ABT生根粉在沉香组织培养中生根的应用
2021-02-18张成华
张成华
摘要:为了解决沉香组培苗生根难的问题,我们应用ABT生根粉,诱导沉香组培苗在组织培养中生根,分析不同ABT生根粉浓度之间在沉香组培生根的差异及其生根效应。结果表明:单独使用生长素无生根表现,配合使用ABT生根粉后提高了生根率。为沉香组培快速繁育提供了有力的技术支撑。
关键词:沉香;ABT生根粉;组织培养
沉香树(学名:Aquilaria sinensis (Lour.) Spreng.),是一种热带及亚热带常绿乔木,属于瑞香科沉香属植物,树能生长达5-15米左右,在中国又被叫做土沉香、白木香、牙香树、莞香等等。沉香可以用作珍贵的中药材和高级香料用品,而且有着净化空气、美化环境的优点。随着人们对沉香药理作用的了解越来越深,作为日用品、熏香品、香水、药品和美容品等制作对沉香的需求不断增加,导致沉香的种植面积在不断扩大。
沉香种子繁殖存在着遗传多样性,而且种子繁殖是一种有性繁殖方式,不经过系统选育的种子会产生形状的变异,因此,其繁殖后代的生物性狀和经济形状都有所差别。选用优良的沉香植株,用组培的方法来快速繁殖大量苗木能保持植株的亲本性。有资料显示,沉香在组培生根中生根率不高。为此,我们把ABT生根粉应用在沉香组织培养中,应用不同ABT生根粉浓度,对提高其生根率我们做了试验研究与探索,获得了一定效果。
1 材料与方法
1.1 供试材料
选用沉香树当年新发出幼嫩的茎尖和茎段诱导无菌苗。
1.2 培养基
试验所用的培养基:改良MS培养基,搭配NAA、ABT进行。
2 试验方法
在初代培养中,我们选取生长旺盛、健壮、无病虫害的1-2年生沉香苗木。阳光比较充足、紫外线比较强烈的天气进行采集。采集外植体时,去掉多余的叶子和枝条。剪成带有一个腋芽和茎尖的枝条。我们把它放入烧杯中,然后盖上纱布,用皮筋扎紧,水龙头下流水冲洗0.5-1h。再到超净工作台上用75%乙醇消毒30s,5%的次氯酸钠消毒3-5min,无菌水冲洗3-4次,滤纸吸干表面的水分,再次修剪一下外植体,转入新鲜培养基MS(改良)+BA0.5-1.0mg/L上,培养室培养15-20d。茎段和顶芽诱导出新的腋芽约为2cm。此时我们将诱导的2cm左右的嫩芽,转入新鲜的继代增殖培养基MS+BA0.8-1.0mg/L中,大约15d嫩芽基部会长出愈伤组织,在愈伤组织上10-15d长出了多个芽点,芽点慢慢发育成嫩芽,增殖倍数在3-4,达到了一个良好的繁殖系数。
2.1 试验设计
经过3-4次继代培养的沉香苗,待生长到2-3cm时,植株生长健壮,把丛芽分割成单芽,接种至我们设计的生根培养基①1/4MS大量元素+1/2微量元素+NAA0.05mg/L;②1/4MS大量元素+1/2微量元素+IBA0.05mg/L;③1/4MS 大量元素+1/2微量元素+IBA0.05mg/L+ NAA0.05mg/L;④1/4MS大量元素+1/2微量元素+ABT1.0mg/L+NAA0.05mg/L;⑤1/4MS大量元素+1/2微量元素+ABT1.5mg/L+NAA0.05mg/L;⑥1/4MS大量元素+1/2微量元素+ABT2.0mg/L+NAA0.05mg/L,6种培养基中进行诱导生根。蔗糖20g/L,琼脂6.5g,PH6.8。每种培养基接种6瓶,每瓶4株,三个重复,放培养室中进行培养。光照强度1500-2000Lx,光照时间12小时,温度20-28℃。
3 试验结果与分析
在生根诱导培养基培养30d后,观察记录生长情况及生根率(见图1图2)。
通过试验结果分析:在试验⑤号使用ABT1.5mg/mL的培养基中,生根率为70%,生根长度为1.6cm,生根条数为2.3条。而在试验⑥号使用ABT2.0mg/mL的培养基中,生根长度为2.5cm,生根条数为1.5条,苗子长势健壮,生根率在80%。在无添加ABT生根粉的①②③ 号培养基的上,我们发现试验结果无生根现象,而且生长一段时间,苗子基本没有变化。试验④号使用ABT1.0mg/L的培养基也只有少量生根。在使用①②③的培养基中,无生根现象见(表1)。
上述试验充分证明,使用了ABT与NAA配合的生根培养基,有利于沉香组培苗的生根。在使用NAA和IBA的培养基上,没有诱导出根系。在同时使用NAA含有ABT生根粉的1.0、1.5、2.0的培养基上,有不同程度的生根效果。对促进生根长度最长的,以ABT1.5 mg/L最佳,ABT2.0 mg/L对生根条数是最佳的。通过本次试验,解决了沉香生根难的问题,也为我们在组培上使用ABT生根粉的提供了依据,同时本试验也为沉香的组培工厂化育苗提供了技术服务。
参考文献
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[6]百度百科.