1］。8周龄以下兔对RHDV不易感，但RHDV2可使11日龄的仔兔发病、死亡［2-4］。RHDV主要感染家兔，野兔不易感，但RHDV2可感染家兔和多种野兔［5-8］。

1 调查目的

2020年4月，成都市金堂县两兔场的家兔陆续出现体温升高、神经症状，部分出现腹泻、口鼻部有血色泡沫状分泌物，少数惊叫后死亡，发病前均免疫RHDV疫苗。兔场存栏约3 500只家兔，截至4月30日累计发病死亡1 592只，平均死亡率为45.5%。为弄清家兔异常死亡的原因，笔者开展了本次流行病学调查。

2 病例定义

2.1 疑似病例 2020年4月13日以来，免疫经典RHDV疫苗仍异常死亡的；从RHDV2流行国家或地区引种的；有发热、厌食、腹泻、口鼻流血色泡沫状分泌物，黄疸等；肝脏呈黄棕色、质易碎，脾脏肿大、边缘有圆形肿大结节，气管黏膜充血，肺和气管有大量泡沫状液体，肺水肿、阻塞等。出现以上任一情况，可判为疑似病例。

2.2 确诊病例 采集疑似病例的口鼻腔拭子、血清以及肝、脾、肾、肺等组织，根据2018版《OIE陆生手册》特异性引物“14U1”和“RVP60-L1”扩增出794 bp特征性阳性片段的，可判为确诊病例。

3 调查方法

3.1 现场调查 询问相关人员日常管理、引种、销售、发病、免疫、人员和车辆流动等情况。

3.2 流行病学调查 对发病场和具流行病学关联的场点，依前述“病例定义”搜索疑似病例，并采样。

4 调查结果

4.1 现场调查结果

4.1.1 兔场Ⅰ 兔场Ⅰ位于成都市金堂县转龙镇。2019年10月从同镇A某场引种57只法国伊拉兔，自繁自养。发病前存栏约1 000只，截至4月30日，剩下437只，死亡率达56.3%。

该场2020年3月接种过兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗。4月20日发病，家兔出现体温升高，精神沉郁，腹泻，神经和呼吸道症状，最急性的在1～2 h死亡。剖检见腹部皮下出血，肝脏肿大、黄疸、质易碎，脾脏边缘梗死（图1），肺部充血，气管喉头出血，肠道有出血点。紧急免疫未见明显好转，判为疑似病例。同镇B某曾为该场解剖。

图1 发病死亡兔剖解病变

4.1.2 兔场Ⅱ 兔场Ⅱ也位于成都市金堂县转龙镇。2019年10月由金龙镇的C某场提供伊拉兔与比利时兔杂交兔，自繁自养。发病前存栏约2 500只，截至4月30日，剩下1 471只，死亡率达41.2%。

该场2020年3月19日接种过兔病毒性出血症、多杀性巴氏杆菌二联蜂胶灭活疫苗。4月22日相继表现出与兔场Ⅰ相似的临床症状。再次紧急免疫未见明显好转，判为疑似病例。

图2 发病兔场核酸检测（RHDV2）的RT-PCR电泳结果

4.2 实验室检测结果 按照相关要求，分别将疑似病例的肝、脾混样检测，肾、心、肺混样检测，经PCR扩增电泳，结果均可见794 bp特异性条带（图2）。经测序和Blast比对，阳性序列均与RHDV2参考毒株的VP60基因高度同源，故判为RHDV2确诊病例。

4.3 流行病学调查结果

4.3.1 金堂县转龙镇A某场曾为兔场Ⅰ供兔，该场自2018年起自繁自养伊拉兔，2019年8月末次引种，存栏约1 400只。经调查该场兔群无明显临床异常，按相关要求采样检测均为阴性。

4.3.2 金堂县转龙镇B某曾为兔场Ⅰ解剖，B某的兔场于2019年12月最后一次引种，自繁自养。经调查该场兔群无明显临床异常，按相关要求采样检测均为阴性。

4.3.3 金堂县金龙镇C某场曾为兔场Ⅱ供兔，该场自繁自养法国伊拉兔、比利时兔等，2019年3月末次引种，存栏约11 700只。经调查该场兔群无明显临床异常，按相关要求采样检测均为阴性。

4.3.4 金堂县紧急对县域内所有兔场开展紧急监测，其中采兔血样1 511份，环境样6 641份。全省监测兔鼻拭子2 141份，兔血样13 347份，兔组织样19份，环境样21 385份，共计36 892份。经检测均为兔瘟2型病毒核酸阴性。

5 结论与分析

5.1 根据临床表现、剖解病变、实验室诊断等确定本次发病病原为兔病毒性出血症2型。2020年5月21日农业农村部畜牧兽医局公布为我国首例兔病毒性出血症2型疫情。疫情发生后，当地已严格按规范进行了处置。

5.2 根据两场末次引种时间和该病最长潜伏期（约3 d）来分析，引种发病的可能性极低，目前国内尚无报道，应该是外来新发病。

5.3 两发病兔场相距较近，生物安全管理模式粗放。因新冠肺炎疫情，兔场附近有RHDV2型流行国家的回国人员，不排除通过人员、物品等从国外传入的可能；也可能由病毒污染的兔头、胴体带入养殖环节所致。

5.4 该病在我国和四川省均属新发的外来动物疫病，目前监测表明发病点范围仅局限于两邻近发病场，经全省监测排查，未出现新发阳性兔和新发疫情，表明疫情已得到有效控制。对于RHDV2，目前国内尚无相应的有效疫苗防控，需进一步严把引种检疫关，加大监测排查力度，及时发现、及时处置，同时加强从业人员宣传培训，开展疫苗科技攻关。■