‘翠鸟’玉簪组培快繁技术初探

李丹，吴海红，岳玲，冯秀丽

（辽宁省农业科学院花卉研究所，辽宁沈阳 110161）

玉簪，又名白萼、白鹤仙，百合科玉簪属多年生宿根植物。原产于我国及日本。耐寒冷，在我国大部分地区都能露地越冬，喜阴湿环境，不耐强光直射。可用于林下地被植物，或公园、小区树荫下作为绿化植物使用，具有较高的观赏效果，花和根可做药用。多采用分株方式繁殖。‘翠鸟’玉簪是美国育种专家在2005年培育出的蓝叶系列品种之一，由于叶片分布有蜡质，影响叶片对光线的吸收和反射，致使叶片正面呈深蓝绿色，叶色是影响玉簪观赏价值的重要因素，具有极高观赏价值。近些年，随着经济的快速发展，玉簪作为绿化苗木被广泛应用，采用传统的繁殖方法已不能满足需求，该试验意在建立一套完整的‘翠鸟’玉簪组培快繁体系，为其大量快速繁殖提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

试验材料取自沈阳农业大学科研基地的‘翠鸟’玉簪幼苗，待6月份长出花葶，以花葶作为外植体。

1.2 方法

1.2.1外植体的采集与处理。选取生长健壮、无病虫害的植株，取新长出的幼嫩的花葶作为外植体使用。将花葶从基部剪下，用洗衣粉水洗掉表面灰尘，剪成3 cm左右的小段，在流水下冲洗30～40 min。沥干水分，放到超净工作台上备用。用75%乙醇擦拭表面，浸入0.1%的氯化汞溶液消毒，消毒时间设置为3、5、7 min。然后用无菌水冲洗3～5次。将花葶段两端与氯化汞接触部分各切掉0.5 cm，平铺接种到愈伤诱导培养基中。

1.2.2愈伤组织诱导培养基。以MS为基本培养基，添加不同浓度的6-BA与NAA，6-BA浓度为0.5、1.0、2.0 mL/L，NAA浓度为0.1、0.5、1.0 mL/L，共9个组合，添加蔗糖30 g/L，琼脂5 g/L。将处理好的外植体接种到愈伤诱导培养基中，每瓶接种1段，每个组合接种30瓶。

1.2.3芽增殖培养基。将带有小芽的愈伤组织切成小块接种到增殖培养基中，以MS为基本培养基，添加6-BA浓度为0.5、1.0、2.0 mL/L，NAA浓度为0.01、0.1 mL/L，共计6个组合。每瓶接种1块愈伤组织，每个组合接种10瓶。

1.2.4生根培养基。当丛生苗长到3～5 cm，切下接种到生根培养基中。基本培养基采用1/2MS，添加NAA浓度为0.01、0.05、0.10 mL/L，蔗糖20 g/L，琼脂5 g/L。14 d后统计生根率。

2 结果与分析

2.1 外植体灭菌时间的选择

从表1可以看出，3 min的灭菌时间污染率较高，由于花葶比较幼嫩，7 min的灭菌时间导致组织被杀死，成活率不高，所以‘翠鸟’玉簪的花葶段最佳的灭菌时间为5 min。

表1 外植体灭菌时间的选择

2.2 诱导培养基的选择

从表2可以看出，当6-BA浓度达到2.0 mL/L，NAA的浓度为0.1～0.5 mL/L时，诱导率最高，且诱导的愈伤组织质地较密，呈深绿色，有芽点可见；当NAA的浓度达到1.0 mL/L时，也有较高的诱导率，但愈伤组织颜色较浅，质地疏松，芽点也较少。由此可见，高浓度的6-BA与低浓度的NAA组合有利于花葶愈伤组织的诱导。

表2 不同浓度6-BA、NAA对花葶愈伤诱导的影响

2.3 增殖培养基的选择

从表3可以看出，将长有丛生芽的愈伤组织切块，切掉芽的叶片部分，只保留生长点，接种到增殖培养基中，各个激素组合的培养基中芽都会产生增殖，6-BA浓度过高或过低，芽的增殖系数都比较小，6-BA浓度为1.0 mL/L，NAA为0.01～0.1 mL/L时，增殖系数较高，为适合丛生芽增殖的激素组合。

表3 不同浓度6-BA、NAA对芽增殖的影响

2.4 生根培养基的选择

从表4可以看出，将长到5 cm左右的不定芽从基部在愈伤组织上切下，接种到NAA不同浓度组合的生根培养基中，2周以后观察生根情况。当NAA浓度为0.1 mL/L时，只有少量的苗生根，且根数较少，比较瘦弱；当NAA浓度为0.01～0.05 mL/L时，生根率可达到90%以上，根质量较好，适合移栽。

表4 不同浓度NAA对生根的影响

3 结论

在建立‘翠鸟’玉簪组培快繁体系的过程中，幼嫩的花葶可以作为适合的外植体，既可以不破坏植株，又能保证材料充足。外植体达到最佳效果的灭菌方法是采用氯化汞5 min。诱导花葶产生愈伤组织的最佳培养基与激素组合为MS基本培养基，添加6-BA 2.0 mL/L，NAA 0.1～0.5 mL/L。最适合丛生芽增殖的组合为MS添加6-BA 1.0 mL/L，NAA 0.01～0.1 mL/L。1/2 MS添加NAA0.01～0.05 mL/L，最适宜生根。研究发现，生根苗的移栽对环境条件要求比较严格，如何选择适合的栽培基质，控制好温度与湿度，提高生根苗的成活率，还有待进一步研究。