微柱卡与试管法在新生儿溶血三项试验中的应用效果

穆耶赛尔·艾尼

（喀什地区第二人民医院，新疆 喀什）

0 引言

新生儿溶血病又被称之为母子血型不合疾病，实质是同族免疫性溶血，这会使胎儿在母体中或出生后出现大量红血球破坏，此类疾病是致使新生儿出现黄疸和贫血的主要原因之一，并且随着黄疸的加重会增加病情发展，诱发呼吸衰竭、心力衰竭等表现，并且还有部分严重病症者可能直接出现死胎等表现[1-2]。本次研究为了探寻溶血三项试验的有效检测方式特别选取2019 年10 月至2020 年10 月90 例疑似溶血病新生儿进行研究观察，最终得到了较为科学有效的成效，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

经我院伦理委员批准后，特别选取2019 年10 月至2020 年10 月于我院进行溶血三项试验的90 例疑似溶血病新生儿作为本次研究的主要对象，其中有男48 例，女42 例，年龄为0.5～8 d，平均（4.59±0.69）d，新生儿出现黄疸、贫血以及血红蛋白降低等疑似溶血病的表现，本次研究全部操作过程均按照严格的规范流程实施，在伦理委员会的监督下保证此次研究顺利完成的情况下，并且确保实验结果的规范性以及可信度，本次研究入选的新生儿家属必须知情并签署同意书。

1.2 方法

1.2.1 仪器配备

仪器：全自动血型仪器、正反定型血型试剂卡、自动判读机、离心机、恒温水箱以及移液器。

试剂：1% 木瓜酶、PBS 缓冲液、0.9% 生理盐水、0.2% 半胱氨酸溶液。

1.2.2 试管法

（1）使用生理盐水将受检的红细胞进行反复洗涤3 次以上配置为3% 的红细胞悬液，取其中1 滴加入抗人球蛋白试剂，进行离心处理；（2）再另取3 支无菌干燥试管，分别滴入两滴新生儿血清，然后分别标识A、B、O 不同试剂，放入恒温水箱之中将温度调节到37 ℃，大约孵育1 h 左右再使用生理盐水进行冲洗，然后加入抗人球蛋白试剂进行离心处理后观察。

1.2.3 微柱卡

（1）抽取新生儿静脉血进行离心处理，将其中红细胞进行压积，同样使用生理盐水将受检的红细胞进行反复洗涤3次以上配置为1%的红细胞悬液，将悬液放置于微柱凝胶孔之中，再次离心后放入自动判读机进行判读结果，如若红细胞最终凝聚在凝胶带上部则表示为（+）；（2）在微柱凝胶卡中分别加入A、B 以及O 三种红细胞，然后加入同剂量的新生儿血清，在37 ℃的恒温水箱中孵育15 min，最后离心观察结果即可；（3）将洗涤4 次以上的红细胞同等量的生理盐水进行融合放置于干燥试管之中，在56 ℃的恒温水箱中孵育10 min，进行离心操作后取上层清液为放散液备用，然后分别在3 个微柱凝胶之中放入等量的放散液以及A、B 以及O 三种红细胞，再次放入37 ℃的恒温水箱中孵育15 min，取出后进行低速离心后即可观察性质。

1.3 效果判定

直抗实验、放散实验以及游离实验均为（+）均可判定为阳性，如若检验结果出现差异则以放散实验结果为诊断标准[3-4]。

1.4 统计学方法

应用SPSS 15.0 软件包建立相关数据库，然后进行数据计算分析，计量资料均以（±s）表示，采用t检验；计数资料采用（%）表示，采用χ2进行检验，P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

通过不同方式进行检测后，微柱卡在直抗实验、放散实验、游离实验以及ABO-HDFN 等均优于试管法，差异具有统计学意义（P＜0.05）；其他抗体-HDFN 的检验中两组检验方式无明显差异（P＞0.05），具体见表1。

表1 对比两种检验方式不同试验结果[n(%)]

3 讨论

新生儿溶血病实质是属于免疫性溶血性疾病之一，母体同胎儿之间的红细胞IgG 血型不合从而诱发免疫疾病的出现，此类疾病出现的主要因素是由于夫妻血型不合或者母体同胎儿在妊娠时段中出现血液成分交换[5-6]。通常在妊娠时段病症便会开始出现，可造成流产、死胎等表现，存活的新生儿容易出现黄疸、贫血以及智力低下等表现。

溶血三项试验是能够有效判断此类疾病的方式，即是直抗实验、放散实验以及游离实验，以上检验联合临床表现通常可以确诊疾病。最早是使用试管抗球蛋白进行检验，此类检查方式是早期应用较为广泛的技术，但是手工操作过程较为复杂，并且容易受到血清、离心处理以及时长等多种因素的影响，并且很难反复使用，需要较多的标本用量。而微柱卡是一个固定的使用方式以及用量，很容易达到标准化的目的，对于实验人力、物力要求相对较小，并且操作简单容易普及，是利用凝胶颗粒对于分子进行排阻和表现，因此最终结果能够直观得到。并且微柱卡在一层层的检验操作之中极大程度避免了人为的参与，就减少影响最终结果的可能，增加了最终结果的真实性和可靠性[7-8]。

综上所述，使用微柱卡在新生儿溶血三项试验之中的应用效果更加明显，操作以及判定更加简便标准，具有极强的敏感性、特异性，连较弱的抗体都能够显示出，为临床进行治疗溶血疾病的过程中提供了真实有效的支持，能够做到早诊断、早治疗，值得在临床之中广泛应用并推广。